目的:分析陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH）患者的臨床數(shù)據(jù),評估糖皮質(zhì)激素及化療的治療療效及預(yù)后影響因素;通過全外顯子測序技術(shù)分析PIG-A基因突變及PIG-A基因突變之外的其他基因突變,篩選可能致病突變并研究其在PNH克隆增殖中的作用,初步探討PNH克隆獲得增殖優(yōu)勢的可能機(jī)制。材料與方法:1.回顧性分析天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院血液科92例PNH患者的臨床資料,總結(jié)PNH患者的臨床特征及常見并發(fā)癥,觀察糖皮質(zhì)激素治療及化療的療效,分析影響生存和預(yù)后的危險因素,包括LDH水平、PNH克隆大小、是否合并血栓、是否合并骨髓衰竭、溶血發(fā)作頻率與預(yù)后之間的關(guān)聯(lián)。2.選取PNH患者13例,免疫磁珠分選外周血粒細(xì)胞的CD59^-細(xì)胞,提取CD59^-細(xì)胞基因組DNA進(jìn)行全基因組外顯子測序,對測序原始數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息處理、分析并篩選致病突變基因。分析PIG-A基因突變位點、突變形式及突變率;對上述篩選出的PIG-A基因之外的其他突變基因及血栓相關(guān)基因進(jìn)行基因聚類及突變聚類分析,同時進(jìn)行KEGG信號... 

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、92例PNH患者臨床特征及療效分析總結(jié)
    1.1 對象和方法
        1.1.1 研究對象
        1.1.2 研究方法
        1.1.3 治療方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 納入患者的基本特征
        1.2.2 實驗室檢查基線數(shù)據(jù)
        1.2.3 糖皮質(zhì)激素療效分析
        1.2.4 化療療效及安全性分析
        1.2.5 并發(fā)癥和轉(zhuǎn)歸
        1.2.6 PNH克隆大小與并發(fā)癥的關(guān)系
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、13例PNH患者全外顯子測序結(jié)果分析
    2.1 對象和方法
        2.1.1 病例和對照
        2.1.2 主要試劑、儀器
        2.1.3 主要生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用軟件
        2.1.4 主要生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫
        2.1.5 實驗方法
        2.1.6 生物信息處理分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 原始測序數(shù)據(jù)概括
        2.2.2 PIG-A基因突變分析
        2.2.3 PIG-A基因以外的其他體細(xì)胞基因聚類分析及突變聚類分析
        2.2.4 KEGG信號通路富集分析
        2.2.5 血栓相關(guān)突變基因分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、致病突變基因篩選及PNH克隆增殖機(jī)制研究
    3.1 對象和方法
        3.1.1 研究對象
        3.1.2 主要試劑、儀器
        3.1.3 實驗方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 K562細(xì)胞中18種突變基因mRNA的表達(dá)檢測
        3.2.2 PNH患者CD59-細(xì)胞內(nèi)PNH克隆檢測及分選流式圖
        3.2.3 PNH患者CD59-細(xì)胞中18種突變基因mRNA的表達(dá)檢測
        3.2.4 篩選目的基因進(jìn)行深入研究
        3.2.5 qPCR測定K562細(xì)胞中RBPJ、siRNA RBPJ mRNA的表達(dá)結(jié)果及轉(zhuǎn)染效率檢測
        3.2.6 siRNA RBPJ轉(zhuǎn)染前后24h,48h,72h K562細(xì)胞增殖活性比較
        3.2.7 siRNA RBPJ轉(zhuǎn)染前后24h,48h,72h K562細(xì)胞凋亡率比較
        3.2.8 siRNA RBPJ轉(zhuǎn)染前后K562細(xì)胞的細(xì)胞周期分布結(jié)果比較
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3651798