細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單元。分析單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的基因、小分子和蛋白質(zhì)等,有助于了解細(xì)胞的新陳代謝、信號(hào)傳導(dǎo)等現(xiàn)象,對(duì)揭示生命活動(dòng)規(guī)律及腫瘤疾病的早期診斷、預(yù)防和治療具有重要意義。因此,建立簡(jiǎn)單、靈敏、快速檢測(cè)單細(xì)胞中基因、小分子等物質(zhì)的檢測(cè)成為生命分析領(lǐng)域重要的研究課題。目前用于單細(xì)胞分析的技術(shù)和方法有顯微分析及顯微操作技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、熒光分析技術(shù)、光鑷技術(shù)、活細(xì)胞探針、數(shù)字成像技術(shù)及其相關(guān)聯(lián)用技術(shù),并且發(fā)展迅速。一些傳統(tǒng)的方法或存在取樣體積大、分析時(shí)間長(zhǎng)及靈敏度低等缺點(diǎn),難以適用于單細(xì)胞的分析,且獲取單個(gè)細(xì)胞中生物分子化學(xué)信息的檢測(cè)方法有限。電化學(xué)方法因其設(shè)備簡(jiǎn)單,不需要使用探針對(duì)目標(biāo)進(jìn)行標(biāo)記,很大程度上減小了對(duì)細(xì)胞正常生理機(jī)能的擾動(dòng)。同時(shí),由于收集電化學(xué)信號(hào)無(wú)需受到光學(xué)衍射極限的限制,單細(xì)胞電化學(xué)分析方法不需要以時(shí)間分辨率為代價(jià)實(shí)現(xiàn)高空間分辨率。制備微電極能力以及納米電化學(xué)理論快速發(fā)展,顯著提高了電化學(xué)測(cè)量的檢測(cè)極限、特異性和分辨率。因此,電化學(xué)分析方法成為正在迅速發(fā)展的單細(xì)胞分析方法。本論文的研究目的是制備新型的金微電極電化學(xué)生物傳感器,建立對(duì)TP53基因的檢測(cè)及亞細(xì)胞水平上... 

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 微電極
        1.1.1 微電極的概述
        1.1.2 微電極的分類
        1.1.3 微電極的特性
        1.1.4 微電極的制備及應(yīng)用
    1.2 單細(xì)胞分析
        1.2.1 單細(xì)胞分析的概述
        1.2.2 單細(xì)胞分析的特點(diǎn)
        1.2.3 單細(xì)胞分析檢測(cè)方法
    1.3 基于微電極的單細(xì)胞電化學(xué)傳感器研究進(jìn)展
    1.4 本論文研究目的及研究?jī)?nèi)容
第二章 基于金微電極檢測(cè)TP53基因的電化學(xué)傳感器
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        2.2.2 微電極的制備
        2.2.3 電化學(xué)生物傳感器的構(gòu)建
        2.2.4 電化學(xué)測(cè)量方法
        2.2.5 細(xì)胞樣品處理
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 金微電極的表征
        2.3.2 電化學(xué)生物傳感器用于TP53檢測(cè)的可行性分析
        2.3.3 條件優(yōu)化
        2.3.4 電化學(xué)生物傳感器檢測(cè)TP53基因的分析性能
        2.3.5 實(shí)際樣品的檢測(cè)
    2.4 結(jié)論
第三章 實(shí)時(shí)原位分析單細(xì)胞內(nèi)ATP分布和含量的電化學(xué)傳感器
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
        3.2.2 電化學(xué)生物傳感器的制備
        3.2.3細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 電化學(xué)測(cè)量方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 金微電極的表征
        3.3.2 電化學(xué)生物傳感器的分析特性
        3.3.3 亞細(xì)胞水平檢測(cè)ATP的可行性分析
        3.3.4 單個(gè)活細(xì)胞內(nèi)ATP分布和含量的檢測(cè)
        3.3.5 饑餓狀態(tài)下細(xì)胞內(nèi)ATP分布和含量的監(jiān)測(cè)
        3.3.6 Ca~(2+)誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)ATP分布和含量的監(jiān)測(cè)
        3.3.7 單個(gè)活細(xì)胞內(nèi)ATP分布和含量的檢測(cè)(PBS浴中)
        3.3.8 饑餓狀態(tài)與Ca~(2+)誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)ATP的檢測(cè)(PBS浴中)
    3.4 結(jié)論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士研究生期間的研究成果



本文編號(hào)：3649002