發(fā)布時(shí)間：2022-04-23 16:14

　　雙酚A（BPA）是一種典型的內(nèi)分泌干擾物（EDCs）,常用于生產(chǎn)加工日常生活中的各種塑料制品。BPA具有與雌二醇（E2）相似的分子結(jié)構(gòu),因此具有弱雌激素效應(yīng),可以干擾機(jī)體正常的內(nèi)分泌、生殖、免疫和神經(jīng)系統(tǒng)等。本實(shí)驗(yàn)室之前的研究表明BPA能干擾機(jī)體稀有鮈鯽雌魚的類固醇激素的合成,以及類固醇合成酶基因的表達(dá),但其潛在的分子機(jī)制尚不明確。為了探究其潛在的分子機(jī)制,本研究以稀有鮈鯽雌魚為試驗(yàn)動(dòng)物,用15μg/L的BPA進(jìn)行7 d和14 d的暴露試驗(yàn)。暴露試驗(yàn)結(jié)束后,HE染色切片觀察其卵巢的組織學(xué)變化,ELISA試劑盒檢測(cè)血清中類固醇激素含量,qRT-PCR檢測(cè)卵巢類固醇合成酶基因、雌激素受體基因以及DNA甲基化相關(guān)基因的mRNA表達(dá)量,克隆稀有鮈鯽cyp11a1的5’側(cè)翼序列,CHIP方法檢測(cè)BPA對(duì)類固醇合成基因上ERE-ER相互作用的影響,亞硫酸氫鹽測(cè)序法檢測(cè)BPA對(duì)類固醇合成基因5’側(cè)翼區(qū)DNA甲基化的影響。獲得的主要研究結(jié)果如下:1、BPA暴露14 d后,稀有鮈鯽雌魚的GSI和其血清中E2水平均顯著升高。表明BPA能干擾稀有鮈鯽雌魚的類固醇激素的合成。2、BPA暴露7 d后,稀有鮈鯽卵... 

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BPA與E2的分子結(jié)構(gòu)

圖 1-2 類固醇激素合成通路Fig. 1-2 The sex hormone biosynthesis pathway.1.2.2 類固醇激素合成酶基因類固醇激素的生物合成是一個(gè)復(fù)雜的過程，是以膽固醇為原料，在一系列關(guān)鍵酶和蛋白的催化下完成的，如圖 1-2 所示。1.2.2.1 StAR膽固醇是類固醇激素合成的前體，通常儲(chǔ)存于線粒體外的脂肪滴內(nèi)，必須轉(zhuǎn)運(yùn)至線粒體內(nèi)膜才能發(fā)生進(jìn)一步的反應(yīng)，但線粒體外膜和內(nèi)膜上的水層會(huì)阻礙膽固醇的擴(kuò)散。Star 基因編碼的類固醇急性調(diào)節(jié)蛋白（STAR）能克服這種障礙，完成膽固醇從線粒體外膜向線粒體內(nèi)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)過程（Stocco 2000），因此，該過程是類固醇激素合成過程中最為關(guān)鍵的調(diào)控步驟。研究表明，star 基因的正常表達(dá)能顯著刺激類固醇激素的合成（Clark et al. 1994）。人的 star 基因突變以及小鼠的 star 基因敲除均會(huì)引起腎上腺病變（Lin et al. 1995；Caron et al. 1997）。目前，在大部分脊椎動(dòng)物中已檢測(cè)并分離得到了StAR 蛋白，且保守性較高（Bauer et al. 2000），但其在不同物種中的組織表達(dá)具有較大

BPA 等 EDCs 會(huì)干擾 cyp19a1a 的表達(dá)。在我們之前的促進(jìn)稀有鮈鯽卵巢中 cyp19a1a 的表達(dá)（Liu et al. 2014a）。體（ER）子結(jié)構(gòu)醇核受體超家族的成員之一，大部分脊椎動(dòng)物有 ERα 和 ERβ有 6 個(gè)結(jié)構(gòu)域，N-C 端依次命名為結(jié)構(gòu)域 A-F，如圖 1-3 所示（K結(jié)構(gòu)域中，N 端結(jié)構(gòu)域 A 和 B 能以基因和組織特異性的方式通1）的磷酸化調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，是不依賴配體的轉(zhuǎn)錄激活功構(gòu)域 C 是主要的 DNA 結(jié)合域（DBD），由兩個(gè)功能不同的鋅指al. 1994）。C 端結(jié)構(gòu)域 E 是主要的配體結(jié)合域（LBD），與配體結(jié)F2）調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，是依賴配體的轉(zhuǎn)錄激活功能（Berry et 作為 LBD 域 DBD 之間的連接肽，包含受體二聚化序列和定位蛋白（HSP）的結(jié)合位點(diǎn)（Ogawa et al. 1998）。結(jié)構(gòu)域 F 可能通相互作用來區(qū)分雌激素激活劑與拮抗劑（Montano et al. 1995; K

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雙酚A對(duì)大豆、玉米和水稻葉綠素?zé)晒夥磻?yīng)的影響[J]. 李曼,王慶慶,王麗紅,葉亞新,周青.  環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[2]水環(huán)境中雙酚A的污染及其生態(tài)毒理效應(yīng)[J]. 鄧紅梅,梁春營(yíng),陳永亨.  環(huán)境污染與防治. 2009(07)
[3]稀有鮈鯽——一種新的魚類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[J]. 曹文宣,王劍偉.  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理. 2003(S1)
[4]稀有鮈鯽的繁殖生物學(xué)[J]. 王劍偉.  水生生物學(xué)報(bào). 1992(02)

碩士論文
[1]BPA早期暴露通過丘腦—垂體中的雌激素受體影響新生和成年大鼠的甲狀腺激素水平[D]. 范時(shí)駿.南昌大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3647535