細(xì)胞色素P450在昆蟲體內(nèi)廣泛存在,既能參與內(nèi)源物質(zhì)的合成和分解,又在外源物質(zhì)的解毒和代謝過程發(fā)揮作用,影響昆蟲的生長發(fā)育。黏蟲作為農(nóng)業(yè)上重要的害蟲之一,在我國多個地區(qū)廣泛為害,造成一定的經(jīng)濟損失。本研究在黏蟲轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中獲得了一條新的P450基因,通過RT-PCR進行序列驗證后,將基因序列分析,對其分子特性進行研究,并通過熒光定量PCR和RNAi技術(shù)對其功能進行深入研究,探究其在黏蟲外源物質(zhì)的解毒和對自然環(huán)境的適應(yīng)性方面的重要作用,為P450基因分子靶標(biāo)的篩選和黏蟲的有效防治提供基礎(chǔ)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）本研究獲得了一條黏蟲P450基因序列。序列總長2081 bp,包含長為1671 bp的開放閱讀框,編碼556個氨基酸,分子量約為63.25 kDa,等電點為8.43,由國際P450命名委員會命名為CYP4G200,GenBank登錄號為MG829854。進化分析表明其與鱗翅目夜蛾科昆蟲首先聚類,與鱗翅目非夜蛾科昆蟲再聚類,與非鱗翅目昆蟲最后聚類,符合形態(tài)分類特征。（2）黏蟲CYP4G200基因在不同發(fā)育階段和不同組織中均有表達,但表達量存在差異。2⁵齡... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

黏蟲CYP4G200信號肽預(yù)測

有信號肽切割位點，說明該蛋白可能為膜結(jié)合蛋白，見圖 3-2。橫坐標(biāo)代表 N 端前 70 個氨基酸，縱坐標(biāo)代表預(yù)測分?jǐn)?shù)。C-score 代表剪切位點值，S-score 代趨勢，Y-score 代表 S 值和 C 值的綜合參數(shù)圖 3-2 黏蟲 CYP4G200 信號肽預(yù)測Figure 3-2 Signal peptide prediction of CYP4G200 from M. separate過 http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/網(wǎng)站預(yù)測黏蟲 CYP4G200編碼的蛋白顯示其跨膜片段約在 13~35 bp 之間，推測膜上物質(zhì)可能與蛋白結(jié)合，見圖 3-3

結(jié)果與分析蛾科的草地貪夜蛾 Spodoptera frugiperda、棉葉蟲 Spodoptera littoralis 和甜菜夜蛾的 CYP4G75聚類，然后與棉鈴蟲 CYP4G8 聚類，與馬鈴薯甲蟲 Leptinotarsa decemlineata 的 CYP4G29、岡比亞按蚊 CYP4G16 和印度跳蟻 Harpegnathos saltator 的 CYP4G15 等非夜蛾科昆蟲親緣性較遠(yuǎn)，此結(jié)果基本符合形態(tài)學(xué)分類，見圖 3-4。ACZ97444.1 Antheraea pernyi 柞蠶100

【參考文獻】：
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本文編號：3620504