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馬爾尼菲籃狀菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-11 12:11
  馬爾尼菲籃狀菌(Talaromyces marneffei,TM)是一種溫度誘導(dǎo)雙形態(tài)真菌,25℃表現(xiàn)為霉菌狀,37℃或人體內(nèi)表現(xiàn)為酵母狀,酵母狀為其致病相?筛腥久庖呷毕萑巳,尤其是免疫受損嚴(yán)重的HIV陽(yáng)性患者,能引起嚴(yán)重的播散性馬爾尼菲籃狀菌。═alaromyces Marneffei,TSM),若得不到有效治療,病死率極高。該病區(qū)域性流行于東南亞和我國(guó)廣西,廣東,云南,香港等南方地區(qū)。其傳播途徑最常見(jiàn)是經(jīng)呼吸道吸入馬爾尼菲籃狀菌孢子導(dǎo)致感染。研究表明從菌絲相到酵母相的形態(tài)轉(zhuǎn)變是雙相真菌毒性所必需的,該雙相形態(tài)轉(zhuǎn)換特性與其致病性密切相關(guān),在酵母狀態(tài)可特異性表達(dá)多種毒力因子。馬爾尼菲籃狀菌它從霉菌相轉(zhuǎn)致病性酵母相的過(guò)程中不僅在細(xì)胞形態(tài)方面發(fā)生變化,且在細(xì)胞壁的組成成分、抗原分子和毒性的發(fā)生等方面也發(fā)生改變。但目前其雙相轉(zhuǎn)換特性及其致病性的分子機(jī)制研究尚不透徹。細(xì)胞壁完整性壓力應(yīng)答組分(cell wall integrity and stress response component)Wsc蛋白介導(dǎo)的CWI-MAPK信號(hào)通路在真菌細(xì)胞對(duì)外界環(huán)境壓力應(yīng)答中起重要作用。研究表明WSC蛋白... 

【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

馬爾尼菲籃狀菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究


圖1-1細(xì)胞壁完整性信號(hào)通路??Figure?1-1?Cell?wall?integrity?signaling?pathway??細(xì)胞壁應(yīng)激的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制,通過(guò)DNA微陣列技術(shù)和RNA測(cè)序技術(shù)??

序列,基因,結(jié)構(gòu)域,同源性


馬爾尼菲籃狀菌Wsc3和MpkA基因功能的初步研究?碩丨■?學(xué)位論義??2結(jié)果與分析??2.1通過(guò)NCB1分析比對(duì)馬爾尼菲籃狀菌Wsc3和MpkA基因蛋白序列??馬爾尼菲籃狀菌?Wsc3?基因(GenBank?accession?NO.?PMAA_048770)??有一個(gè)內(nèi)含子,編碼5%個(gè)氨基酸。在39到276位點(diǎn)編碼未知功能的區(qū)域??(DUF1996),在379到461位點(diǎn)編碼與碳水化合物結(jié)合有關(guān)的WSC結(jié)構(gòu)域??(圖1-3)。蛋由同源比對(duì)分析得丨1丨:與柄籃狀闡(Talaromycesstipitatus,??Ts)的?WSC?蛋白(XP_002481109.1?)同源性為?99%;與煙丨II丨霉(Aspergillus??fumigatus,Af)的WSC蛋A?(OXN06535.1?)同源性為81%;莢膜組織胞??衆(zhòng)菌(///?對(duì)op/aw^co/ww/atum)的?WSC?蛋白(XP_001543384.1?)同源性為??57?%?;與巴西副球抱子菌(Paracoccidioides?brasiliensis,Pb)?WSC?蛋白??(EEH23233.1)同源性為?56%;與雙相粗抱子球菌(Coccidioides?immitis)??的WSC蛋(XPJ)0丨242584.丨)同源性為55%。馬爾尼菲籃狀尚WSC域這??個(gè)結(jié)構(gòu)域可能與碳水化合物結(jié)合有關(guān)。??1?101?2(1?3M?4)9?510?5%??I?I?I?I?I?I?I?I?i?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?I?II?I?I??Superfanilies???

基因敲除,基因,結(jié)構(gòu)域,載體


?i?i?k?H?k???''j?U?'?\?i??fiTP?binding?sitt?\??山^?1?^??polypeptide?substrate?bir?dir?9???\????^_?‘?\?_??KD1?docking?site?i?\?4?U?4?^??activation?loop?<ft-loop)?4??Specific?hits??Superfanilies?PKc_?1?i?ke?superfam?i?1?y??圖1-4?MPKA基因保守結(jié)構(gòu)域??Figure?1-4?Conserved?domains?on?MpkA?gene??2.2馬爾尼菲籃狀菌Wsc3和MpkA基因敲除載體的構(gòu)建??2.2.1?Wsc3和MpkA基因側(cè)翼DNA片段PCR擴(kuò)增??以野生菌株FRR2161DNA為模板,以Wsc3和MpkA的??S1F/S1R-LK2,S5F-LK1/S5R為引物擴(kuò)增S1和S5基因片段,擴(kuò)增出Wsc3-Sl??基因片段大小為2043bp,Wsc3-S5基因片段大小為2394bp;?MpkA-Sl基因??片段大小為2263bp,MpkA-S5基因片段大小為2125bp。同時(shí)以質(zhì)粒??pLAX-233DNA?為模板,以?LlloxpyrGF/?L21oxpyrGR?為引物,擴(kuò)増??LloxpyrGloxL片段,此片段大小為1503bp。將以上擴(kuò)增出的DNA片段經(jīng)??1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(如圖1-5)。??44??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]生活垃圾處理技術(shù)的初步探討[J]. 艾碧英,張俊,葉瑋.  科技信息(科學(xué)教研). 2008(20)



本文編號(hào):3620256

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