目的研究miR-200c靶基因PCDH8對(duì)食管鱗癌（ESCC）細(xì)胞增殖、侵襲及血管形成的作用。方法采用TargetScan、PicTar等miRNA靶基因預(yù)測(cè)軟件篩選出miR-200c候選靶基因PCDH8;熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證PCDH8為miR-200c的靶基因;免疫組化檢測(cè)食管鱗癌組織中PCDH8的表達(dá)并分析其與臨床病理參數(shù)間的關(guān)系;qPCR及檢測(cè)KYSE-150細(xì)胞株與HET-1A細(xì)胞株的PCDH8和miR-200c mRNA及蛋白的表達(dá)Western blotting水平;PCDH8基因過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)染KYSE-150細(xì)胞株,觀察轉(zhuǎn)染后KYSE-150細(xì)胞增殖、遷移、侵襲及血管形成的改變。結(jié)果（1）熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)PCDH8為miR-200c的靶基因;（2）與對(duì)照組相比,食管鱗癌組織中PCDH8表達(dá)降低（P<0.05）,PCDH8表達(dá)與腫瘤大小（P值=0.011）、組織學(xué)分級(jí)（P值=0.002）和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P值=0.017）相關(guān);（3）與正常食管鱗狀上皮HET-1A細(xì)胞相比,KYSE-150細(xì)胞miR-200c表達(dá)顯著增加（P<0.05）,而PCDH8表達(dá)... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PCDH8在食管鱗癌組織（×100）和鄰近正常食管組織中的表達(dá)（×200）

第二章結(jié)果33淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)3724130.017*6.542有511932統(tǒng)計(jì)分析采用χ2檢驗(yàn).*P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義2.2PCDH8在30對(duì)新鮮食管鱗癌組織中的表達(dá)RT-PCR檢測(cè)30對(duì)新鮮ESCC組織及其正常鄰近組織中PCDH8mRNA的表達(dá)，Westernblot檢測(cè)其PCDH8蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，食管癌組織中PCDH8mRNA及蛋白的表達(dá)均顯著降低（P=0.006；P<0.001）（圖2A、B）。圖2ART-PCR檢測(cè)食管癌組織和鄰近正常食管組織中PCDH8mRNA的表達(dá)（P=0.006）；圖2BWesternblot檢測(cè)食管癌組織和鄰近正常食管組織中PCDH8的表達(dá)（P<0.001）2.3PCDH8在食管鱗癌細(xì)胞株中的表達(dá)qPCR及Westernblot檢測(cè)食管癌細(xì)胞ECA-109、EC9706、KYSE-150、TE-1細(xì)胞株和正常食管HET-1A細(xì)胞株中PCDH8mRNA和蛋白的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCDH8在ESCC細(xì)胞中的表達(dá)均明顯低于正常食管細(xì)胞，其中KYSE-150細(xì)胞中PCDH8的表達(dá)水平最低（圖3A、B）。因此，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中選取PCDH8表達(dá)最低的KYSE-150細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

第二章結(jié)果33淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)3724130.017*6.542有511932統(tǒng)計(jì)分析采用χ2檢驗(yàn).*P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義2.2PCDH8在30對(duì)新鮮食管鱗癌組織中的表達(dá)RT-PCR檢測(cè)30對(duì)新鮮ESCC組織及其正常鄰近組織中PCDH8mRNA的表達(dá)，Westernblot檢測(cè)其PCDH8蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，食管癌組織中PCDH8mRNA及蛋白的表達(dá)均顯著降低（P=0.006；P<0.001）（圖2A、B）。圖2ART-PCR檢測(cè)食管癌組織和鄰近正常食管組織中PCDH8mRNA的表達(dá)（P=0.006）；圖2BWesternblot檢測(cè)食管癌組織和鄰近正常食管組織中PCDH8的表達(dá)（P<0.001）2.3PCDH8在食管鱗癌細(xì)胞株中的表達(dá)qPCR及Westernblot檢測(cè)食管癌細(xì)胞ECA-109、EC9706、KYSE-150、TE-1細(xì)胞株和正常食管HET-1A細(xì)胞株中PCDH8mRNA和蛋白的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCDH8在ESCC細(xì)胞中的表達(dá)均明顯低于正常食管細(xì)胞，其中KYSE-150細(xì)胞中PCDH8的表達(dá)水平最低（圖3A、B）。因此，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中選取PCDH8表達(dá)最低的KYSE-150細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-203在舌癌組織中的表達(dá)及其對(duì)Tca8113細(xì)胞活力和侵襲的影響[J]. 鄭紅,張文玲,林波,張賽男,劉瑞敏,薛鵬.  中國(guó)病理生理雜志. 2016(10)
[2]非小細(xì)胞肺癌血清miR-197和miR-203的表達(dá)及意義[J]. 張振華,張偉,劉偉良,王勇,王輝,張濰.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(19)
[3]Current understanding of the functional roles of aberrantly expressed micro RNAs in esophageal cancer[J]. Christine Kestens,Peter D Siersema,Jantine WPM van Baal.  World Journal of Gastroenterology. 2016(01)
[4]慢性髓細(xì)胞白血病患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞miR-203、miR-451、miR-17表達(dá)及其臨床意義[J]. 楊再林,葉楓,但國(guó)蓉,陳潔平,張勇,鄒仲敏.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(22)
[5]MiRNA profile in esophageal squamous cell carcinoma:Downregulation of miR-143 and miR-145[J]. Bing-Li Wu,Hai-Feng Zhang,Qiao Huang,Guo-Qiang Fang,En-Min Li,Department of Biochemistry and Molecular Biology,Medical College of Shantou University,Shantou 515041,Guangdong Province,China Li-Yan Xu,Ze-Peng Du,Lian-Di Liao,Institute of Oncologic Pathology,Medical College of Shantou University,Shantou 515041,Guangdong Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2011(01)



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