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羅伯茨綠僵菌絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(Ark1)基因的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-25 04:22
  作為一種絲狀真菌,綠僵菌可以用于植物病害和植物蟲(chóng)害的防治。然而,這些基于分生孢子的真菌殺蟲(chóng)劑在殺蟲(chóng)劑市場(chǎng)所占總的份額還很小,主要原因是由于綠僵菌與其他蟲(chóng)生真菌殺蟲(chóng)劑一樣,殺蟲(chóng)時(shí)效長(zhǎng)、防效易變化、保質(zhì)期不長(zhǎng)等是其缺點(diǎn)。因此,有必要深入研究綠僵菌抗逆和致病的調(diào)控機(jī)理,尋找與抗逆和致病相關(guān)的重要途徑及關(guān)鍵基因具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)室之前完成了綠僵菌孢子熱脅迫過(guò)程中的全基因差異表達(dá)譜,結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠僵菌孢子熱脅迫過(guò)程中存在數(shù)千上調(diào)基因,其中綠僵菌絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶基因(Serine/threonine protein kinase,MrArk1)顯著上調(diào)表達(dá)。首先,本研究對(duì)綠僵菌MrArk1基因做生物信息學(xué)分析;其次,利用同源重組的原理,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化技術(shù),獲得MrArk1的基因敲除株(△MrArk1)和回補(bǔ)株(△MrArk1::MrArk1);最后,通過(guò)比較敲除突變菌株(△MrArk1)與野生型菌株(Mr2575)、回補(bǔ)突變菌株(△MrArk1::MrArk1)在生長(zhǎng)發(fā)育、產(chǎn)孢量、抗逆和毒力等方面的差異,從而明確MrArk1基因的生物學(xué)功能。主要的研究結(jié)果如下:1.在NCBI中搜索MrA... 

【文章來(lái)源】:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

羅伯茨綠僵菌絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(Ark1)基因的功能研究


MrArk1蛋白結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)發(fā)育分析

回補(bǔ),條帶,內(nèi)參,野生型


野生型和回補(bǔ)菌株作為對(duì)照都能擴(kuò)增出條帶,大小為 342bp,GAPDH 作為內(nèi)參都能擴(kuò)增出條帶(圖3-2C)。A, Up: The Upstream fragment, Dn:Downstream fragmentB/C/D 所用引物分別是針對(duì)目的基因、BAR 和 BEN:1:WT,2:ΔARK,3:CP。

速率下降,萌發(fā)時(shí)間,菌落生長(zhǎng)


22圖 3-3△MrArk1 菌落生長(zhǎng)速率下降及相對(duì)萌發(fā)時(shí)間延遲igure 3-3 Decrease in growth rate and relative germination time of △MrArk1 colonies

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)胞內(nèi)吞的研究進(jìn)展[J]. 范真真,陳虹,黃秉仁.  生命的化學(xué). 2014(04)
[2]絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)研究進(jìn)展[J]. 李娟,楊金奎,梁連銘,張克勤.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(04)
[3]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)真菌遺傳轉(zhuǎn)化的研究進(jìn)展[J]. 方衛(wèi)國(guó),張永軍,楊星勇,裴炎.  中國(guó)生物工程雜志. 2002(05)



本文編號(hào):3607889

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