目的探討微纖維相關(guān)蛋白5（MFAP5）在膀胱癌中的表達水平及其對膀胱癌細胞的生物學(xué)作用。方法收集上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院確診的膀胱癌患者手術(shù)切除標本,通過免疫組織化學(xué)染色檢測MFAP5的表達情況。分別從膀胱腫瘤組織和正常膀胱組織分離純化得到腫瘤相關(guān)成纖維細胞（CAF）和正常成纖維細胞（NF）,通過qRT-PCR檢測CAF、NF及人膀胱癌細胞系（T24、5637、UMUC3、J82）中MFAP5 mRNA的相對表達量。通過美國癌癥基因組圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫及基因表達匯編（GEO）數(shù)據(jù)庫GSE13507數(shù)據(jù)集中的膀胱癌表達譜數(shù)據(jù),分析MFAP5表達與膀胱癌進展和惡性程度的相關(guān)性。用重組人MFAP5蛋白處理膀胱癌細胞系T24、5637,檢測其對細胞遷移和侵襲能力及遷移相關(guān)蛋白表達的影響。結(jié)果 MFAP5在膀胱癌組織中主要表達于腫瘤間質(zhì),其表達水平與膀胱癌T分期和腫瘤分級有關(guān)（P均<0.05）,并且CAF中MFAP5 mRNA相對表達量高于NF、T24、5637、UMUC3、J82細胞（P均<0.01）。TCGA和GSE13507數(shù)據(jù)庫分析結(jié)果均顯示,高表達MFAP5的膀胱癌... 

【文章來源】：第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2020,41(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

MFAP5表達水平與EMT相關(guān)分子密切相關(guān)

表 2 蛋白質(zhì)印跡法檢測rhMFAP5處理后膀胱癌細胞EMT相關(guān)蛋白表達定量結(jié)果Tab 2 Quantitative results of EMT-related protein expression in bladder cancer cells treated with rhMFAP5 detected by Western blottingn=3,xˉ±s Protein rhMFAP5 (ng ? mL-1) 0 200 400 T24 cell E-cadherin 0.980±0.036 0.530±0.091* 0.333±0.026** N-cadherin 1.023±0.071 2.167±0.144** 3.337±0.180** MMP9 0.997±0.069 2.077±0.100** 2.227±0.087** ZEB1 0.957±0.048 1.330±0.075* 1.973±0.139** Twist 1.043±0.130 1.280±0.024* 2.687±0.118** 5637 cell E-cadherin 0.980±0.034 0.597±0.062* 0.533±0.026** N-cadherin 1.010±0.086 2.097±0.161** 3.203±0.060** MMP9 1.010±0.054 2.050±0.049** 2.227±0.078** ZEB1 0.967±0.048 1.430±0.065* 2.107±0.107** Twist 1.043±0.130 1.380±0.024* 2.520±0.170**rh MFAP5:Recombinant human microfibril-associated protein 5;EMT:Epithelial-mesenchymal transition;MMP9:Matrix metalloproteinase 9;ZEB1:Zinc-finger E-box-binding protein 1.*P<0.05,**P<0.01 vs 0 ng/m L rh MFAP5 group3 討 論

切片免疫組織化學(xué)結(jié)果(圖1)顯示,在正常膀胱上皮組織和非肌層浸潤性膀胱癌組織中,MFAP5在間質(zhì)組織中呈低表達狀態(tài);而在肌層浸潤性膀胱癌組織中,MFAP5高表達于腫瘤間質(zhì)。肌層浸潤性膀胱癌組織中MFAP5的染色評分[(2.04±0.15)分,n=20]高于非肌層浸潤膀胱癌組織[(1.20±0.15)分,n=30)],差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。如表1所示,MFAP5的表達水平與膀胱癌T分期和腫瘤分級有關(guān)(P<0.01、P<0.05)。qRT-PCR檢測結(jié)果顯示,CAF中MFAP5 mRNA相對表達量(25.07±1.34,n=3)高于NF及人膀胱癌細胞系T24、5637、UMUC3、J82(5.38±0.04、1.14±0.09、2.56±0.10、0.60±0.19、0.98±0.12,n=3),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.01)。表 1 MFAP5表達與膀胱癌患者臨床病理特征的關(guān)系Tab 1 Correlation between MFAP5 expression and clinicopathological features of bladder cancer patientsn Characteristic N MFAP5 expression χ2 value P value High Low Gender 0.936 0.333 Male 37 20 17 Female 13 5 8 Age (year) 1.299 0.254 ≥65 28 16 12 ＜65 22 9 13 T stage 6.750 0.009 Ta-1 30 10 20 T2-4 20 15 5 Tumor grade 4.160 0.041 Low 19 6 13 High 31 19 12 N stage 2.168 0.141 N0 41 18 23 ≥N1 9 7 2 MFAP5:Microfibril-associated protein 5


本文編號：3601413