胰腺癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,惡性程度高,早期診斷困難,預(yù)后極差,目前仍缺乏有效治療手段。DNA甲基化是主要的表觀遺傳修飾之一,與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。鑒定腫瘤細胞異常DNA甲基化變化,并針對性地進行調(diào)節(jié)將有利于腫瘤的診斷和治療。CDH1（Cadherin 1）基因位于人染色體16q22,編碼E-鈣粘蛋白,參與調(diào)節(jié)細胞粘附、遷移和上皮細胞增殖。CDH1基因的突變與胃癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌和卵巢癌密切相關(guān),研究表明,DNA甲基化在CDH1基因的表達調(diào)節(jié)中起作用,但在不同腫瘤中作用有差異。本研究檢測了CDH1在不同胰腺癌細胞中的基因表達及啟動子區(qū)DNA甲基化水平,通過轉(zhuǎn)染載體CRISPR/dCas9-Dnmt3a和gRNA-CDH1,檢測DNA甲基化影響CDH1基因表達及對細胞惡性表型的作用,并探討了特異位點DNA甲基化修飾在腫瘤治療中的潛在應(yīng)用。1、胰腺癌中DNA甲基化對基因表達的影響根據(jù)已發(fā)表的論文篩選腫瘤相關(guān)基因EGFR、HOXB5、CDH1、DDR2和RUNX3。為研究基因啟動子區(qū)DNA甲基化對基因表達的作用,利用實時定量PCR檢測基因mRNA表達,重亞硫酸氫鹽測序PCR... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同細胞系中EGFR的表達水平和DNA甲基化水平

圖 2.2 不同細胞系中 HOXB5 的表達水平和 DNA 甲基化水平。A. DNA 甲基化水平。B. 基因表達水平（***表 p<0.001）。Fig. 2.2 HOXB5 gene expression and DNA methylation in different cell lines.ethylation levels of HOXB5 promoter regions. B. Expression levels of HOXB5 mRN因表達及其啟動子區(qū) DNA 甲基化檢測結(jié)果顯示，與正常胰腺細胞 HPC-Y5 相比，DDR2 在癌細胞 PANC-1 中1），在 CFPAC-1 中表達升高。測序結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)：DDR2 啟動子區(qū)甲胞 HPC-Y5 中為 90%，與之相比，在胰腺癌細胞 PANC-1 和 CFPAC-5%、95%。兩者結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)在胰腺癌中所檢測的 DDR2 基因啟動子不相關(guān)。

圖 2.3 不同細胞系中 DDR2 的表達水平和 DNA 甲基化水平。A. DNA 甲基化水平。B. 基因表達水平（***表 p<0.001）。Fig. 2.3 DDR2 gene expression and DNA methylation in different cell lineylation levels of DDR2 promoter regions. B. Expression levels of DDR2 m表達及其啟動子區(qū) DNA 甲基化檢測顯示，與正常胰腺細胞 HPC-Y5 相比，RUNX3 在癌細胞 PAN（P<0.001）。測序結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)：RUNX3 啟動子區(qū)甲基化胰腺癌細胞 PANC-1、CFPAC-1 中均為大于 90%。兩者結(jié)果RUNX3 基因啟動子區(qū) DNA 甲基化與其表達不相關(guān)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]可切除胰腺癌新輔助治療價值及評價[J]. 梁廷波,白雪莉,李想.  中國實用外科雜志. 2018(07)
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[3]晚期癌癥患者姑息治療的現(xiàn)狀與建議[J]. 王繼偉,陳學(xué)芬,宮霄歡,趙德余,高晶蓉,袁正平,余金明.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2014 (07)



本文編號：3596285