小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）是一種堿基長度為21～24 bp的雙鏈RNA,其主要生物學(xué)功能是參與RNA干擾（RNA interference, RNAi）。RNAi是調(diào)節(jié)基因表達的一種保守機制,通過靶向降解mRNA或阻止mRNA翻譯為蛋白質(zhì)來實現(xiàn)基因沉默。siRNA的檢測方法主要有實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）、轉(zhuǎn)錄組學(xué)（RNA-seq）、諾瑟雜交（northern blot）、酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA）、質(zhì)譜法等,主要以"實質(zhì)等同性"為原則對轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進行安全性評價。RNAi在改良農(nóng)作物的遺傳特性、提高農(nóng)產(chǎn)品的營養(yǎng)價值方面發(fā)揮出巨大潛力,目前全球已有43個國家批準(zhǔn)了轉(zhuǎn)基因作物的商業(yè)化種植。但是,自從轉(zhuǎn)基因食品商業(yè)化以來,社會及公眾對于其安全性的爭論一直在持續(xù)。本文介紹了siRNA介導(dǎo)的RNAi的機制、siRNA檢測技術(shù)、siRNA介導(dǎo)的RNAi轉(zhuǎn)基因食品安... 

【文章來源】：食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2020,11(13)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

siRNA介導(dǎo)的RNAi原理圖[18]

莖環(huán)RT-qPCR也包括兩步反應(yīng)。如圖2,莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物可以形成莖環(huán)結(jié)構(gòu),結(jié)合到siRNA的3"末端,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下生成cDNA;第二步反應(yīng)與引物延長RT-qPCR類似[23]。相比傳統(tǒng)引物,莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有更高的特異性和反轉(zhuǎn)錄效率。但是,每個siRNA都需要設(shè)計莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物,會導(dǎo)致操作復(fù)雜,成本高,耗時長,該方法適用于少量靶向siRNA的檢測[24]。3.2 RNA-seq

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]外源dsRNA/siRNA介導(dǎo)的玉米粘蟲RNA干擾機制的研究[D]. 張亞楠.內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[2]家蠶轉(zhuǎn)座子來源siRNA的鑒定與分析[D]. 李丹.浙江理工大學(xué) 2015



本文編號：3590472