小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）是一種堿基長(zhǎng)度為21～24 bp的雙鏈RNA,其主要生物學(xué)功能是參與RNA干擾（RNA interference, RNAi）。RNAi是調(diào)節(jié)基因表達(dá)的一種保守機(jī)制,通過靶向降解mRNA或阻止mRNA翻譯為蛋白質(zhì)來實(shí)現(xiàn)基因沉默。siRNA的檢測(cè)方法主要有實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）、轉(zhuǎn)錄組學(xué)（RNA-seq）、諾瑟雜交（northern blot）、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA）、質(zhì)譜法等,主要以"實(shí)質(zhì)等同性"為原則對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。RNAi在改良農(nóng)作物的遺傳特性、提高農(nóng)產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值方面發(fā)揮出巨大潛力,目前全球已有43個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)了轉(zhuǎn)基因作物的商業(yè)化種植。但是,自從轉(zhuǎn)基因食品商業(yè)化以來,社會(huì)及公眾對(duì)于其安全性的爭(zhēng)論一直在持續(xù)。本文介紹了siRNA介導(dǎo)的RNAi的機(jī)制、siRNA檢測(cè)技術(shù)、siRNA介導(dǎo)的RNAi轉(zhuǎn)基因食品安... 

【文章來源】：食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2020,11(13)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

siRNA介導(dǎo)的RNAi原理圖[18]

莖環(huán)RT-qPCR也包括兩步反應(yīng)。如圖2,莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物可以形成莖環(huán)結(jié)構(gòu),結(jié)合到siRNA的3"末端,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下生成cDNA;第二步反應(yīng)與引物延長(zhǎng)RT-qPCR類似[23]。相比傳統(tǒng)引物,莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物有更高的特異性和反轉(zhuǎn)錄效率。但是,每個(gè)siRNA都需要設(shè)計(jì)莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物,會(huì)導(dǎo)致操作復(fù)雜,成本高,耗時(shí)長(zhǎng),該方法適用于少量靶向siRNA的檢測(cè)[24]。3.2 RNA-seq

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]納米級(jí)載RNA系統(tǒng)在卵巢癌治療中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 崔曉娟,狄文.  腫瘤. 2018(02)
[2]基因胞內(nèi)傳遞中的內(nèi)體逃逸技術(shù)[J]. 王文喜,代凱,洪璐,蔡婷,唐嵐.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2014(08)
[3]第三代測(cè)序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 張得芳,馬秋月,尹佟明,夏濤.  中國(guó)生物工程雜志. 2013(05)
[4]莖環(huán)法RT-qPCR定量檢測(cè)細(xì)胞抗豬瘟病毒siRNA的表達(dá)[J]. 劉帥,李江南,袁婷,楊凡力,逄大欣,涂長(zhǎng)春.  生物工程學(xué)報(bào). 2012(01)

碩士論文
[1]外源dsRNA/siRNA介導(dǎo)的玉米粘蟲RNA干擾機(jī)制的研究[D]. 張亞楠.內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[2]家蠶轉(zhuǎn)座子來源siRNA的鑒定與分析[D]. 李丹.浙江理工大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3590472