目的:研究微小RNA（microRNA,miR）-218-5p對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的牙周膜干細(xì)胞（PDLSCs）增殖、凋亡和炎癥的影響及作用機(jī)制。方法:分離培養(yǎng)PDLSCs,用LPS處理PDLSCs細(xì)胞建立炎癥模型,MTT法和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞存活率和凋亡率,qRT-PCR和Western blot分別檢測(cè)miR-218-5p和Toll樣受體2（TLR2）蛋白的表達(dá),檢測(cè)細(xì)胞中白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-ɑ（TNF-ɑ）的含量,雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)miR-218-5p和TLR2的靶向關(guān)系。結(jié)果:LPS處理人PDLSCs 0、12、24和48 h,PDLSCs細(xì)胞中miR-218-5p表達(dá)下調(diào),TLR2表達(dá)上調(diào),細(xì)胞存活率下降,凋亡率升高,炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高,呈時(shí)間依賴趨勢(shì),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;miR-218-5p靶向調(diào)控TLR2表達(dá);過表達(dá)miR-218-5p或沉默TLR2均可提高細(xì)胞存活率,降低細(xì)胞凋亡率和炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量;過表達(dá)TLR2可逆轉(zhuǎn)miR... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué)研究. 2020,36(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

Western blot檢測(cè)人牙周膜干細(xì)胞TLR2蛋白表達(dá)

通過TargetScan預(yù)測(cè)miR-218-5p的序列中含有與TLR2互補(bǔ)的結(jié)合位點(diǎn),見圖2。雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)結(jié)果表明,與miR-con組相比,miR-218-5p組的野生型WT-TLR2的熒光素酶活性顯著下降(P<0.05),突變型MUT-TLR2的熒光素酶活性無明顯變化(圖3);Western blot結(jié)果表明,過表達(dá)miR-218-5p可顯著下調(diào)TLR2蛋白含量,抑制miR-218-5p可顯著上調(diào)TLR2蛋白含量,均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見圖4。表明miR-218-5p靶向調(diào)控TLR2表達(dá)。圖3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-218-5p與TLR2靶向關(guān)系

圖3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-218-5p與TLR2靶向關(guān)系


本文編號(hào)：3589868