目的:研究微小RNA（microRNA,miR）-218-5p對脂多糖（LPS）誘導的牙周膜干細胞（PDLSCs）增殖、凋亡和炎癥的影響及作用機制。方法:分離培養(yǎng)PDLSCs,用LPS處理PDLSCs細胞建立炎癥模型,MTT法和流式細胞術分別檢測細胞存活率和凋亡率,qRT-PCR和Western blot分別檢測miR-218-5p和Toll樣受體2（TLR2）蛋白的表達,檢測細胞中白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-ɑ（TNF-ɑ）的含量,雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測miR-218-5p和TLR2的靶向關系。結(jié)果:LPS處理人PDLSCs 0、12、24和48 h,PDLSCs細胞中miR-218-5p表達下調(diào),TLR2表達上調(diào),細胞存活率下降,凋亡率升高,炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高,呈時間依賴趨勢,差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;miR-218-5p靶向調(diào)控TLR2表達;過表達miR-218-5p或沉默TLR2均可提高細胞存活率,降低細胞凋亡率和炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量;過表達TLR2可逆轉(zhuǎn)miR... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學研究. 2020,36(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

Western blot檢測人牙周膜干細胞TLR2蛋白表達

通過TargetScan預測miR-218-5p的序列中含有與TLR2互補的結(jié)合位點,見圖2。雙熒光素酶報告系統(tǒng)結(jié)果表明,與miR-con組相比,miR-218-5p組的野生型WT-TLR2的熒光素酶活性顯著下降(P<0.05),突變型MUT-TLR2的熒光素酶活性無明顯變化(圖3);Western blot結(jié)果表明,過表達miR-218-5p可顯著下調(diào)TLR2蛋白含量,抑制miR-218-5p可顯著上調(diào)TLR2蛋白含量,均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見圖4。表明miR-218-5p靶向調(diào)控TLR2表達。圖3 雙熒光素酶報告實驗檢測miR-218-5p與TLR2靶向關系

圖3 雙熒光素酶報告實驗檢測miR-218-5p與TLR2靶向關系


本文編號：3589868