目的:使用從嗜鹽桿菌NRC-1（Halobacterium NRC-1,Halo）中提取并純化生物合米泡（Biosynthetic nanobubble,BNBs）,通過將其與PEI共孵育的方式構(gòu)建一種新型納米級陽離子非病毒載體（Cationic biosynthetic nanobubble,CBNBs）并進(jìn)一步制備搭載質(zhì)粒DNA的CBNBs（Plasmid DNA loaded CBNBs,DNA/CBNBs）轉(zhuǎn)染復(fù)合物。最終在體外細(xì)胞模型以及體內(nèi)腫瘤模型中評價該材料聯(lián)合聚焦超聲在基因靶向遞送中的效果并與傳統(tǒng)材料進(jìn)行比較分析。方法:1.第一部分:（1）.培養(yǎng)Halo,待細(xì)菌增殖到一定程度后,將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并通過靜置的方式,初步分選內(nèi)含BNBs（漂浮至溶液頂層）與不含BNBs（下沉至溶液底層）的細(xì)菌。（2）.提取上層溶液并使用低滲透沖擊法破壞Halo細(xì)胞膜,使其釋放內(nèi)含的BNBs。使用低速離心法分離細(xì)胞碎片與BNBs并通過重復(fù)操作的方式純化BNBs,最終獲取只含BNBs的溶液。（3）.成功提取并純化BNBs后,使用透射電鏡（Transmission electron mic... 

【文章來源】：新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

Halo的培養(yǎng)及BNBs的提取流程示意圖

圖 2 Halo 的培養(yǎng)及 BNBs 的提取過程中各階段實物圖Fig.2 Pictures of different stages: 培養(yǎng)約 2 周的 Halo 培養(yǎng)基，培養(yǎng)基顏色逐漸變亮；B: 培養(yǎng)基在分液漏斗中靜置 形成粉白色環(huán)，為漂浮至頂端的 Halo；C: 棄去下層溶液，只保留上層粉白色培養(yǎng)加入 TMC 裂解液裂解 Halo，釋放 BNBs；D: 加入裂解液的溶液離心后分為兩層

圖 3 BNBs 的表征分析Fig.3 General characteristics of BNBsA:TEM 下 BNBs 的形態(tài)。BNBs 呈梭形結(jié)構(gòu)，長度約為 100~300nm，寬度約為 220~2: TEM 下 MBs 的形態(tài)。MBs 呈圓球形結(jié)構(gòu)，直徑在 800~2000 nm 之間；C: BNBs 的情況；D: MBs 的粒徑分布情況；E: BNBs 與 MBs 的 Zeta 電位分析；F: BNBs 體積


本文編號：3585550