【目的】酚氧化酶（phenoloxidase,PO）是昆蟲體內(nèi)的免疫蛋白,在昆蟲體內(nèi)起重要的調(diào)節(jié)作用,主要以無活性的酚氧化酶原（prophenoloxidase,PPO）形式存在。本研究在轉(zhuǎn)錄組測(cè)序獲得白背飛虱（Sogatella furcifera）3條PPO序列的基礎(chǔ)上,通過分析白背飛虱體內(nèi)不同SfPPO的發(fā)育和組織表達(dá)模式,并進(jìn)一步抑制SfPPO的表達(dá)以及病原菌誘導(dǎo),探討SfPPO在白背飛虱體內(nèi)的生物學(xué)功能。【方法】以白背飛虱3條SfPPO序列為研究對(duì)象,利用生物信息學(xué)方法分析其蛋白結(jié)構(gòu)以及與其他昆蟲之間的同源性。并以注射綠色熒光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的dsRNA作為對(duì)照組,通過注射合成的ds SfPPO后采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)基因表達(dá)抑制效果;此外,為了探究SfPPO在白背飛虱生長發(fā)育和免疫應(yīng)答方面的作用,利用qRT-PCR檢測(cè)SfPPO在不同發(fā)育階段及組織中的表達(dá)情況,以及注射大腸桿菌（Escherichia coli）和枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）后3個(gè)SfPPO的誘導(dǎo)表達(dá)情況。【結(jié)果】... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,53(15)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：12 頁

【部分圖文】：

注射48 h和72 h后SfPPO的表達(dá)情況

對(duì)于獲得的白背飛虱的3條SfPPO序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)白背飛虱的3條SfPPO(SfPPO1、SfPPO2-1和SfPPO2-2）的開放閱讀框長度分別為2 079、999、2 070 bp，分別編碼692、332、689個(gè)氨基酸，預(yù)測(cè)蛋白分子量分別為79.84、37.67、79.53 kD，等電點(diǎn)分別為6.43、9.56、6.20。通過SfPPO蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)域TMHMM分析，推測(cè)這3個(gè)SfPPO蛋白不含跨膜區(qū)域，可能是SfPPO在核糖體合成后，經(jīng)過翻譯加工成為成熟蛋白質(zhì)，可通過細(xì)胞破裂釋放進(jìn)入細(xì)胞液中。DictyOGlyc預(yù)測(cè)結(jié)果表明SfPPO1和SfPPO2-2只含1個(gè)糖基化位點(diǎn)，而SfPPO2-1不含糖基化位點(diǎn)（圖1）。2.2 SfPPO蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化分析

不同SfPPO發(fā)育表達(dá)模式不同，Sf PPO1在成蟲第3天表達(dá)量最高，5齡第2天表達(dá)量最低（圖3-A);Sf PPO2-2和Sf PPO2-1發(fā)育表達(dá)模式一致，分別在成蟲第3天時(shí)表達(dá)量最高，成蟲第1天時(shí)表達(dá)量最低（圖3-B、3-C）。2.4 SfPPO的組織表達(dá)分析

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3582016