杜仲（Eucommia ulmoides Oliver）是第三紀孑遺植物,單科單屬單種,在中國主要分布于四川、湖南、貴州等地區(qū)。杜仲藥用成分主要為苯丙素類、環(huán)烯醚萜類、木脂素類等化合物,且木脂素類化合物中的松脂醇雙葡萄糖苷具有雙向調節(jié)血壓功效。研究表明,Dirigent（DIR）蛋白在生物氧化酶或氧化劑的存在下,可以指導木質素單體偶聯(lián)形成二聚體,進而參與木質素和木脂素分子的生物合成,并在響應生物和非生物脅迫因素誘導過程中有重要作用。因此,對DIR蛋白的功能進行研究具有重要的價值。本研究以實驗室前期克隆得到EuDIR1蛋白編碼基因為基礎,對EuDIR1基因進行原核表達、同時進行遺傳轉化方面的研究,研究結果如下:1、EuDIR1基因原核表達及蛋白純化本研究構建攜帶His標簽原核表達載體pET-30a-EuDIR1和pMCSG19-EuDIR1,將原核表達載體分別轉化表達宿主菌E.coli BL21（DE3）。結果顯示,15℃下0.1 mmol/L IPTG誘導6 h后,蛋白的沉積量達到最高值,但其表達模式主要為包涵體。對包涵體進行純化,收集目的蛋白,對其進行復性后,經Western Blo... 

【文章來源】：貴州大學貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

DIR指導苯氧基自由基偶聯(lián)反應機理（Hallsetal.,2004）

貴州大學碩士學位論文素在植物中分布廣泛，是重要的次生代謝產物。體外生化分析表明，F(xiàn)iD化活性，但在生物氧化酶或氧化劑的存在下，可以立體選擇性地將 2 分聯(lián)生產 1 分子(+)-松脂醇（Davin et al., 1997）。例如，五味子（Schisandra IR 蛋白（Kim et al., 2012）、亞麻（Linum usitatissimum）中的 LuDIR1 蛋白5）、大豆（Glycine max）中的 GmDIR22 蛋白（Li et al., 2017）和小麥（TriticuIR13 蛋白（Ma et al., 2015）都具有相同的功能。松柏醇是形成木脂素二松柏醇和芥子醇以及其他單木醇對香豆醇也被聚合成大分子木質素，某些脂素和木質素的生產中重疊（Davin et al., 2003）。

圖 1.3 半棉酚氧化偶聯(lián)產生棉酚ative coupling of hemigossypol results in two atropiso境反應素單體植物酚類的自由基耦合以生產細胞壁聚合物et al., 2016; Espi eira et al., 2011）。因此，這個基因脅迫，包括創(chuàng)傷(Ralph et al., 2007)、脫水、低溫、和聚乙二醇。DIR 基因在響應由真菌和昆蟲（Ralp., 2007; Reboledo et al., 2015）是具有重要的意義。的木脂素提取物對大豆疫霉菌絲生長具有一定的夠有效地將 E-松柏醇偶聯(lián)成(+)-松脂醇，表明大豆中的合成，導致大豆對大豆疫霉菌菌絲生長的抑制作物信息學分析

【參考文獻】：
期刊論文
[1]基于“中藥作用機理輔助解析系統(tǒng)”的杜仲抗高血壓作用機制研究[J]. 葉小彤,張百霞,王慧慧,何帥兵,張小華,王耘.  中國中藥雜志. 2015(19)
[2]杜仲強筋健骨的藥理作用及臨床應用研究進展[J]. 朱福群,唐芳瑞,劉榮華.  江西中醫(yī)藥大學學報. 2015(04)
[3]杜仲的化學成分及藥理作用研究進展[J]. 馮晗,周宏灝,歐陽冬生.  中國臨床藥理學與治療學. 2015(06)
[4]杜仲中槲皮素、京尼平苷及桃葉珊瑚苷對小鼠成骨樣細胞系MC3T3-E1增殖和分化的影響[J]. 牟麗秋,杜俊,胡旖耘,劉新義,劉亭亭,王傳邦,吳軍勇,向大雄.  藥物評價研究. 2015(02)
[5]杜仲藥理與毒理研究進展[J]. 張京京,杜紅巖,李欽,丁艷霞.  河南大學學報(醫(yī)學版). 2014(03)
[6]水稻dirigent基因家族生物信息學分析[J]. 穰中文,周清明.  湖南農業(yè)大學學報(自然科學版). 2013(02)
[7]杜仲綠原酸對高脂模型小鼠降血脂作用研究[J]. 王建輝,劉永樂,李赤翎,俞健,李向紅,王發(fā)祥,李艷.  食品工業(yè)科技. 2012(15)
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[10]杜仲醇提物和水提物對小鼠免疫性肝損傷保護作用的研究[J]. 高銀輝,史秀玲,王美,王旭,李粲,周程艷.  華北煤炭醫(yī)學院學報. 2011(02)

博士論文
[1]杜仲防治絕經后骨質疏松及其機理研究[D]. 張蓉.第四軍醫(yī)大學 2008

碩士論文
[1]杜仲Dirigent編碼基因克隆及表達分析[D]. 王維東.貴州大學 2017
[2]Western Blot檢測轉基因水稻PMI蛋白質[D]. 榮瑞娟.河北農業(yè)大學 2015



本文編號：3574051