黃鱔出血病病原分離、鑒定及氣單胞菌對(duì)黃鱔病理和免疫基因表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-12-10 07:55
黃鱔在我國(guó)或者其他亞洲國(guó)家是一種重要的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),然而細(xì)菌性疾病的發(fā)病率不斷上升嚴(yán)重阻礙了黃鱔養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,且該物種極易受氣單胞菌(Aeromonas)感染而發(fā)生大規(guī)模死亡。因此,探明發(fā)病黃鱔的致病病原以及深入了解該物種的免疫系統(tǒng)及其相關(guān)免疫基因在感染病原菌時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)答機(jī)制是極其必要的。本文探明了湖北監(jiān)利縣一養(yǎng)殖場(chǎng)導(dǎo)致黃鱔死亡的致病病原,同時(shí)對(duì)致病菌進(jìn)行了藥物敏感試驗(yàn),該研究為臨床診斷和科學(xué)預(yù)防該疾病提供參考。致病病原菌是從患病黃鱔的脾臟、心臟、肝臟和腸道中采集的。經(jīng)純化后,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和16S rRNA序列分析對(duì)病原體進(jìn)行鑒定。用人工感染方法測(cè)定了病原菌的致病性和組織學(xué)特征,用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法檢測(cè)藥物敏感性。一種優(yōu)勢(shì)菌株從患病的黃鱔的肝和腸組織中分離出來(lái)命名為JL-01。分離出的菌落形態(tài)相似,16S rRNA序列分析發(fā)現(xiàn)該病原菌為維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)。人工回歸感染健康黃鱔的癥狀與自然感染下觀察到的相同,連續(xù)7 d統(tǒng)計(jì)人工感染黃鱔導(dǎo)致的死亡率為40-80%,黃鱔在感染2-3天后死亡。該病原菌對(duì)黃鱔表現(xiàn)出強(qiáng)烈的致病性,造成組織損傷和死亡。黃...
【文章來(lái)源】:長(zhǎng)江大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
病鱔臨床癥狀注:A:體表出血;B:肝臟和腎臟出血;C:頭部腫大;D:肛門(mén)紅腫
圖 2-3 感染健康黃鱔累計(jì)7天死亡率統(tǒng)計(jì)注:每尾黃鱔注射200μL維氏氣單胞菌濃度為1.50×107cfu,對(duì)照組注射同等劑量的PBSFigure 2-3 Cumulative mortality 7 day of infected of healthyAsian Swamp Eelote: Healthy Asian Swamp Eel infected with 1.50×107cfu/fish-1(200μL) of the Aromona veroniiia intraperitoneal injection. The control group was injected with 200μL PBS.
3.3.2 差異表達(dá)基因統(tǒng)計(jì)分析及差異表達(dá)基因聚類(lèi)分析為了了解黃鱔感染嗜水氣單胞菌的分子反應(yīng)機(jī)理,利用嗜水氣單胞菌感染黃鱔分析比較轉(zhuǎn)錄組,并基于黃鱔基因組中的比對(duì)結(jié)果,對(duì)每個(gè)樣品組間兩兩進(jìn)行差異分析及上下調(diào)情況分析,在此基礎(chǔ)上統(tǒng)計(jì)對(duì)照組與攻毒組間的絕對(duì)差異表達(dá)基因。兩兩樣品組間差異分析結(jié)果及上下調(diào)情況統(tǒng)計(jì)(見(jiàn)圖 3-1)。對(duì)照組與攻毒組之間總共篩選出 1501 個(gè)差異表達(dá)基因(DEGS),其中包括 928 個(gè)上調(diào)基因和 573個(gè)下調(diào)基因(如圖 3-2A),差異表達(dá)基因(DEGS)的上調(diào)基因,下調(diào)基因以及無(wú)顯著上下調(diào)基因的分布情況用火山圖顯示(如圖 3-2B)。具有相似的表達(dá)模式的基因通常也會(huì)具有相似的功能,對(duì)差異表達(dá)基因和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行聚類(lèi)分析,可判斷差異基因在不同實(shí)驗(yàn)條件下的表達(dá)模式以及識(shí)別未知基因的功能或已知基因的未知功能。每個(gè)可能的試驗(yàn)條件下的差異表達(dá)基因被聚集在一起,用紅藍(lán)兩種顏色表示差異基因間的差異倍數(shù)高低(如圖 3-3)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大黃魚(yú)(Larimichthys crocea)白細(xì)胞介素10(IL-10)基因克隆及溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染后表達(dá)變化分析[J]. 侯紅紅,苗亮,李明云,郭曉飛,杜靜雅,陳炯. 海洋與湖沼. 2018(06)
[2]復(fù)雜基因組測(cè)序技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 高勝寒,禹海英,吳雙陽(yáng),王森,耿佳寧,駱迎峰,胡松年. 遺傳. 2018(11)
[3]達(dá)氏鱘維氏氣單胞菌的分離鑒定及病理組織學(xué)觀察[J]. 劉亞,楊銳,陳葉雨,宋明江,顏其貴,龔全,李強(qiáng),楊煥超,賴(lài)見(jiàn)生. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(06)
[4]魚(yú)類(lèi)免疫應(yīng)答機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 白姍姍,賈智英,石連玉. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2017(04)
[5]IL-8在LPS誘導(dǎo)的草魚(yú)炎癥過(guò)程中的表達(dá)特征[J]. 柳昭君,趙杰,卜云璇,肖蘭瑩,時(shí)凱麗,宋學(xué)宏. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2017(07)
[6]鰤?mèng)~諾卡氏菌感染斑馬魚(yú)模型的建立與組織病理學(xué)研究[J]. 夏立群,汪美,賴(lài)杰彬,陳銳敏,徐亮,魯義善. 熱帶生物學(xué)報(bào). 2016(04)
[7]團(tuán)頭魴致病性維氏氣單胞菌的分離鑒定及耐藥性分析[J]. 張冬星,康元環(huán),張海月,安鼎杰,單曉楓,錢(qián)愛(ài)東. 中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2016(10)
[8]中華鱘細(xì)菌性敗血癥的組織病理學(xué)觀察[J]. 程廣宇,宋志琦,趙德明,周向梅. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(19)
[9]5種藥物對(duì)黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲(chóng)的驅(qū)蟲(chóng)效果研究[J]. 潘庭雙,江河,胡玉婷,段國(guó)慶. 水產(chǎn)科學(xué). 2016(04)
[10]黃鱔源嗜水氣單胞菌DB01分離鑒定及藥敏特性研究[J]. 楊移斌,董靖,胥寧,劉永濤,楊秋紅,艾曉輝. 淡水漁業(yè). 2016(05)
本文編號(hào):3532198
【文章來(lái)源】:長(zhǎng)江大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
病鱔臨床癥狀注:A:體表出血;B:肝臟和腎臟出血;C:頭部腫大;D:肛門(mén)紅腫
圖 2-3 感染健康黃鱔累計(jì)7天死亡率統(tǒng)計(jì)注:每尾黃鱔注射200μL維氏氣單胞菌濃度為1.50×107cfu,對(duì)照組注射同等劑量的PBSFigure 2-3 Cumulative mortality 7 day of infected of healthyAsian Swamp Eelote: Healthy Asian Swamp Eel infected with 1.50×107cfu/fish-1(200μL) of the Aromona veroniiia intraperitoneal injection. The control group was injected with 200μL PBS.
3.3.2 差異表達(dá)基因統(tǒng)計(jì)分析及差異表達(dá)基因聚類(lèi)分析為了了解黃鱔感染嗜水氣單胞菌的分子反應(yīng)機(jī)理,利用嗜水氣單胞菌感染黃鱔分析比較轉(zhuǎn)錄組,并基于黃鱔基因組中的比對(duì)結(jié)果,對(duì)每個(gè)樣品組間兩兩進(jìn)行差異分析及上下調(diào)情況分析,在此基礎(chǔ)上統(tǒng)計(jì)對(duì)照組與攻毒組間的絕對(duì)差異表達(dá)基因。兩兩樣品組間差異分析結(jié)果及上下調(diào)情況統(tǒng)計(jì)(見(jiàn)圖 3-1)。對(duì)照組與攻毒組之間總共篩選出 1501 個(gè)差異表達(dá)基因(DEGS),其中包括 928 個(gè)上調(diào)基因和 573個(gè)下調(diào)基因(如圖 3-2A),差異表達(dá)基因(DEGS)的上調(diào)基因,下調(diào)基因以及無(wú)顯著上下調(diào)基因的分布情況用火山圖顯示(如圖 3-2B)。具有相似的表達(dá)模式的基因通常也會(huì)具有相似的功能,對(duì)差異表達(dá)基因和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行聚類(lèi)分析,可判斷差異基因在不同實(shí)驗(yàn)條件下的表達(dá)模式以及識(shí)別未知基因的功能或已知基因的未知功能。每個(gè)可能的試驗(yàn)條件下的差異表達(dá)基因被聚集在一起,用紅藍(lán)兩種顏色表示差異基因間的差異倍數(shù)高低(如圖 3-3)。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大黃魚(yú)(Larimichthys crocea)白細(xì)胞介素10(IL-10)基因克隆及溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染后表達(dá)變化分析[J]. 侯紅紅,苗亮,李明云,郭曉飛,杜靜雅,陳炯. 海洋與湖沼. 2018(06)
[2]復(fù)雜基因組測(cè)序技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 高勝寒,禹海英,吳雙陽(yáng),王森,耿佳寧,駱迎峰,胡松年. 遺傳. 2018(11)
[3]達(dá)氏鱘維氏氣單胞菌的分離鑒定及病理組織學(xué)觀察[J]. 劉亞,楊銳,陳葉雨,宋明江,顏其貴,龔全,李強(qiáng),楊煥超,賴(lài)見(jiàn)生. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(06)
[4]魚(yú)類(lèi)免疫應(yīng)答機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 白姍姍,賈智英,石連玉. 水產(chǎn)學(xué)雜志. 2017(04)
[5]IL-8在LPS誘導(dǎo)的草魚(yú)炎癥過(guò)程中的表達(dá)特征[J]. 柳昭君,趙杰,卜云璇,肖蘭瑩,時(shí)凱麗,宋學(xué)宏. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2017(07)
[6]鰤?mèng)~諾卡氏菌感染斑馬魚(yú)模型的建立與組織病理學(xué)研究[J]. 夏立群,汪美,賴(lài)杰彬,陳銳敏,徐亮,魯義善. 熱帶生物學(xué)報(bào). 2016(04)
[7]團(tuán)頭魴致病性維氏氣單胞菌的分離鑒定及耐藥性分析[J]. 張冬星,康元環(huán),張海月,安鼎杰,單曉楓,錢(qián)愛(ài)東. 中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2016(10)
[8]中華鱘細(xì)菌性敗血癥的組織病理學(xué)觀察[J]. 程廣宇,宋志琦,趙德明,周向梅. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2016(19)
[9]5種藥物對(duì)黃鱔體內(nèi)隱藏新棘蟲(chóng)的驅(qū)蟲(chóng)效果研究[J]. 潘庭雙,江河,胡玉婷,段國(guó)慶. 水產(chǎn)科學(xué). 2016(04)
[10]黃鱔源嗜水氣單胞菌DB01分離鑒定及藥敏特性研究[J]. 楊移斌,董靖,胥寧,劉永濤,楊秋紅,艾曉輝. 淡水漁業(yè). 2016(05)
本文編號(hào):3532198
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