蝙蝠腦組織中BDV-p24基因片段和抗原的檢測(cè)
本文關(guān)鍵詞:蝙蝠腦組織中BDV-p24基因片段和抗原的檢測(cè),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:了解貴州遵義地區(qū)野生蝙蝠感染博爾納病病毒(Borna disease virus,BDV)情況,豐富BDV在貴州省的分子流行病學(xué)內(nèi)容,為預(yù)防和控制BDV流行奠定基礎(chǔ)。方法:2014年4月-9月于貴州遵義雙河溶洞采用捕鳥(niǎo)網(wǎng)抓取野生蝙蝠并嚴(yán)格按照無(wú)菌操作步驟采取蝙蝠額顳葉腦組織。采用巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(nested polymerase chain reaction,n RT-PCR)檢測(cè)82例野生蝙蝠腦組織中BDV-p24基因片段,并將陽(yáng)性n RT-PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因序列測(cè)定、同源性以及分子系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)分析,同時(shí)采用免疫印跡法(Western Blotting,WB)檢測(cè)蝙蝠腦組織中磷蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:在82例野生蝙蝠腦組織中檢測(cè)出7例(編號(hào)22、33、36、48、55、58、68)BDV-p24基因片段陽(yáng)性,只有5例(編號(hào)22、33、36、48、58)成功測(cè)出BDV-p24基因序列片段,其陽(yáng)性檢出率為6.1%(5/82),另外2例(55、68)因濃度太低而未能測(cè)出。所有陽(yáng)性n RT-PCR產(chǎn)物所擴(kuò)增基因片段均為BDV-p24基因片段(nt 1528-nt1750),但5例陽(yáng)性標(biāo)本的所擴(kuò)增的BDV-p24基因序列片段不全相同,分別與標(biāo)準(zhǔn)株馬源Strain V(Gen Bank編號(hào):AJ311521.1)、H1766(Gen Bank編號(hào):AJ311523.1)、與He/80(Gen Bank編號(hào):AJ311522)相比較其核苷酸序列同源性為92%~99%。其中22號(hào)陽(yáng)性標(biāo)本與標(biāo)準(zhǔn)株Strain V、H1766的同源性較高,最高達(dá)99%,36、48、58號(hào)陽(yáng)性標(biāo)本的核苷酸序列堿基突變主要集中在BDV-p24基因片段上nt1734~nt1740的位置,其核苷酸序列為GGAA(T)GAA,33號(hào)陽(yáng)性標(biāo)本主要表現(xiàn)為散在的點(diǎn)突變。重建分子系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)發(fā)現(xiàn)貴州遵義地區(qū)野生蝙蝠陽(yáng)性標(biāo)本的核苷酸序列隸屬于2個(gè)支系(4例BDV-p24基因片段陽(yáng)性標(biāo)本匯聚形成中國(guó)貴州遵義獨(dú)立支系,1例BDV-p24基因片段陽(yáng)性標(biāo)本匯聚德國(guó)-中國(guó)混合支系)。82例蝙蝠腦組織中檢測(cè)出9例(編號(hào)33、35、40、41、48、63、66、68、69)BDV-p24蛋白陽(yáng)性,其陽(yáng)性檢出率為10.98%,(9/82)。結(jié)論:本研究提示貴州遵義地區(qū)野生蝙蝠可能為BDV的自然感染攜帶者,BDV可能存在蝙蝠之間、蝙蝠與人類(lèi)之間循環(huán)傳播。
【關(guān)鍵詞】:博爾納病病毒 蝙蝠 博爾納病病毒p24基因片段 博爾納病病毒磷蛋白 流行病學(xué)
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R440
【目錄】:
- 中英縮略詞對(duì)照表4-6
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-11
- 材料與方法11-18
- 結(jié)果18-23
- 討論23-26
- 結(jié)論26-27
- 參考文獻(xiàn)27-30
- 綜述30-38
- 參考文獻(xiàn)35-38
- 致謝38-39
- 作者簡(jiǎn)介39
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本文編號(hào):352734
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