1研究目的利用基因工程技術(shù)UAS/GAL4系統(tǒng)對果蠅糖轉(zhuǎn)運蛋白基因進(jìn)行表達(dá)調(diào)控,并對果蠅進(jìn)行高糖飲食干預(yù),檢測果蠅體重、甘油三酯水平、血糖水平、心臟功能、攀爬運動能力,探討高糖飲食聯(lián)合糖轉(zhuǎn)運蛋白基因敲減對果蠅甘油三酯與血糖水平、心臟功能以及攀爬運動能力的影響,篩選出與高糖飲食果蠅心臟功能相關(guān)指標(biāo)有聯(lián)系的糖轉(zhuǎn)運蛋白調(diào)控基因,為進(jìn)一步研究糖轉(zhuǎn)運蛋白與心臟功能紊亂的聯(lián)系,以及研究規(guī)律運動對果蠅心臟功能與糖代謝紊亂積極作用提供幫助。2研究方法將糖轉(zhuǎn)運蛋白調(diào)控基因UAS-RNAi品系果蠅（Glut1、Glut3基因以及Tret1-1、Tret1-2基因）分別與arm-gal4品系以及W¹¹¹⁸品系果蠅雜交,實現(xiàn)果蠅糖轉(zhuǎn)運蛋白基因敲減與正常表達(dá),分為基因正常表達(dá)組與基因敲減組。收集兩組雜交F1代8小時內(nèi)羽化的處女蠅,隨機進(jìn)行正常飲食（Normal Diet,ND）與高糖飲食（High Sugar Diet,HSD）培養(yǎng),分為正常表達(dá)正常飲食組（W-ND）、正常表達(dá)高糖飲食組（W-HSD）、基因敲減正常飲食組（ARM-ND）、基因敲減高糖飲食組（ARM-HSD）,四個基因品系共... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

果蠅UAS/GAL4雜交實驗示意圖

規(guī)律運動對高糖飲食聯(lián)合糖轉(zhuǎn)運蛋白基因敲減果蠅心臟功能的影響7圖1-2ELISA檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線1.1.8果蠅攀爬運動能力檢測攀爬指數(shù)評定方法：每一組隨機100只果蠅，分為5管，20只/管，試管18cm作為果蠅攀爬運動范圍，分為9等份，每個區(qū)域?qū)?yīng)分?jǐn)?shù)為1、2、3、4、5、6、7、8、9分。手動將果蠅震落至底部，當(dāng)全部果蠅震落時立即計時，統(tǒng)計第五秒時各位置果蠅數(shù)量，重復(fù)3次并計算每組果蠅得分之和，以此評定果蠅運動能力，拍攝時間為每天17：00到18：00[25]。1.1.9統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實驗完全隨機設(shè)計分組，為研究高糖飲食干預(yù)與糖轉(zhuǎn)運蛋白基因表達(dá)二者聯(lián)合篩選糖轉(zhuǎn)運蛋白候選基因，采用雙因素方差分析中析因分析，基因和高糖有交互作用時，采用簡單效應(yīng)分析，基因和高糖具有主效時用LSD多重比較，若方差不齊采用非參數(shù)檢驗單因素分析。實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示，P<0.05為差異具有顯著意義，P<0.01為差異具有極顯著意義。

碩士學(xué)位論文12圖1-6一周齡果蠅形態(tài)圖。四組圖片果蠅采取不同飲食與基因表達(dá)方案，能清晰顯示W(wǎng)-HSD與ARM-HSD組果蠅體型瘦校1.2.5心臟纖維性震顫檢測結(jié)果Glut3組雙因素方差分析果蠅心臟纖維性震顫結(jié)果表明：基因?qū)w維性震顫無顯著性影響（P>0.05），飲食對纖維性震顫無顯著性影響（P>0.05），二者無交互作用（P>0.05）(見圖1-7-a)。Glut1組雙因素方差分析果蠅纖維性震顫結(jié)果表明：基因?qū)w維性震顫無顯著性影響（P>0.05），飲食對纖維性震顫無顯著性影響（P>0.05），二者無交互作用（P>0.05）。多重分析比較結(jié)果表明：W-ND組纖維性震顫低于ARM-ND組，并具有顯著性差異（P<0.05）(見圖1-7-b)。Tret1-1組雙因素方差分析果蠅纖維性震顫檢測結(jié)果表明：基因?qū)w維性震顫無顯著性影響（P>0.05），飲食對纖維性震顫無顯著性影響（P>0.05），二者無交互作用（P>0.05）(見圖1-7-c)。Tret1-2組雙因素方差分析果蠅纖維性震顫檢測結(jié)果表明：基因?qū)w維性震顫無顯著性影響（P>0.05），飲食對纖維性震顫無顯著性影響（P>0.05），二者無交互作用（P>0.05）(見圖1-7-d)。W-NDW-HSDARM-NDARM-HSD


本文編號：3521576