發(fā)布時(shí)間：2021-11-23 19:13

　　甜瓜（Cucumis melo L.）是一年生匍匐或攀巖生長(zhǎng)的雙子葉草本植物,也是一種重要的經(jīng)濟(jì)瓜果作物,在全世界被廣泛栽培。本研究以甜瓜品種河套蜜瓜（Cucumis melo L.cv Hetao）為研究材料,通過(guò)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室前期獲得的河套蜜瓜的果實(shí)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行了初步分析,選擇了在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中差異表達(dá)的兩個(gè)基因CmHD-ZipⅡ（HomeodomainLeucineZipper）家族轉(zhuǎn)錄因子和CmFER10（FERONIA receptor-like kinase）作為候選基因,對(duì)其進(jìn)行克隆及果實(shí)發(fā)育中的功能分析,主要結(jié)果如下:（1）采用生物信息學(xué)的方法,在甜瓜基因組中鑒定了9個(gè)HD-ZipⅡ家族成員和15個(gè)FER家族成員。染色體定位分析發(fā)現(xiàn)CmHBⅡ-1和CmFER10基因分別位于甜瓜1號(hào)染色體和10號(hào)染色體。啟動(dòng)子分析發(fā)現(xiàn)CmFER10啟動(dòng)子包含乙烯應(yīng)答元件ERE、參與脅迫應(yīng)答的G-box元件和脫落酸響應(yīng)元件ABRE。（2）通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法,分析兩個(gè)基因在甜瓜不同組織和不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)中的表達(dá)量。結(jié)果顯示,CmHBⅡ-1和CmFER10均在果實(shí)的發(fā)育過(guò)程中差異表達(dá),... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物轉(zhuǎn)錄因子的分類(lèi)[48]

圖 1.3 HB 超家族成員的結(jié)構(gòu)圖[49]Figure1.3 The members' structures of the HB super family[49]定出來(lái)同源異形域編碼的同源異型盒蛋白結(jié)構(gòu)是在果蠅基因上，該基因會(huì)引起一個(gè)整體部分表型的改變而得名，后來(lái)在其它無(wú)脊了相似基因[51]。編碼 HD-Zip 蛋白的基因已經(jīng)從擬南芥(Arabidop sative L.)[53]、苜蓿(Medicago truncatula L.)[54]、煙草(Nicotiana ianthus annuus L.)[56]、番茄(Lycopersicon esculentum M.)[49]、小立碗蘚]以 及小麥(Triticeae asetivum L.)[58]等物種中被克隆。根據(jù) HD-Zi DNA 序列、生理功能的不同，HD-Zip 基因家族可分為：HD-Zip亞類(lèi)居多。 Ⅰ是最大的一類(lèi)家族，其結(jié)構(gòu)只包含 HD 結(jié)構(gòu)域和一個(gè)與其緊密相稱(chēng) 的 DNA 序 列 (CAAT(A/T)ATTG) 有 特 異 的 結(jié) 合 特 性 ， 命)[49]。編碼 HD-Zip I 蛋白的基因結(jié)構(gòu)很保守，除 ATHB52、ATHB 5

圖 2.1 構(gòu)建 sgRNA 表達(dá)盒[85]Figure 2.1 Construction of sgRNA expression cassettes[85] 表達(dá)盒與雙元載體 pYLCRISPR/Cas9 連接en Gate Ligation 原理，將基因編輯載體 pYLCRISPR/Cas9 和表酶將其連接。反應(yīng)體系為：Reagent VolumeCas9 載體(10 ng/μL) 1 μL表達(dá)盒(30 ng/μL) 2 μL10×Cutsmart Buffer 2 μLBsa I 1 μLT4Buffer 2 μLT4連接酶 1.5 μLddH2O 至 20 μL：37℃ 10 min，10℃ 5 min，20℃ 5 min，5 個(gè)循環(huán)；37℃ 3 m

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高等植物轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 陳霞,羅世巧,段翠芳,曾日中.  安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2008(09)
[2]植物轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與調(diào)控作用[J]. 劉強(qiáng),張貴友,陳受宜.  科學(xué)通報(bào). 2000(14)
[3]植物同源異型基因及同源異型盒基因的研究進(jìn)展[J]. 魏文輝,宋運(yùn)淳,覃瑞.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2000(02)

博士論文
[1]FERLs/SnRK2s蛋白激酶參與果實(shí)成熟調(diào)控的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理研究[D]. 賈美茹.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]番茄種子的內(nèi)源激素及活性氧的變化規(guī)律與果實(shí)成熟的關(guān)系[D]. 阮英.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3514490