發(fā)布時間：2021-11-23 19:13

　　甜瓜（Cucumis melo L.）是一年生匍匐或攀巖生長的雙子葉草本植物,也是一種重要的經濟瓜果作物,在全世界被廣泛栽培。本研究以甜瓜品種河套蜜瓜（Cucumis melo L.cv Hetao）為研究材料,通過對本實驗室前期獲得的河套蜜瓜的果實轉錄組數據進行了初步分析,選擇了在果實發(fā)育過程中差異表達的兩個基因CmHD-ZipⅡ（HomeodomainLeucineZipper）家族轉錄因子和CmFER10（FERONIA receptor-like kinase）作為候選基因,對其進行克隆及果實發(fā)育中的功能分析,主要結果如下:（1）采用生物信息學的方法,在甜瓜基因組中鑒定了9個HD-ZipⅡ家族成員和15個FER家族成員。染色體定位分析發(fā)現(xiàn)CmHBⅡ-1和CmFER10基因分別位于甜瓜1號染色體和10號染色體。啟動子分析發(fā)現(xiàn)CmFER10啟動子包含乙烯應答元件ERE、參與脅迫應答的G-box元件和脫落酸響應元件ABRE。（2）通過實時熒光定量PCR的方法,分析兩個基因在甜瓜不同組織和不同發(fā)育時期果實中的表達量。結果顯示,CmHBⅡ-1和CmFER10均在果實的發(fā)育過程中差異表達,... 

【文章來源】：內蒙古大學內蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

植物轉錄因子的分類[48]

圖 1.3 HB 超家族成員的結構圖[49]Figure1.3 The members' structures of the HB super family[49]定出來同源異形域編碼的同源異型盒蛋白結構是在果蠅基因上，該基因會引起一個整體部分表型的改變而得名，后來在其它無脊了相似基因[51]。編碼 HD-Zip 蛋白的基因已經從擬南芥(Arabidop sative L.)[53]、苜蓿(Medicago truncatula L.)[54]、煙草(Nicotiana ianthus annuus L.)[56]、番茄(Lycopersicon esculentum M.)[49]、小立碗蘚]以 及小麥(Triticeae asetivum L.)[58]等物種中被克隆。根據 HD-Zi DNA 序列、生理功能的不同，HD-Zip 基因家族可分為：HD-Zip亞類居多。 Ⅰ是最大的一類家族，其結構只包含 HD 結構域和一個與其緊密相稱 的 DNA 序 列 (CAAT(A/T)ATTG) 有 特 異 的 結 合 特 性 ， 命)[49]。編碼 HD-Zip I 蛋白的基因結構很保守，除 ATHB52、ATHB 5

圖 2.1 構建 sgRNA 表達盒[85]Figure 2.1 Construction of sgRNA expression cassettes[85] 表達盒與雙元載體 pYLCRISPR/Cas9 連接en Gate Ligation 原理，將基因編輯載體 pYLCRISPR/Cas9 和表酶將其連接。反應體系為：Reagent VolumeCas9 載體(10 ng/μL) 1 μL表達盒(30 ng/μL) 2 μL10×Cutsmart Buffer 2 μLBsa I 1 μLT4Buffer 2 μLT4連接酶 1.5 μLddH2O 至 20 μL：37℃ 10 min，10℃ 5 min，20℃ 5 min，5 個循環(huán)；37℃ 3 m

【參考文獻】：
期刊論文
[1]高等植物轉錄因子研究進展[J]. 陳霞,羅世巧,段翠芳,曾日中.  安徽農學通報. 2008(09)
[2]植物轉錄因子的結構與調控作用[J]. 劉強,張貴友,陳受宜.  科學通報. 2000(14)
[3]植物同源異型基因及同源異型盒基因的研究進展[J]. 魏文輝,宋運淳,覃瑞.  生物化學與生物物理進展. 2000(02)

博士論文
[1]FERLs/SnRK2s蛋白激酶參與果實成熟調控的信號轉導機理研究[D]. 賈美茹.中國農業(yè)大學 2017

碩士論文
[1]番茄種子的內源激素及活性氧的變化規(guī)律與果實成熟的關系[D]. 阮英.中國農業(yè)大學 2005



本文編號：3514490