BRAF V600E 基因突變與原發(fā)性甲狀腺功能亢進(jìn)合并甲狀腺乳頭狀癌的相關(guān)性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-20 06:27
目的探討原發(fā)性甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)合并甲狀腺乳頭狀癌患者的臨床及病理特征及其與BRAF V600E基因突變的關(guān)系。方法(1)選取2011年1月—2016年12月于青島大學(xué)附屬醫(yī)院行手術(shù)治療且病理證實(shí)為甲狀腺乳頭狀癌(PTC)的原發(fā)性甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)(甲亢)患者。(1)收集患者的性別、年齡,術(shù)前超聲特征:結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)、回聲、鈣化、邊界、形態(tài)、縱橫比、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,以及血清TPOAb、TGAb水平。(2)記錄術(shù)后病理特征:包括癌灶最長(zhǎng)直徑、單雙側(cè)、侵犯被膜、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分布區(qū)域、數(shù)量,是否合并橋本氏甲狀腺炎、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫。(3)評(píng)估復(fù)發(fā)危險(xiǎn)度分層、TNM分期。(4)分析甲亢合并甲癌患者的臨床及病理特征。(2)收集以上患者的術(shù)后病理蠟塊,提取DNA,行普通PCR擴(kuò)增后,用單純測(cè)序法測(cè)BRAF V600E突變,計(jì)算甲亢合并甲癌患者中BRAF V600E基因的突變率,比較BRAFV600E基因突變與甲亢合并甲癌患者臨床、病理特征的相關(guān)性。結(jié)果(1)甲亢合并甲癌患者80例,男性5例(6.25%),女性75例(93....
【文章來(lái)源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
病理蠟塊
第一章 研究對(duì)象與方法1.3.5 實(shí)驗(yàn)方法1.3.5.1 標(biāo)本采集于青大附院病理科獲取納入研究患者的病理蠟塊,將獲取的石蠟包埋組織使切片機(jī)連續(xù)切片,每張白片厚度約 8μ m,每個(gè)蠟塊切取 2-3 片(癌灶直徑大于于 1cm 者取 2 片,直徑小于 2cm 者取 3 片),借取每個(gè)患者常規(guī) HE 染色 1 張,病理科醫(yī)師鑒定和評(píng)估腫瘤細(xì)胞含量最多區(qū)域,手動(dòng)刮取石蠟白片上相對(duì)應(yīng)該區(qū)的組織于離心管中,并按照相應(yīng)病理號(hào)標(biāo)記。見(jiàn)圖 1、2。
電泳:將 Marker 5ul 與每個(gè)標(biāo)本的 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物 5ul 分別于膠孔內(nèi)加樣,設(shè)置電泳條件(110v 20min),電泳結(jié)束后取出凝膠,置于凝膠成像系統(tǒng)上顯色。見(jiàn)圖 3。選擇目的條帶顯色清晰的 PCR 產(chǎn)物送于北京六合華大基因科技有限公司純化測(cè)序。根據(jù)測(cè)序結(jié)果找到相應(yīng)基因序列,篩選存在點(diǎn)突變者,并記錄。見(jiàn)圖 4、5。注:左側(cè)箭頭表示無(wú)目的條帶;右側(cè)箭頭表示有目的條帶。圖 3 顯色凝膠
本文編號(hào):3506758
【文章來(lái)源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
病理蠟塊
第一章 研究對(duì)象與方法1.3.5 實(shí)驗(yàn)方法1.3.5.1 標(biāo)本采集于青大附院病理科獲取納入研究患者的病理蠟塊,將獲取的石蠟包埋組織使切片機(jī)連續(xù)切片,每張白片厚度約 8μ m,每個(gè)蠟塊切取 2-3 片(癌灶直徑大于于 1cm 者取 2 片,直徑小于 2cm 者取 3 片),借取每個(gè)患者常規(guī) HE 染色 1 張,病理科醫(yī)師鑒定和評(píng)估腫瘤細(xì)胞含量最多區(qū)域,手動(dòng)刮取石蠟白片上相對(duì)應(yīng)該區(qū)的組織于離心管中,并按照相應(yīng)病理號(hào)標(biāo)記。見(jiàn)圖 1、2。
電泳:將 Marker 5ul 與每個(gè)標(biāo)本的 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物 5ul 分別于膠孔內(nèi)加樣,設(shè)置電泳條件(110v 20min),電泳結(jié)束后取出凝膠,置于凝膠成像系統(tǒng)上顯色。見(jiàn)圖 3。選擇目的條帶顯色清晰的 PCR 產(chǎn)物送于北京六合華大基因科技有限公司純化測(cè)序。根據(jù)測(cè)序結(jié)果找到相應(yīng)基因序列,篩選存在點(diǎn)突變者,并記錄。見(jiàn)圖 4、5。注:左側(cè)箭頭表示無(wú)目的條帶;右側(cè)箭頭表示有目的條帶。圖 3 顯色凝膠
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