發(fā)布時(shí)間：2021-11-17 00:00

　　目的共轉(zhuǎn)orca3/g10h雙基因于長春花毛狀根,提高抗癌生物堿量。方法通過構(gòu)建p CAMBIA1304++orca3+g10h表達(dá)載體,利用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)獲得雙轉(zhuǎn)orca3/g10h基因長春花毛狀根。利用RT-q PCR研究共轉(zhuǎn)orca3/g10h基因長春花毛狀根萜類吲哚生物堿（TIAs）生物合成途徑中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄差異。采用HPLC研究共轉(zhuǎn)orca3/g10h基因長春花毛狀根TIAs（包括長春堿、長春新堿和阿嗎堿）量。結(jié)果轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根中與TIAs生物合成相關(guān)基因asα、ggpps、g10h、str、tdc、cpr、sgd和dat轉(zhuǎn)錄水平均較非轉(zhuǎn)基因長春花普通根高。HPLC結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根總TIAs量達(dá)到58.23 mg/g,是非轉(zhuǎn)基因長春花普通根的27.5倍。長春堿和長春新堿的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)均較非轉(zhuǎn)基因普通根高。其中,長春堿平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,為51.30 mg/g,是非轉(zhuǎn)基因普通根的197.3倍。結(jié)論共轉(zhuǎn)orca3/g10h基因能夠有效提高長春花毛狀根中TIAs量。 

【文章來源】：中草藥. 2016,47(18)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 植物表達(dá)載體p CAMBIA1304+-orca3-g10h表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.2 發(fā)根農(nóng)桿菌C58C1介導(dǎo)p CAMBIA1304++orca3+g10h轉(zhuǎn)化長春花及陽性克隆檢測
        1.2.3 轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根TIAs生物合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄差異
        1.2.4 長春花毛狀根TIAs提取
        1.2.5 轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根TIAs量的測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 植物表達(dá)載體p CAMBIA1304+-orca3-g10h的構(gòu)建
    2.2 發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)p CAMBIA1304++orca3+g10h轉(zhuǎn)化長春花PCR檢測
    2.3 共轉(zhuǎn)orca3/g10h長春花毛狀根TIAs生物合成相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄差異
    2.4 HPLC檢測共轉(zhuǎn)orca3/g10h基因長春花毛狀根TIAs量
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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