背景和目的:德朗熱綜合征（Cornelia de Lange Syndrome,CdLS）是一個由基因突變造成的罕見的伴有嚴重的生長發(fā)育缺陷和累及多器官系統(tǒng)的先天性遺傳性疾病。這些基因的突變會引起基因表達的失調(diào),并伴有多種嚴重的骨發(fā)育異常,主要表現(xiàn)為生長智能遲滯、認知障礙、上肢畸形、多毛癥、特殊面容、心臟瓣膜缺陷等多器官功能異常,嚴重影響了新生兒及兒童的健康成長,給家庭和社會造成了沉重的負擔。其中,該病65%的患兒是由NIPBL、Smc1和Smc3這三個基因突變所導(dǎo)致,NIPBL基因突變是引起常染色體顯性遺傳性疾病德朗熱綜合征的主要病因,約60%的患兒由NIPBL基因突變引起。在胎鼠的肢芽發(fā)育階段中,NIPBL基因?qū)ξ挥谥縕PA（Zone of Polarizing Activity）區(qū)域的Shh（Sonic Hedgehog）基因具有調(diào)控作用,影響Shh基因的表達,但具體兩個基因之間的交互作用如何以及規(guī)律如何,還未可知。本實驗,我們利用NIPBL-Loxp小鼠與Cre小鼠建立NIPBL^+/-基因剔除小鼠模型,在此模型的基礎(chǔ)上,探討Shh基因在胎鼠發(fā)育的不同時期... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

NIPBL基因剔除小鼠打靶載體構(gòu)建策略圖

圖 2 NIPBL 基因剔除小鼠打靶載體質(zhì)粒圖I 是酶切位點，質(zhì)粒復(fù)制起始位點是 ori，NIPBL-CKO 是條除小鼠打靶載體構(gòu)建策略圖中 P1、P2、P3、P4 的引表 1 P1、P2、P3、P4 的引物信息Sequence 5'－GCTGCCTCTCCCATCTCCTTTACC－3' 5'－CTGAGCCCAGAAAGCGAAGGA－3'5'－CCTCCCCCGTGCCTTCCTTGAC－3'5'－AGAGGCCAGCTGAATGTGGTAATG－3' Loxp 小鼠模型

Shh 基因在 NIPBL+/-胎鼠肢芽內(nèi)的表達結(jié) 果(Results)1.NIPBL 基因剔除小鼠模型的建立及鑒定結(jié)果將 NIPBL 條件性基因剔除載體質(zhì)粒電轉(zhuǎn)染到 ES 細胞中，經(jīng)過培養(yǎng)挑選出 96 個藥物抗性 ES 細胞克隆，然后提取它的基因組 DNA 進行 PCR 鑒定，其中有 13 個 ES 克隆發(fā)生了雙臂同源重組，分別是：D10、E8、D2、H7、B3、F3、F6、A1、C12、D4、E7、E11 和 C2，詳見圖 4 和圖 5。


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