大口黑鱸cpt1基因cDNA克隆及飼料脂肪水平對腸道微生物和cpt1表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2021-11-16 06:35
當(dāng)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的必要保證是優(yōu)質(zhì)高能的飼料。適宜的飼料脂肪水平能夠促進(jìn)養(yǎng)殖魚類的生長,但目前魚類對脂肪的適應(yīng)能力以及適應(yīng)機(jī)制尚不明確。本研究以大口黑鱸(Micropterus salmoides)為研究對象,從高脂飼料飼喂大口黑鱸后肝臟轉(zhuǎn)錄組學(xué)的分析找出重點(diǎn)研究對象——脂肪酸氧化關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶——肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I(carnitine palmitoyl transferase I,cpt1)。進(jìn)一步探究cpt1基因在大口黑鱸組織中的表達(dá)差異及對脂肪水平和生長階段的應(yīng)答情況。研究結(jié)果可以從分子層面分析大口黑鱸對高脂飼料的營養(yǎng)生理適應(yīng)機(jī)制,為開發(fā)最適脂肪水平的優(yōu)質(zhì)高能飼料提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果和結(jié)論如下:1、高脂飼料飼喂后大口黑鱸肝臟轉(zhuǎn)錄組、腸道微生物分析及cpt1基因克隆本實驗旨在通過高通量測序找到脂肪因子重要的調(diào)控基因,探討大口黑鱸對高脂飼料的營養(yǎng)生理適應(yīng)機(jī)制。實驗共設(shè)置3個處理組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)25尾魚,分別配制低脂(6%)、中脂(12%)和高脂(18%)三種脂肪水平梯度的等氮試驗飼料,飼養(yǎng)的大口黑鱸初始質(zhì)量為(23.6±1.0)g,實驗周期為10周。提取大口黑鱸肝...
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
草魚攝食高脂飼料的脂肪肝發(fā)生過程[7]
1文獻(xiàn)綜述9圖1-2線粒體CPT系統(tǒng)及與脂代謝的聯(lián)系(引自Collinset,al.2010)[93]Fig.1-2ThemitochondrialCPTsystemanditsrelationshipwithlipidmetabolism目前關(guān)于脂肪代謝穩(wěn)態(tài)的調(diào)控研究大多集中在營養(yǎng)素方面,深入到分子層面的研究較少,關(guān)于水產(chǎn)動物中cpt1基因性質(zhì)及功能的研究則更少,水產(chǎn)動物中僅有虹鱒、斑馬魚、鮭魚、金頭鯛、蝦虎魚、黃顙魚、鯉魚的cpt1基因全序列或部分序列被報道[94-96]。在多數(shù)魚類中cpt1能起到促進(jìn)脂肪分解,降低體脂的作用。有研究表明外源性脂肪酸的攝入能上調(diào)cpt1基因的表達(dá)[71];當(dāng)機(jī)體對脂肪酸的需求增加時,cpt1基因的表達(dá)也會顯著增強(qiáng)[97],以此促進(jìn)脂肪酸的氧化,加快脂肪酸分解代謝;對虎龍斑(Epinepheluslanceolatus♂×Epinephelusfuscoguttatus♀)[98]的研究也發(fā)現(xiàn)饑餓狀態(tài)下魚體能夠通過提高肝臟中cpt1的表達(dá)量來更多地分解肝臟脂肪,以產(chǎn)生能量維持機(jī)體正常的基礎(chǔ)代謝活動,而復(fù)投喂又會顯著降低cpt1的表達(dá)水平。在對金頭鯛禁食的研究中發(fā)現(xiàn),禁食12h后,心臟和肌肉中cpt1的表達(dá)量均下降,這證明cpt1參與脂肪酸代謝的調(diào)節(jié)[99];高脂飼料能顯著增加虹鱒紅饑肝臟和脂肪組織中cpt1基因的表達(dá)量[100]。1.3.2cpt1基因的代謝通路在敲除acc基因的小鼠[101]和人HepG2細(xì)胞[102]中的研究均發(fā)現(xiàn),ampk-acc-cpt1信號通路通過激活cpt1的表達(dá)來調(diào)控細(xì)胞脂肪酸氧化。眾所周知,ampk已被證實廣泛存在于魚體組織中[103-104],被稱為細(xì)胞能量狀態(tài)的傳感器,在機(jī)體的能量穩(wěn)態(tài)中起著至關(guān)重要的作用[105]。ampk能夠調(diào)控脂肪酸的合成與分解,當(dāng)機(jī)體的能量供應(yīng)不足時,胞內(nèi)AMP/ATP的比值升高,ampk被激活[106],而激活的ampk一個直接效應(yīng)就是引起乙酰輔酶A羧化酶(acc)
unigene 比對到大黃魚(Larimichthys crocea),占比對總 unigene 數(shù)目的 36.7%;有5492 個 unigene 比對到直眶鋸雀鯛(Stegastes partitus),占比對總 unigene 數(shù)目的13.9%;有 1610 個 unigene 比對到革首南極魚(Notothenia coriiceps),占比對總unigene 數(shù)目的 4.1%; 而 1579 個 unigene 比對到了尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)上,占比為 4.0%;在人類(Homo sapiens)基因組上比對到了 1039 個unigene,占比為 2.6%;其他還有 876 個 unigene 比對到斑馬擬麗魚(Maylandia zebra)上;有 789 個 unigene 比對到虹鱒(Oncorhynchus mykiss)上;有 691 個 unigene比對到底鳉(Fundulus heteroclitus)上;有 665 個比對到伯氏樸麗魚(Haplochromis burtoni);還有 656 個 unigene 比對到歐洲海鱸(Dicentrarchus labrax);637 個 unigene比對到青鳉(Oryzias latipes)上等。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國水產(chǎn)動物營養(yǎng)研究與飼料工業(yè)的發(fā)展歷程與展望[J]. 麥康森. 飼料工業(yè). 2020(01)
[2]飼料脂肪水平對大口黑鱸CPT1表達(dá)的影響[J]. 宋銘琪,鐘云飛,郭佳玲,陳擁軍,羅莉,林仕梅. 水產(chǎn)學(xué)報. 2019(10)
[3]飼料脂肪源對大菱鲆生長、體組成及血清生化指標(biāo)的影響[J]. 趙曼茜,張斐然,吳立新,李思萌,李笑迎. 中國飼料. 2019(13)
[4]饑餓—復(fù)投喂對虎龍斑FAS及CPT-1A表達(dá)的影響[J]. 馬細(xì)蘭,黃文俞,劉炎豐. 惠州學(xué)院學(xué)報. 2018(06)
[5]飼料脂肪水平對匙吻鱘生長、體組成、消化酶活性、血清生化及抗氧化性能的影響[J]. 劉陽洋,于海波,武文一,鐘明智,邢君霞,周繼術(shù),吉紅,薛敏. 水產(chǎn)學(xué)報. 2018(12)
[6]飼料中不同水平脂肪對泥鰍幼魚生長性能的影響[J]. 林建華,陳學(xué)豪. 當(dāng)代水產(chǎn). 2018(09)
[7]飼料中脂肪水平對團(tuán)頭魴幼魚生長性能、血清生化指標(biāo)及黏蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 習(xí)丙文,陸春云,任鳴春,米海峰,謝駿. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2018(09)
[8]飼料中脂肪成分對海水魚生長發(fā)育的影響研究[J]. 譚星君. 河南農(nóng)業(yè). 2018(14)
[9]外源性脂肪酸對羅非魚脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響[J]. 王雅文,喬芳,張美玲,賈永義,杜震宇. 水生生物學(xué)報. 2018(03)
[10]飼料脂肪水平對俄羅斯鱘幼魚生長、血液生化指標(biāo)及抗氧化性能的影響[J]. 朱婷婷,李琦,朱浩擁,王和偉,李二超,陳立僑. 海洋漁業(yè). 2017(01)
博士論文
[1]飼料脂肪水平和脂肪酸種類對大黃魚脂肪沉積的影響[D]. 嚴(yán)晶.中國海洋大學(xué) 2015
[2]飼料中非蛋白能量源對草魚脂肪蓄積及脂肪代謝的影響研究[D]. 郭小澤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]CPT1基因?qū)ωi脂肪沉積的影響及其調(diào)控機(jī)制的研究[D]. 張艷芳.浙江大學(xué) 2010
碩士論文
[1]大口黑鱸對高脂飼料的生理適應(yīng)機(jī)制[D]. 彭祥和.西南大學(xué) 2017
[2]飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長、體脂沉積、脂肪酸組成及脂肪酸合成酶的影響[D]. 韓光明.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3498342
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
草魚攝食高脂飼料的脂肪肝發(fā)生過程[7]
1文獻(xiàn)綜述9圖1-2線粒體CPT系統(tǒng)及與脂代謝的聯(lián)系(引自Collinset,al.2010)[93]Fig.1-2ThemitochondrialCPTsystemanditsrelationshipwithlipidmetabolism目前關(guān)于脂肪代謝穩(wěn)態(tài)的調(diào)控研究大多集中在營養(yǎng)素方面,深入到分子層面的研究較少,關(guān)于水產(chǎn)動物中cpt1基因性質(zhì)及功能的研究則更少,水產(chǎn)動物中僅有虹鱒、斑馬魚、鮭魚、金頭鯛、蝦虎魚、黃顙魚、鯉魚的cpt1基因全序列或部分序列被報道[94-96]。在多數(shù)魚類中cpt1能起到促進(jìn)脂肪分解,降低體脂的作用。有研究表明外源性脂肪酸的攝入能上調(diào)cpt1基因的表達(dá)[71];當(dāng)機(jī)體對脂肪酸的需求增加時,cpt1基因的表達(dá)也會顯著增強(qiáng)[97],以此促進(jìn)脂肪酸的氧化,加快脂肪酸分解代謝;對虎龍斑(Epinepheluslanceolatus♂×Epinephelusfuscoguttatus♀)[98]的研究也發(fā)現(xiàn)饑餓狀態(tài)下魚體能夠通過提高肝臟中cpt1的表達(dá)量來更多地分解肝臟脂肪,以產(chǎn)生能量維持機(jī)體正常的基礎(chǔ)代謝活動,而復(fù)投喂又會顯著降低cpt1的表達(dá)水平。在對金頭鯛禁食的研究中發(fā)現(xiàn),禁食12h后,心臟和肌肉中cpt1的表達(dá)量均下降,這證明cpt1參與脂肪酸代謝的調(diào)節(jié)[99];高脂飼料能顯著增加虹鱒紅饑肝臟和脂肪組織中cpt1基因的表達(dá)量[100]。1.3.2cpt1基因的代謝通路在敲除acc基因的小鼠[101]和人HepG2細(xì)胞[102]中的研究均發(fā)現(xiàn),ampk-acc-cpt1信號通路通過激活cpt1的表達(dá)來調(diào)控細(xì)胞脂肪酸氧化。眾所周知,ampk已被證實廣泛存在于魚體組織中[103-104],被稱為細(xì)胞能量狀態(tài)的傳感器,在機(jī)體的能量穩(wěn)態(tài)中起著至關(guān)重要的作用[105]。ampk能夠調(diào)控脂肪酸的合成與分解,當(dāng)機(jī)體的能量供應(yīng)不足時,胞內(nèi)AMP/ATP的比值升高,ampk被激活[106],而激活的ampk一個直接效應(yīng)就是引起乙酰輔酶A羧化酶(acc)
unigene 比對到大黃魚(Larimichthys crocea),占比對總 unigene 數(shù)目的 36.7%;有5492 個 unigene 比對到直眶鋸雀鯛(Stegastes partitus),占比對總 unigene 數(shù)目的13.9%;有 1610 個 unigene 比對到革首南極魚(Notothenia coriiceps),占比對總unigene 數(shù)目的 4.1%; 而 1579 個 unigene 比對到了尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)上,占比為 4.0%;在人類(Homo sapiens)基因組上比對到了 1039 個unigene,占比為 2.6%;其他還有 876 個 unigene 比對到斑馬擬麗魚(Maylandia zebra)上;有 789 個 unigene 比對到虹鱒(Oncorhynchus mykiss)上;有 691 個 unigene比對到底鳉(Fundulus heteroclitus)上;有 665 個比對到伯氏樸麗魚(Haplochromis burtoni);還有 656 個 unigene 比對到歐洲海鱸(Dicentrarchus labrax);637 個 unigene比對到青鳉(Oryzias latipes)上等。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中國水產(chǎn)動物營養(yǎng)研究與飼料工業(yè)的發(fā)展歷程與展望[J]. 麥康森. 飼料工業(yè). 2020(01)
[2]飼料脂肪水平對大口黑鱸CPT1表達(dá)的影響[J]. 宋銘琪,鐘云飛,郭佳玲,陳擁軍,羅莉,林仕梅. 水產(chǎn)學(xué)報. 2019(10)
[3]飼料脂肪源對大菱鲆生長、體組成及血清生化指標(biāo)的影響[J]. 趙曼茜,張斐然,吳立新,李思萌,李笑迎. 中國飼料. 2019(13)
[4]饑餓—復(fù)投喂對虎龍斑FAS及CPT-1A表達(dá)的影響[J]. 馬細(xì)蘭,黃文俞,劉炎豐. 惠州學(xué)院學(xué)報. 2018(06)
[5]飼料脂肪水平對匙吻鱘生長、體組成、消化酶活性、血清生化及抗氧化性能的影響[J]. 劉陽洋,于海波,武文一,鐘明智,邢君霞,周繼術(shù),吉紅,薛敏. 水產(chǎn)學(xué)報. 2018(12)
[6]飼料中不同水平脂肪對泥鰍幼魚生長性能的影響[J]. 林建華,陳學(xué)豪. 當(dāng)代水產(chǎn). 2018(09)
[7]飼料中脂肪水平對團(tuán)頭魴幼魚生長性能、血清生化指標(biāo)及黏蛋白基因表達(dá)的影響[J]. 習(xí)丙文,陸春云,任鳴春,米海峰,謝駿. 動物營養(yǎng)學(xué)報. 2018(09)
[8]飼料中脂肪成分對海水魚生長發(fā)育的影響研究[J]. 譚星君. 河南農(nóng)業(yè). 2018(14)
[9]外源性脂肪酸對羅非魚脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響[J]. 王雅文,喬芳,張美玲,賈永義,杜震宇. 水生生物學(xué)報. 2018(03)
[10]飼料脂肪水平對俄羅斯鱘幼魚生長、血液生化指標(biāo)及抗氧化性能的影響[J]. 朱婷婷,李琦,朱浩擁,王和偉,李二超,陳立僑. 海洋漁業(yè). 2017(01)
博士論文
[1]飼料脂肪水平和脂肪酸種類對大黃魚脂肪沉積的影響[D]. 嚴(yán)晶.中國海洋大學(xué) 2015
[2]飼料中非蛋白能量源對草魚脂肪蓄積及脂肪代謝的影響研究[D]. 郭小澤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]CPT1基因?qū)ωi脂肪沉積的影響及其調(diào)控機(jī)制的研究[D]. 張艷芳.浙江大學(xué) 2010
碩士論文
[1]大口黑鱸對高脂飼料的生理適應(yīng)機(jī)制[D]. 彭祥和.西南大學(xué) 2017
[2]飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長、體脂沉積、脂肪酸組成及脂肪酸合成酶的影響[D]. 韓光明.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號:3498342
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