以不同軟化階段的軟棗獼猴桃果實(shí)為試材,采用分光光度法測(cè)定了多聚半乳糖醛酸酶（Polygalacturonase,PG）、β-半乳糖苷酶（β-galactosidase,β-gal）和果膠甲酯酶（Pectin methylesterase,PME）活性,采用RT-PCR法對(duì)其控制基因克隆,并對(duì)不同成熟階段的表達(dá)進(jìn)行了分析,以期探討軟棗獼猴桃果實(shí)軟化機(jī)理。結(jié)果表明:軟棗獼猴桃果實(shí)軟化中PME和β-gal在軟化初期出現(xiàn)活性高峰,PG在軟化期形成活性高峰,而且成功克隆得到了軟棗獼猴桃PG和β-gal的基因序列。NCBI Blast結(jié)果表明與中華獼猴桃PG基因和β-gal基因的一致性分別大于95%和90%。PG基因的半定量分析表明PG基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)與PG活性協(xié)同一致,說(shuō)明在軟棗獼猴桃果實(shí)中PG基因的表達(dá)是轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控的;而β-gal基因的半定量分析表明β-gal活性波峰結(jié)果一致,但是與果實(shí)軟化過(guò)程中β-gal保持較高的酶活性結(jié)果不一致,說(shuō)明β-gal基因的表達(dá)不僅受到轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控,還可能受到翻譯水平上的調(diào)控。 

【文章來(lái)源】：北方園藝. 2020,(15)北大核心

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【部分圖文】：

軟棗獼猴桃果實(shí)軟化過(guò)程中PG和

β-gal是起水解果膠支鏈分子半乳聚糖的作用,所以預(yù)測(cè)在一部分作物組織軟化中的作用比PG重要[15]。由圖2可知,軟棗獼猴桃果實(shí)軟化過(guò)程中保持較高的β-gal活性并在軟化初期出現(xiàn)活性高峰,說(shuō)明β-gal也是軟棗獼猴桃果實(shí)果膠分解的主要酶。2.3 控制軟棗獼猴桃果實(shí)軟化的主要酶基因克隆及表達(dá)量分析

提取了軟棗獼猴桃總RNA,根據(jù)已報(bào)道的其它植物的PG基因序列,設(shè)計(jì)了軟棗獼猴桃PG基因的特異引物(Pgu4:atttgttaggggtgtgctct,Pgd4:ttgagggcttaactaaacca),進(jìn)行RT-PCR、克隆得到了其PG的基因序列。NCBI Blast結(jié)果表明與中華獼猴桃PG基因的一致性大于95%,且包含所設(shè)計(jì)特異引物序列(圖3中的方框部分),表明了所克隆基因序列的正確性。圖4 軟棗獼猴桃果實(shí)軟化過(guò)程中PG基因表達(dá)量變化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]軟棗獼猴桃根化學(xué)成分及抗癌藥理作用研究進(jìn)展[J]. 王夢(mèng)旭,王天義,白乃生.  中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志. 2019(09)
[2]Adβgal-1和Adβgal-2克隆及其在獼猴桃果實(shí)軟化中的作用[J]. 馮新,賴瑞聯(lián),高敏霞,陳文光,吳如健,陳義挺.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(02)
[3]獼猴桃果實(shí)采后生理研究進(jìn)展[J]. 黃文俊,鐘彩虹.  植物科學(xué)學(xué)報(bào). 2017(04)
[4]獼猴桃采前處理保鮮技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 李東,譚書(shū)明,夏之行,鄧毅,張程榕,蔣想.  食品工業(yè). 2015(08)
[5]軟棗獼猴桃果實(shí)軟化特性研究[J]. 李旭,曹萬(wàn)萬(wàn),吳松權(quán),劉迪,樸一龍.  林業(yè)科技通訊. 2015(06)
[6]CaCl2處理對(duì)軟棗獼猴桃果實(shí)軟化的影響[J]. 曾照旭,樸一龍,張先,劉迪,李旭.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(03)
[7]1-甲基環(huán)丙烯處理對(duì)軟棗獼猴桃果實(shí)軟化的影響[J]. 曾照旭,樸一龍,金東淳,冉麗萍,李旭.  北方園藝. 2014(01)
[8]軟棗獼猴桃多糖的分離純化及抗氧化活性測(cè)定[J]. 宣麗,劉長(zhǎng)江,劉洋.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2013(02)
[9]梨果實(shí)在貯藏過(guò)程中果膠分解酶活性的變化[J]. 樸一龍,趙蘭花,吳榮哲.  北方園藝. 2009(04)
[10]常溫貯藏獼猴桃果實(shí)的生理變化[J]. 雷玉山,楊曉宇,劉運(yùn)松,趙致遠(yuǎn).  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2005(03)

博士論文
[1]軟棗獼猴桃采后生理及軟化差異蛋白質(zhì)組學(xué)和PG酶學(xué)性質(zhì)[D]. 李書(shū)倩.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3481214