本文以谷氨酸棒狀桿菌基因工程菌ATCC14067-T18-argB為主要研究對象,確定了發(fā)酵液中游離精氨酸的檢測方法;研究了大豆蛋白胨、葡萄糖、尿素、碳酸鈣和裝液量等因素對精氨酸產(chǎn)量的影響,采用Box-Bohnken進行培養(yǎng)基的優(yōu)化;并在發(fā)酵罐水平對葡萄糖的添加方式、初糖濃度、接種量等發(fā)酵工藝進行探索。1.采用高效液相色譜法檢測發(fā)酵液中游離精氨酸的含量,確定了衍生試劑并對色譜柱、洗脫梯度等進行優(yōu)化。以2,4-二硝基氟苯作為衍生試劑,Hypersil BDS C18作為檢測用色譜柱,驗證優(yōu)化后的程序,其波形完整,不拖尾,不黏連;其線性方程回歸系數(shù)為0.9947,線性關(guān)系良好;穩(wěn)定性好;重復(fù)性強。2.考察發(fā)酵培養(yǎng)基各因素含量對積累精氨酸的影響,在單因素水平基礎(chǔ)上,確定了三個重要影響因子,采用Box-Bohnken的方法對這三個影響因子進行響應(yīng)面優(yōu)化,以大豆蛋白胨、尿素和葡萄糖作為自變量,精氨酸產(chǎn)量為響應(yīng)值,確定了發(fā)酵培養(yǎng)基的成分較優(yōu)組分為大豆蛋白胨9.0 g/L,葡萄糖80.0 g/L,尿素8.0 g/L。使用優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基,搖瓶發(fā)酵72小時,出發(fā)菌株14067-T18-argB平均積... 

【文章來源】：華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 L-精氨酸的功能和用途
        1.2.1 L-精氨酸的功能
        1.2.2 L-精氨酸的用途
    1.3 L-精氨酸的生物合成途徑與調(diào)節(jié)機制
    1.4 L-精氨酸的生產(chǎn)方法
    1.5 L-精氨酸發(fā)酵育種手段
        1.5.1 傳統(tǒng)的育種手段
        1.5.2 L-精氨酸育種的基因工程手段
    1.6 L-精氨酸發(fā)酵工藝的研究進展
    1.7 本文的研究基礎(chǔ)
    1.8 本文研究的意義及主要內(nèi)容
        1.8.1 論文研究的意義
        1.8.2 論文研究的主要內(nèi)容
第二章 L-精氨酸測定方法的建立
    2.1 引言
    2.2 實驗材料與儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 主要儀器與設(shè)備
    2.3 試驗方法
        2.3.1 發(fā)酵液的獲得與前處理
        2.3.2 樣品衍生方法
        2.3.3 高效液相色譜法測定發(fā)酵液中L-精氨酸條件的確定
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 衍生試劑的選擇
        2.4.2 色譜柱的選擇
        2.4.3 洗脫方法的優(yōu)化
        2.4.4 重復(fù)性實驗
        2.4.5 考察線性范圍
    2.5 本章小結(jié)
第三章 L-精氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
    3.1 引言
    3.2 實驗材料與儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 主要儀器與設(shè)備
    3.3 試驗方法
        3.3.1 種子液及發(fā)酵液的獲得
        3.3.2 L-精氨酸的檢測方法
        3.3.3 單因素水平設(shè)計
        3.3.4 最陡爬坡實驗設(shè)計
        3.3.5 響應(yīng)面實驗設(shè)計
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 單因素水平對L-精氨酸產(chǎn)量的影響
        3.4.2 最陡爬坡實驗設(shè)計
        3.4.3 響應(yīng)面試驗設(shè)計表及結(jié)果
        3.4.4 響應(yīng)面試驗驗證試驗
    3.5 本章小結(jié)
第四章 3L發(fā)酵罐的發(fā)酵工藝的優(yōu)化
    4.1 引言
    4.2 實驗材料與器材
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗儀器與設(shè)備
    4.3 試驗方法
        4.3.1 種子制備
        4.3.2 L發(fā)酵罐發(fā)酵流程
        4.3.3 3L發(fā)酵罐發(fā)酵
        4.3.4 檢測方法
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 重組谷氨酸棒狀桿菌 3L罐發(fā)酵
        4.4.2 最佳初糖濃度
        4.4.3 接種量對發(fā)酵的影響
        4.4.4 優(yōu)化結(jié)果驗證
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    結(jié)論
    展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號：3468365