目的了解兒童大葉性肺炎支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）肺炎支原體（mycoplasmal pneumonia,MP）、肺炎鏈球菌（streptococcus pneumoniae,SP）檢出情況,并行相關(guān)耐藥基因檢測,進一步總結(jié)本地區(qū)患兒臨床特點。方法收集大葉性肺炎患兒BALF 69例,采用熒光實時定量PCR（fluorescent real-time quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）對上述標(biāo)本行MP、SP核酸檢測。MP陽性患兒,完善23 Sr RNA V區(qū)突變位點（A2063G、A2064G、A2063C及A2063T）檢測,位點檢測陽性者納入突變組,檢測陰性者納入未突變組;SP陽性患兒,完善大環(huán)內(nèi)酯類抗生素（macrolide antibiotics,MALs）相關(guān)耐藥基因（erm B、mefA及mefE）檢測,并行青霉素結(jié)合蛋白PBP1A、PBP2B及PBP2X基因擴增測序,根據(jù)檢測結(jié)果分為耐藥基因陰性組,耐藥基因陽性組,分別比較上述各組患兒的臨床資料。結(jié)果1)69例... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

FQ-PCR鑒定MP、SP陽性標(biāo)本的熒光擴增曲線

兒童大葉性肺炎肺泡灌洗液病原檢測及臨床分析101.2MP感染患兒23SrRNAV區(qū)突變位點檢測結(jié)果如圖2，表2所示，48例MP感染患兒BALF中，耐藥突變位點陽性37例，陽性率為77.1%。其中A2063G陽性計35例（73.0%），A2064G陽性計24例（50.0%），A2063C陽性22例（45.8%），A2063T陽性12例（25.0%）。同一患兒體內(nèi)可同時存在多種突變位點，上述4種突變位點同時出現(xiàn)總計6例（12.5%），A2063G、A2063C及A2064G合并存在10例（20.8%），A2063G合并A2064G陽性6例（12.5%），A2063G合并A2063T陽性6例（12.5%），A2063G合并A2063C陽性6例（12.5%）。最終37例患兒納入位點突變組，余11例患兒納入未突變組。表248例MP陽性患兒突變位點檢測結(jié)果圖2.MP4種耐藥突變位點電泳結(jié)果突變位點陽性數(shù)（例）陽性率（%）A2063G3573.0A2064G2450.0A2063C2245.8A2063T1225.0A2063G+A2063C+A2064G1020.8A2063G+A2064G612.5A2063G+A2063T612.5A2063G+A2063C612.54種突變均陽性612.5

兒童大葉性肺炎肺泡灌洗液病原檢測及臨床分析11FQ-PCR檢測結(jié)果電泳圖見圖3，送檢樣品中未檢測到mefE基因，余ermB、mefA2種耐藥基因均有檢出。如表3所示，ermB、mefA陽性比例分別為64.3%、14%，兩者同時出現(xiàn)2例（14.3%）（表2）。14例SP陽性BALF中不含有上述3種耐藥基因的標(biāo)本有5例，占35.7%，納入耐藥基因陰性組，其余9例患兒納入耐藥基因陽性組。表314例SP陽性患兒MALs相關(guān)耐藥基因檢測結(jié)果耐藥基因例數(shù)陽性率（%）ermB964.3mefA214.0mefE00mefA+ermB214.03種基因均陽性003種基因均陰性535.7圖3SP3種耐藥基因電泳結(jié)果1.4SP感染患兒PBPs測序結(jié)果對14例SP陽性患兒PBP1A、PBP2B及PBP2X基因擴增測序結(jié)果見表4。共7例患兒PBPs基因發(fā)生變異，其中6例患兒存在PBP2X基因變異，4例患兒存在PBP1A基因變異，4例患兒存在PBP2B變異，PBP2X變異最常見（85.7%）。PBP1A發(fā)生氨基酸置換有THr371Ser、THr371Ala；PBP2B發(fā)生氨基酸置換有THr451Ser、THr451Ala、Ala624Glu；PBP2X發(fā)生氨基酸置換有THr371Arg或者Met400Arg。1.3SP感染患兒MALs相關(guān)耐藥基因檢測結(jié)果


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