發(fā)布時間：2021-10-24 18:00

　　從發(fā)病中華絨螯蟹肝胰腺中分離出1株優(yōu)勢生長的致病菌（LJ1）,對分離菌進(jìn)行致病性、形態(tài)與生理生化特征及16S rRNA和gyrB基因同源性與系統(tǒng)發(fā)育分析,結(jié)果顯示引起中華絨螯蟹大量死亡的病原為弗氏檸檬酸桿菌（Citrobacter freundii）,分離菌對中華絨螯蟹的半數(shù)致死量(LD₅₀)為2.1×l0⁶ CFU/mL。為進(jìn)一步明確分離菌株毒力基因的攜帶情況,檢測了分離菌定居因子（cfa）、尿素酶基因簇（ureG、ureF、ureE、ureD）、Vi抗原（viaB）、外膜蛋白（ompX）共7個毒力相關(guān)基因攜帶情況。結(jié)果表明,分離菌LJ1可擴(kuò)增出cfa、ureG、ureF、ureE、ureD、viaB和ompX 7個毒力相關(guān)基因,這些毒力基因可作為檢測致病性弗氏檸檬酸桿菌的生物學(xué)標(biāo)記。 

【文章來源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

LJ1菌株16S rRNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹

菌株LJ1在LB培養(yǎng)基上菌落特征為表面濕潤光滑、中央隆起、邊緣整齊的淡黃色菌落,培養(yǎng)24 h觀察直徑多在2 mm左右。革蘭染色后觀察,菌體為革蘭陰性、短桿狀、兩端鈍圓、無芽胞及莢膜,多呈散在分布,大小為0.5～0.8 μm×0.5～1.0 μm。菌株LJ1經(jīng)透射電子顯微鏡觀察顯示,該細(xì)菌為周生鞭毛(圖1)。其他理化特性見表3。綜合分離菌株LJ1理化特性,與弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii)最接近。表3 分離菌株的生理生化特性 特性 LJ1 弗氏檸檬酸桿菌① 特性 LJ1 弗氏檸檬酸桿菌① 37 °C生長 + + 鼠李糖 + - 甘露糖 + + 木糖 + + O-F F F 蔗糖 - d 苯丙氨酸 - - 甘露醇 + + 山梨糖 - + 纖維二糖 - d 阿拉伯糖 - + 七葉苷 + d 硫化氫 + + 蕈糖 + + 乳糖 + + 醋酸鹽 + + 硝酸鹽(還原) + + 肌醇 - - 枸櫞酸鹽 + + 側(cè)金盞花醇 - - 丙二酸鹽 - - 麥芽糖 + + β-半乳糖苷 + + 山梨醇 + d 棉子糖 - d 衛(wèi)矛醇 - d 酒石酸鹽 + + 尿素 - d 0%Nacl胨水 + · 半固體瓊脂 + + 淀粉 + - 明膠 - - 血清菊糖 - + 6%Nacl胨水 - · DNA酶 - - 阿拉伯醇 - - α-甲基-D-葡糖苷 - - 注:“+” 為陽性;“d” 為10%～90% 陽性;“-”為陰性;“F”為發(fā)酵型;“·” 為在原文中無記載。①為數(shù)據(jù)來自文獻(xiàn)[13]

LJ1菌株gyrB序列的系統(tǒng)發(fā)育樹

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一株弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定及致病性研究[J]. 石征宇,易弋,黃德生,羅福廣,黃杰,魯晶娣,黎婭.  中國畜牧獸醫(yī). 2018(02)
[2]長江野生和池塘養(yǎng)殖河蟹（Eriocheir sinensis）蟹種早期養(yǎng)殖性能、抗病力和非特異性免疫性能的比較[J]. 姜曉東,吳旭干,劉青,何杰,張慶華,王幼鵬,成永旭.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(06)
[3]克氏原螯蝦病原弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定及其藥敏與黏附特性[J]. 肖寧,孔令嚴(yán),周昊,曹際,李槿年,相翊卿,王蒙蒙.  水產(chǎn)學(xué)報. 2016(06)
[4]中華絨螯蟹和克氏原螯蝦細(xì)菌性敗血癥病原學(xué)研究[J]. 姜光明,錢彩源,顧雪林,魏賓,徐樂,宋學(xué)宏.  水產(chǎn)養(yǎng)殖. 2016(04)
[5]中華絨螯蟹點狀產(chǎn)氣單胞菌的分離鑒定與藥敏試驗[J]. 曹海鵬,溫樂夫,白金尊,張帆,何珊.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(08)
[6]弗氏檸檬酸桿菌對動物和人致病性研究進(jìn)展[J]. 薛巧,趙戰(zhàn)勤,劉會勝,薛云,董發(fā)明.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(07)
[7]克氏原螯蝦弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗[J]. 陳紅蓮,宋光同,何吉祥,侯冠軍,王永杰.  淡水漁業(yè). 2014(01)
[8]中華鱉弗氏檸檬酸桿菌的分離、鑒定及藥物敏感性試驗[J]. 田飛焱,歐陽敏,張曉燕,江明華.  水產(chǎn)學(xué)雜志. 2013(04)
[9]三疣梭子蟹病原弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定及定居因子抗原基因檢測[J]. 閻斌倫,張曉君,梁利國,楊維,楊家新.  水產(chǎn)學(xué)報. 2012(03)
[10]弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定與PCR-SSCP分析[J]. 胡秀彩,王藝,呂愛軍.  微生物學(xué)雜志. 2011(04)



本文編號：3455724