目的探討miR-155-5p對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞增殖和凋亡的影響及分子機(jī)制。方法分離培養(yǎng)軟骨細(xì)胞,設(shè)置對(duì)照（NC）組、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）組、1、2、3、4、5組。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測(cè)miR-155-5p和Ⅲ型纖維連接蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3B（FNDC3B）mRNA表達(dá)水平;蛋白質(zhì)印跡（Western blot）法檢測(cè)FNDC3B、細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved-caspase-3）、磷酸化p65（p-p65）、磷酸化核因子kappaB抑制蛋白α（p-IκBα）蛋白表達(dá);細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8（CCK-8）檢測(cè)細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-155-5p和FNDC3B的靶向關(guān)系。結(jié)果 IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中miR-155-5p高表達(dá)（3.12±0.31 vs 1.00±0.10）,FNDC3B mRNA（0.36±0.03 vs 1.03±0.11）和蛋白（0.40±0.04 vs 0.88±0.08）低表達(dá)（P<0.05）,且IL-1β可誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡（20.46±... 

【文章來(lái)源】：分子診斷與治療雜志. 2020,12(07)

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Western Blot檢測(cè)FNDC3B蛋白表達(dá)

與3組相比，4組軟骨細(xì)胞中FNDC3B表達(dá)水平升高，CyclinD1表達(dá)水平升高，Cleaved-caspase-3表達(dá)水平降低，細(xì)胞存活率升高，細(xì)胞凋亡率降低（P<0.05）。表3，見(jiàn)圖2。2.4 miR-155-5p靶向FNDC3B

miR-155-5p靶向調(diào)控FNDC3B表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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