發(fā)布時(shí)間：2021-10-17 14:23

　　水稻（Oryzasativa L.）作為我國(guó)最重要的糧食作物,水稻的品質(zhì)和產(chǎn)量與人們生活息息相關(guān),其中對(duì)水稻基因功能的研究尤為重要。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子（GRF）是一類小且編碼植物特異性的轉(zhuǎn)錄因子家族。本課題組前期的研究表明,低磷脅迫能導(dǎo)致水稻形態(tài)的重塑,這種形態(tài)重塑主要包括根系的加長(zhǎng)和分蘗的減少。同時(shí),轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的結(jié)果表明,低磷脅迫顯著誘導(dǎo)水稻OsGRF1基因的表達(dá)。本研究運(yùn)用CRISPR/Cas 9基因編輯技術(shù)對(duì)低磷敏感型水稻品種通粳981 OsGRF1基因進(jìn)行敲除突變,研究OsGRF1基因敲除突變對(duì)水稻形態(tài)性狀的影響,分析產(chǎn)生這些影響的可能機(jī)制,并同時(shí)探討OsGRF1基因在低磷脅迫導(dǎo)致水稻形態(tài)重塑中的作用。1.OsGRF1基因敲除突變體的構(gòu)建與鑒定對(duì)水稻通粳981 OsGRF1基因全長(zhǎng)進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序后,與RAP-DB網(wǎng)絡(luò)上所報(bào)道的水稻OsGRF1基因組序列進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)通粳981 OsGRF1基因編碼區(qū)產(chǎn)生兩處單核苷酸替換,一處缺失單個(gè)谷氨酰胺。利用CRISPR/Cas 9基因編輯技術(shù)對(duì)供試水稻品種通粳981進(jìn)行OsGRF1基因敲除突變,從而在獲得的60株組培苗中篩選出52株陽(yáng)性苗,陽(yáng)性... 

【文章來(lái)源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－２帶有質(zhì)粒ＢＧＫ０３２－ＯｓＧＲＦｌ陽(yáng)性菌鑒定??注：Ｍ為ＴＩＡＮＧＥＮＤ２０００ＤＮＡＭａ＾ｋｅｒ；Ａ：大腸桿菌陽(yáng)性鑒定；Ｂ：農(nóng)桿菌陽(yáng)性鑒定??

?揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文???Ａ?Ｂ??４０１?！，?－?：?＇?８０１?．?１??？?＾?丁??二二?＊＊＊??￡?３０－?Ｉ?＊ｆ?Ｉ?丨…＊?Ｉ?￡?６０－?．?ｉ?Ａ??ｉ?￡?ｉ??產(chǎn)２。＿圍１。?＾■黑??ｒｊ｜?：，ｌ，?Ｉ???ＶＶＹ?，，＞ｖｖｖ＇??圖３－５正常磷水平／低磷處理的突變體與野生型分蘗數(shù)比較??注：Ａ：分蘗期（發(fā)芽后５周）；Ｂ：分蘗期（發(fā)芽后８周）；每組數(shù)據(jù)來(lái)源于６個(gè)生物學(xué)重復(fù)。??ＷＴ表示野生型，Ｍ１４和Ｍ２３分別表示１４號(hào)和２３號(hào)突變體，ｃｋ表示正常磷處理，ｌｐ表示低磷處??理�！埃睿蟆北硎緹o(wú)差異；＊表示顯著性差異（Ｐ＜０．０５）?；?＊＊表示極顯著性差異（Ｐ＜０．０１）?，?＊＊＊?（Ｐ??＜０．００１），＊＊＊＊?（Ｐ＜０．０００１）?？，沒(méi)有指示線的均表示與ＷＴ－ｃｋ進(jìn)行比較。ＷＴ－ｃｋ，正常磷處理??野生型；ＷＴ－ｌｐ，低磷處理野生型；Ｍ１４／２３－ｃｋ，正常磷處理突變體１４號(hào)和２３號(hào)；Ｍ１４／２３－ｌｐ，低??磷處理突變體１４號(hào)和２３號(hào)??（之后的縮寫(xiě)或標(biāo)注均與此全部相同）??Ｆｉｇ．?３－５?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｔｉｌｌｅｒ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｍｕｔａｎｔｓ?ａｎｄ?ｗｉｌｄ－ｔｙ＇ｐｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎｏｒｍａｌ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ??ｌｅｖｅｌ／ｌｏｗ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｌｅｖｅｌ??Ｎｏｔｅ：?Ａ：?５?ｗｅｅｋｓ?ａｔ?ｔｉｌｌｅｒｉｎｇ?ｓｔａｇｅ；?Ｂ：?８?ｗｅｅｋｓ?ａｔ?ｔｉｌｌｅｒｉｎｇ?ｓｔａｇｅ；?Ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?ｏｆ?ｄａｔａ?ｃｏｍｅｓ?ｆｒｏｍ?６??ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ?ｒ

－ＰＣＲ驗(yàn)證所揭示的ＱｓＧ兄Ｆ７基因敲除能誘導(dǎo)突變體??Ｍ１４和Ｍ２３中的磷運(yùn)轉(zhuǎn)載體蛋白基因的上調(diào)表達(dá)相一致。??低磷處理?xiàng)l件下，ＯｓＧ兄Ｆ７基因敲除突變體Ｍ１４、Ｍ２３和野生型地上部磷含量均??極顯著低于正常磷處理，這表明，低磷處理極顯著降低水稻體內(nèi)的磷含量。這和本課??題組前期的研究結(jié)果相一致（史春陽(yáng)，２０１５）。??－ｗ??２?５?＊＊＊＊?＊＊＊??０?Ｉ?１?Ｉ?１??Ｕｉ?１?ｙ??Ｚ?＊＊＊＊?ｍｍ?＊＊＊＊?＊＊＊＊??１?丄醍．?Ｌｊ?，??圖３－１３野生型與突變體水稻的地上部磷含量??注：每組數(shù)據(jù)來(lái)源于６個(gè)生物學(xué)重復(fù)；??Ｆｉｇ．?３－１３?Ｔｈｅ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｇｒｏｕｎｄ?ｏｆ?ｗｉｌｄ?ｔ＞ｐｅ?ａｎｄ?ｍｕｔａｎｔ?ｒｉｃｅ??Ｎｏｔｅ：?Ｅａｃｈ?ｓｅｔ?ｏｆ?ｄａｔａ?ｃｏｍｅｓ?ｆｒｏｍ?６?ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ?ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎｓ??３．４．２齡絕基因敲除對(duì)水稻根系活力的影響??優(yōu)良的根系生理活性是水稻高效利用營(yíng)養(yǎng)元素的關(guān)鍵，根系活力會(huì)影響水稻對(duì)營(yíng)??養(yǎng)元素的吸收，也直接關(guān)系到地下部分對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的同化、轉(zhuǎn)運(yùn)及氨基酸和蛋白質(zhì)的??合成（褚光等，２０１２）。本研究測(cè)定了?兄Ｆ／基因敲除對(duì)通粳９８１根系活力的影響??（圖３－１４）。圖３－１４結(jié)果顯示，不論在低磷還是正常磷處理?xiàng)l件下ａｓＧＭｉ基因敲除??突變體Ｍ１４和Ｍ２３的根系活力均高于對(duì)照，尤其在低磷處理?xiàng)l件下，突變體Ｍ１４和??Ｍ２３根系活力較野生型分別提高了?１１６．１％和８１．２％。這表明，兄Ｆ７基因負(fù)調(diào)控水??稻的根系活力。這也是基因敲除突變提高通粳９８１對(duì)磷的

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]不同基因型水稻對(duì)低磷脅迫的響應(yīng)及其分子機(jī)制研究[D]. 郭玉春.福建農(nóng)林大學(xué) 2005

碩士論文
[1]水稻OsLPRs突變體構(gòu)建與根系低磷性狀研究[D]. 任蒙蓮.揚(yáng)州大學(xué) 2019
[2]耐低磷水稻品種篩選和根系形態(tài)重塑機(jī)制[D]. 史春陽(yáng).揚(yáng)州大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3441912