發(fā)布時間：2021-10-15 13:46

　　百合是世界著名切花,香型豐富,具有很高的觀賞價值和經(jīng)濟價值。為分析百合花香形成的原因,本文以12個雜交系41個品種百合作為研究材料,測定花瓣盛開期揮發(fā)性成分,研究不同雜交系百合香氣成分的特征,對百合進行香型分類;通過實時熒光定量表達分析,結合揮發(fā)物種類及釋放量差異,尋找單萜合成酶基因（TPS）表達與花香釋放之間的聯(lián)系;克隆兩種不同香氣百合品種單萜合成酶基因的啟動子序列,并對序列進行生物信息學元件分析,初步研究單萜合成酶基因啟動子功能。主要結果如下:1、12個雜交系41個品種百合共鑒定出46種香氣成分,萜類、苯環(huán)類為主要類群。百合的主要揮發(fā)性成分為桉樹腦、（E）-β-羅勒烯、芳樟醇和苯甲酸甲酯,無香的亞洲百合和亞喇百合揮發(fā)性成分的數(shù)量和含量顯著低于其它類型百合,由雜交種彼此雜交得到的混雜交系結合了親本的香氣性狀。2、根據(jù)主要花香成分的香韻類別、含量結合人體嗅覺感官,將41種百合分為6種香型:無香型、冰涼香型、果香型、麝香型、水果蜂蜜香型和百合香型。3、實時熒光定量PCR顯示:無香百合單萜合成酶基因的表達水平顯著低于有香百合。4、從無香百合AT6和有香百合O6中克隆得到三種LhTPS基因的... 

【文章來源】：山西農業(yè)大學山西省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

接頭PCR原理示意圖

-6-圖1.2TAIL-PCR原理示意圖Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性內切酶切割內部無切點的已知DNA序列，然后用DNA連接酶使DNA片段自連產(chǎn)生環(huán)狀DNA片段，最后以環(huán)化產(chǎn)物為模板，使用根據(jù)已知序列設計的反向引物進行PCR擴增（圖1.3）。運用反向PCR方法，Chen等從小麥中克隆了小麥花粉特異性TaPSG719基因啟動子序列[47]，Tsafaris等從番紅花中成功克隆出了CsatAP1／FUL啟動子[48]。該方法引物設計簡單，成本低，但PCR擴增的成功依賴于限制性酶切位點的位置，目標DNA片段的環(huán)化難以控制。圖1.3I-PCR原理示意圖Fig.1.3PrincipleofI-PCR現(xiàn)今，已有許多研究表明了啟動子在基因表達調控中的重要性。許園園等在杜梨中鑒定了CBLs家族基因成員PbCBL10啟動子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表

-6-圖1.2TAIL-PCR原理示意圖Fig.1.2PrincipleofTAIL-PCR反向PCR（I-PCR）指用限制性內切酶切割內部無切點的已知DNA序列，然后用DNA連接酶使DNA片段自連產(chǎn)生環(huán)狀DNA片段，最后以環(huán)化產(chǎn)物為模板，使用根據(jù)已知序列設計的反向引物進行PCR擴增（圖1.3）。運用反向PCR方法，Chen等從小麥中克隆了小麥花粉特異性TaPSG719基因啟動子序列[47]，Tsafaris等從番紅花中成功克隆出了CsatAP1／FUL啟動子[48]。該方法引物設計簡單，成本低，但PCR擴增的成功依賴于限制性酶切位點的位置，目標DNA片段的環(huán)化難以控制。圖1.3I-PCR原理示意圖Fig.1.3PrincipleofI-PCR現(xiàn)今，已有許多研究表明了啟動子在基因表達調控中的重要性。許園園等在杜梨中鑒定了CBLs家族基因成員PbCBL10啟動子的功能元件，探明PbCBL10在逆境下的表

【參考文獻】：
期刊論文
[1]百合品種的分類及遺傳多樣性研究[J]. 杜方,李興桃,徐小晶,袁赟,常琳,張鮮艷.  山西農業(yè)大學學報(自然科學版). 2018(05)
[2]海島棉單萜合酶基因克隆及其受黃萎病誘導的表達分析[J]. 楊璨,孫全,王微娜,耿帥鵬,江懷仲,蔡應繁.  南方農業(yè)學報. 2016(05)
[3]‘西伯利亞’百合單萜釋放與Li-mTPS表達日變化動態(tài)分析（英文）[J]. 李天嬌,胡增輝,鄭健,冷平生,楊凱.  西北農業(yè)學報. 2016(05)
[4]濃香型和淡香型百合單萜合酶基因差異表達[J]. 唐彪,胡增輝,冷平生,閆金華,吳秀云.  北京農學院學報. 2016(02)
[5]玉簪屬植物花香研究[J]. 劉倩,孫國峰,張金政,李曉東.  中國農業(yè)科學. 2015(21)
[6]荔枝多酚氧化酶基因啟動子克隆與功能分析[J]. 王樹軍,劉保華,孫進華,肖茜,李煥苓,王家保.  果樹學報. 2015(03)
[7]自然界氣味關系圖[J]. 林翔云,王麗萍,林君如,何麗洪,葛淑英,鄭劍濱.  香料香精化妝品. 2015(01)
[8]茶樹萜類香氣物質代謝譜與相關基因表達譜時空變化的關系[J]. 劉晶晶,王富民,劉國峰,賀志榮,楊華,韋朝領,宛曉春,魏書.  園藝學報. 2014(10)
[9]杜梨PbCBL10基因表達與啟動子功能分析[J]. 許園園,藺經(jīng),李曉剛,李慧,常有宏.  果樹學報. 2014(06)
[10]岷江百合單萜合酶基因克隆與表達分析[J]. 李路路,王歡,孫明,張啟翔.  福建農林大學學報(自然科學版). 2014(04)

博士論文
[1]百合不同器官轉錄組分析及SSR標記開發(fā)應用[D]. 杜方.浙江大學 2014

碩士論文
[1]黃瓜（Cucumis sativus L.）α-半乳糖苷酶基因啟動子的克隆及序列分析[D]. 王奎山.揚州大學 2010
[2]百合查爾酮合成酶基因（CHS）及其啟動子的克隆與分析[D]. 楊麗.西北農林科技大學 2006



本文編號：3438089