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擬南芥MAC1基因的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-10-13 11:45
  隱花色素(CRYPTOCHROME,簡(jiǎn)稱CRY)是一類在植物和動(dòng)物體內(nèi)普遍存在的蛋白,具有感受藍(lán)光和調(diào)節(jié)重力感應(yīng)等功能。在植物中,CRYs作為藍(lán)光受體,能夠影響藍(lán)光誘導(dǎo)的花發(fā)育、生物鐘、晝夜節(jié)律調(diào)控和幼苗形態(tài)建成等過(guò)程。在模式植物擬南芥中,CRY1主要介導(dǎo)藍(lán)光抑制下胚軸的伸長(zhǎng),CRY2則主要介導(dǎo)藍(lán)光促進(jìn)光周期控制的開(kāi)花,為了進(jìn)一步研究隱花色素CYR2的調(diào)控功能,通過(guò)篩選帶有CRY2-LUC轉(zhuǎn)基因的EMS誘變突變體庫(kù),分離鑒定出一個(gè)SUS2/PRP8基因的等位基因突變體,我們將突變體命名為mac1(more abundant of cry2 1),并對(duì)MAC1基因的功能進(jìn)行初步的探索。主要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1、篩選EMS誘變庫(kù)并獲得一個(gè)具有早花表型,并且CRY2表達(dá)量上調(diào)的突變體植株,將其命名為mac1。通過(guò)多態(tài)性分子標(biāo)記對(duì)mac1突變體進(jìn)行圖位克隆,確定突變位點(diǎn)位于MAC1基因第六個(gè)外顯子發(fā)生了堿基突變,一個(gè)鳥(niǎo)嘌呤核苷酸(G)突變成了腺嘌呤核苷酸(A),導(dǎo)致甘氨基酸變成了精氨基酸。2、構(gòu)建MAC1基因的CRISPR/Cas9敲除載體并轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得mac-cr突變體材料,對(duì)獲得的突變體... 

【文章來(lái)源】:山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 隱花色素
        1.1.1 隱花色素的簡(jiǎn)介
        1.1.2 隱花色素的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 隱花色素的功能
        1.1.4 隱花色素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
    1.2 PRP8 的簡(jiǎn)介
    1.3 CRISPR/Cas9 基因編輯技術(shù)
    1.4 研究?jī)?nèi)容和意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 材料、試劑和儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)器材
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 突變體mac1/CRY2-LUC的篩選
        2.2.2 突變體mac1基因定位
        2.2.3 擬南芥mac1基因克隆及遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.4 擬南芥mac1中CRY2 基因的表達(dá)分析
        2.2.5 擬南芥mac1開(kāi)花時(shí)間表型分析
        2.2.6 擬南芥mac1突變體下胚軸長(zhǎng)度分析
        2.2.7 實(shí)驗(yàn)所用引物列表
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 mac1突變體的獲得
    3.2 mac1是SUS2/PRP8 基因的等位突變體
    3.3 MAC1 基因的克隆與功能分析
    3.4 mac1基因突變導(dǎo)致內(nèi)源CRY2 蛋白降解變慢
    3.5 mac1突變體表現(xiàn)早花表型
    3.6 mac1突變體表現(xiàn)下胚軸變短表型
第四章 討論與展望
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)況及聯(lián)系方式


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]擬南芥隱花色素CRY2調(diào)控因子PRP8基因的功能分析[J]. 郭亞蓉,王艷艷,劉軍,裴雁曦.  生物技術(shù)進(jìn)展. 2019(02)
[2]農(nóng)作物EMS誘變研究進(jìn)展[J]. 黃冬福,付文婷,韓世玉,何建文.  北方園藝. 2015(24)



本文編號(hào):3434598

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