與癌癥相關基因的分析檢測對腫瘤早期篩查及治療過程的動態(tài)監(jiān)測具有非常重要的意義。鼠類肉瘤病毒癌基因（kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS）突變狀態(tài)是人非小細胞肺癌、結直腸癌等多種癌癥所關注的研究熱點之一,在癌癥的靶向藥物篩選研究中也發(fā)揮著關鍵作用,所以KRAS基因突變狀態(tài)的檢測至關重要。隨著納米技術與多學科領域的不斷交叉滲透,基于生化傳感的檢測方法為體外診斷疾病標志物提供了新的思路。電化學檢測方法的簡便易行及高靈敏度使其在分子檢測上具有很好的優(yōu)勢,本論文構建了一系列可用于KRAS基因檢測的高靈敏電化學DNA生物傳感器,為新型電化學DNA傳感器的研究提供了新的思路和方法。主要研究工作如下:（1）構建了基于MoS₂/MWCNTs-COOH的高靈敏電化學DNA傳感器用于KRAS基因檢測制備了MoS₂/MWCNTs-COOH復合納米材料并修飾到玻碳電極表面,將5’端氨基修飾的捕獲探針分子通過酰胺共價鍵固定到MoS₂/MWCNTs-COOH工作電極表面,并以亞甲基藍做電活性指示劑,實現了對K... 

【文章來源】：重慶大學重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：87 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

用于檢測microRNA的電化學生物傳感器檢測原理圖

重慶大學碩士學位論文4通過這種酶切輔助循環(huán)放大的方法使該傳感器檢測性能得到了提高，檢測限達到了12.8fM，檢測范圍為0.02pM~2nM。圖1.1用于檢測microRNA的電化學生物傳感器檢測原理圖Fig.1.1SchematicillustrationofelectrochemicalbiosensorformicroRNAdetection圖1.2用于檢測DNA的雙信號比率電化學DNA生物傳感器原理圖Fig.1.2SchematicillustrationofratiometricelectrochemicalbiosensorforDNAdetectionYang等人[65]構建了一種基于三維ZnO/MoS2納米材料的無標記電化學DNA傳感器，并實現了對PML/RARA融合基因的靈敏檢測，原理如圖1.3所示。該傳感器的檢測范圍為1.0×10-15M~1.0×10-6M，其檢測限低至6.6×10-16M。玻碳電極上

1緒論5修飾的ZnO/MoS2不僅提高了電極的導電性和電極表面的電子傳遞效率，其三維結構也使得電極的比表面積增大，提高了電極表面DNA探針的反應平臺，另外，ZnO帶正電荷，這對DNA的固定也非常有利，通過納米材料對電極表面進行改性使傳感器的性能得到極大提高，靈敏度得以增強。圖1.3用于PML/RARA融合基因檢測的電化學生物傳感器原理圖Fig.1.3SchematicillustrationofelectrochemicalbiosensorforPML/RARAfusiongenedetectionNguyet等人[66]設計合成了一種核殼結構的CeO2-NR@Ppy復合納米材料，構建了能應用于沙門氏菌（Salmonella）總DNA靈敏檢測的新型電化學DNA傳感器。其檢測原理如圖1.4所示，CeO2-NR@Ppy通過共價鍵合作用將捕獲探針固定在修飾電極上，如果PCR檢測樣本中存在目的基因，那么目的基因和捕獲探針會由于堿基互補作用而形成互補雙鏈，所形成的雙鏈會阻礙電極表面的電子傳遞，并且電極電阻會隨目標序列濃度的增大而增大，最后通過電化學交流阻抗譜法（electrochemicalimpedancespectroscopy,EIS）對傳感器的檢測性能進行測定。研究結果表明，該傳感器具有良好的靈敏度和選擇性，檢測限為0.084nM，檢測范圍為0.01~0.4nM，最后，此傳感器也對實際樣本進行了檢測，并達到了很好的效果。核酸腫瘤標志物在人體中的含量非常低，因此還需要開發(fā)更加靈敏的檢測方法。無論是以檢測DNA還是RNA為目的所設計的傳感器，其原理均立足于堿基互補配對原則。根據不同的分類方式，可以將其分為標記型與非標記型；酶型與無酶型。根據探針設計的類型不同還可以分成三明治型，Y型，四面體型等。無論采用那種方法，最終的目的都是構建一種超靈敏的、具備優(yōu)良選擇性和穩(wěn)定性

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