與癌癥相關(guān)基因的分析檢測對腫瘤早期篩查及治療過程的動態(tài)監(jiān)測具有非常重要的意義。鼠類肉瘤病毒癌基因（kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS）突變狀態(tài)是人非小細(xì)胞肺癌、結(jié)直腸癌等多種癌癥所關(guān)注的研究熱點之一,在癌癥的靶向藥物篩選研究中也發(fā)揮著關(guān)鍵作用,所以KRAS基因突變狀態(tài)的檢測至關(guān)重要。隨著納米技術(shù)與多學(xué)科領(lǐng)域的不斷交叉滲透,基于生化傳感的檢測方法為體外診斷疾病標(biāo)志物提供了新的思路。電化學(xué)檢測方法的簡便易行及高靈敏度使其在分子檢測上具有很好的優(yōu)勢,本論文構(gòu)建了一系列可用于KRAS基因檢測的高靈敏電化學(xué)DNA生物傳感器,為新型電化學(xué)DNA傳感器的研究提供了新的思路和方法。主要研究工作如下:（1）構(gòu)建了基于MoS₂/MWCNTs-COOH的高靈敏電化學(xué)DNA傳感器用于KRAS基因檢測制備了MoS₂/MWCNTs-COOH復(fù)合納米材料并修飾到玻碳電極表面,將5’端氨基修飾的捕獲探針分子通過酰胺共價鍵固定到MoS₂/MWCNTs-COOH工作電極表面,并以亞甲基藍(lán)做電活性指示劑,實現(xiàn)了對K... 

【文章來源】：重慶大學(xué)重慶市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

用于檢測microRNA的電化學(xué)生物傳感器檢測原理圖

重慶大學(xué)碩士學(xué)位論文4通過這種酶切輔助循環(huán)放大的方法使該傳感器檢測性能得到了提高，檢測限達(dá)到了12.8fM，檢測范圍為0.02pM~2nM。圖1.1用于檢測microRNA的電化學(xué)生物傳感器檢測原理圖Fig.1.1SchematicillustrationofelectrochemicalbiosensorformicroRNAdetection圖1.2用于檢測DNA的雙信號比率電化學(xué)DNA生物傳感器原理圖Fig.1.2SchematicillustrationofratiometricelectrochemicalbiosensorforDNAdetectionYang等人[65]構(gòu)建了一種基于三維ZnO/MoS2納米材料的無標(biāo)記電化學(xué)DNA傳感器，并實現(xiàn)了對PML/RARA融合基因的靈敏檢測，原理如圖1.3所示。該傳感器的檢測范圍為1.0×10-15M~1.0×10-6M，其檢測限低至6.6×10-16M。玻碳電極上

1緒論5修飾的ZnO/MoS2不僅提高了電極的導(dǎo)電性和電極表面的電子傳遞效率，其三維結(jié)構(gòu)也使得電極的比表面積增大，提高了電極表面DNA探針的反應(yīng)平臺，另外，ZnO帶正電荷，這對DNA的固定也非常有利，通過納米材料對電極表面進(jìn)行改性使傳感器的性能得到極大提高，靈敏度得以增強(qiáng)。圖1.3用于PML/RARA融合基因檢測的電化學(xué)生物傳感器原理圖Fig.1.3SchematicillustrationofelectrochemicalbiosensorforPML/RARAfusiongenedetectionNguyet等人[66]設(shè)計合成了一種核殼結(jié)構(gòu)的CeO2-NR@Ppy復(fù)合納米材料，構(gòu)建了能應(yīng)用于沙門氏菌（Salmonella）總DNA靈敏檢測的新型電化學(xué)DNA傳感器。其檢測原理如圖1.4所示，CeO2-NR@Ppy通過共價鍵合作用將捕獲探針固定在修飾電極上，如果PCR檢測樣本中存在目的基因，那么目的基因和捕獲探針會由于堿基互補(bǔ)作用而形成互補(bǔ)雙鏈，所形成的雙鏈會阻礙電極表面的電子傳遞，并且電極電阻會隨目標(biāo)序列濃度的增大而增大，最后通過電化學(xué)交流阻抗譜法（electrochemicalimpedancespectroscopy,EIS）對傳感器的檢測性能進(jìn)行測定。研究結(jié)果表明，該傳感器具有良好的靈敏度和選擇性，檢測限為0.084nM，檢測范圍為0.01~0.4nM，最后，此傳感器也對實際樣本進(jìn)行了檢測，并達(dá)到了很好的效果。核酸腫瘤標(biāo)志物在人體中的含量非常低，因此還需要開發(fā)更加靈敏的檢測方法。無論是以檢測DNA還是RNA為目的所設(shè)計的傳感器，其原理均立足于堿基互補(bǔ)配對原則。根據(jù)不同的分類方式，可以將其分為標(biāo)記型與非標(biāo)記型；酶型與無酶型。根據(jù)探針設(shè)計的類型不同還可以分成三明治型，Y型，四面體型等。無論采用那種方法，最終的目的都是構(gòu)建一種超靈敏的、具備優(yōu)良選擇性和穩(wěn)定性

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本文編號：3424793