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低強度超聲聯(lián)合載HSV 1 -TK/GCV自殺基因陽離子微泡對高強度聚焦超聲不完全消融后殘余肝癌細胞的抑制作用

發(fā)布時間:2021-10-08 02:55
  目的探討載單純皰疹病毒Ⅰ型胸苷激酶/更昔洛韋(HSV1-TK/GCV)自殺基因的陽離子微泡聯(lián)合低強度超聲對高強度聚焦超聲(HIFU)輻照后殘留肝癌SMCC-7721細胞的抑制作用。方法以低功率HIFU輻照肝癌SMCC-7721細胞,選取最佳殘存細胞亞系并穩(wěn)定培養(yǎng)。通過低強度超聲輻照載TK基因的陽離子微泡轉(zhuǎn)染細胞。分為對照組(殘余癌)、殘余癌+超聲+TK/GCV組、殘余癌+微泡+TK/GCV組及殘余癌+微泡+超聲+TK/GCV組。以Western Blot法檢測TK基因是否成功轉(zhuǎn)入并穩(wěn)定表達。采用流式細胞儀觀察并檢測基因轉(zhuǎn)染效率。篩選適宜前藥GCV濃度,并檢測各組別相同條件下細胞存活率。以流式細胞儀檢測細胞周期及凋亡率。結(jié)果HIFU功率為5 W,頻率為10.20 MHz,持續(xù)輻照40s,可獲得殘癌穩(wěn)定模型。前藥GCV的最適濃度為100μg/ml。相同條件下殘余癌+微泡+超聲+TK/GCV組癌細胞存活率最低(P<0.05),僅為(43.16±3.18)%,且TK蛋白的表達明顯高于其他各組(P均<0.05)。結(jié)論低強度超聲聯(lián)合載HSV1-TK/GCV自殺基因陽離子微泡對高強度聚焦... 

【文章來源】:中國介入影像與治療學. 2017,14(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料與儀器
    1.2 SMCC-7721細胞培養(yǎng)與處理
    1.3 建立HIFU輻照殘癌細胞模型
    1.4 質(zhì)粒DNA提取及陽離子微泡制取
    1.5 不同濃度前藥GCV細胞毒性檢測
    1.6 超聲介導載基因陽離子微泡轉(zhuǎn)染細胞及殺傷效應(yīng)觀察
    1.7 Western Blot檢測各組TK蛋白表達
    1.8 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 HIFU輻照細胞懸液的時間與溫度、急性殺傷率
    2.2 載基因微泡
    2.3 不同濃度前藥GCV的細胞毒性
    2.4 低強度超聲聯(lián)合載HSV1-TK/GCV陽離子微泡對殘癌細胞的殺傷效應(yīng)
    2.5 TK蛋白表達
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]診斷超聲介導微泡提高肝纖維化通透性及促進基因傳遞[J]. 楊丹,陳禮波,張莉,高云華,譚開彬.  中國醫(yī)學影像技術(shù). 2016(06)
[2]超聲微泡造影劑介導基因轉(zhuǎn)染的研究進展[J]. 沈宇宙,劉俐.  中國介入影像與治療學. 2016(06)
[3]對比觀察脂質(zhì)納泡與微泡在高強度聚焦超聲消融兔肝中的增效作用[J]. 姚元志,王志剛,楊珂,李攀,周璇,徐芬芬,王琦,王冬.  中國介入影像與治療學. 2015(08)
[4]載藥超聲微泡研究進展[J]. 楊世艷,何兵,李明星.  中國中西醫(yī)結(jié)合影像學雜志. 2015(01)
[5]KDR啟動子驅(qū)動的CD/TK雙自殺基因聯(lián)合survivin基因干擾抑制肝癌細胞生長的體內(nèi)研究[J]. 楊六成,吳凱,黃宗海,徐帥,王健俊,趙海軍.  中國普通外科雜志. 2015(01)
[6]高強度聚焦超聲不完全消融對體外培養(yǎng)肝癌細胞的影響[J]. 張映林,陳蛟,吳涯昆,張文鋒,周世驥,李生偉.  第三軍醫(yī)大學學報. 2015(03)
[7]一種載基因陽離子微泡的制備及與SonoVue的對比研究[J]. 楊未曉,王翔,楊丹,譚開彬,劉平,高云華.  中國超聲醫(yī)學雜志. 2013 (04)
[8]HIFU治療肝臟惡性腫瘤的臨床觀察[J]. 王琨,劉魯明,孟志強,周振華,陳顥,王伯華,陳震,林鈞華.  腫瘤. 2008(10)



本文編號:3423290

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