發(fā)布時間：2021-09-22 11:44

　　目的探究Twinfilin-1（Twf-1）基因?qū)9C2心肌細(xì)胞凋亡和增殖的影響。方法構(gòu)建Twf-1 siRNA、pCXN2-Flag空質(zhì)粒、pCXN2-Flag-h Twf-1過表達(dá)質(zhì)粒,將實驗用H9C2心肌細(xì)胞分為5組,即空白對照組、陰性對照組、Twf-1沉默組、Twf-1沉默+空質(zhì)粒組、Twf-1沉默+過表達(dá)Twf-1組,分別用空白試劑、Twf-1 siRNA慢病毒、Twf-1 siRNA慢病毒+pCXN2-Flag空質(zhì)粒、Twf-1 siRNA慢病毒+pCXN2-Flag-h Twf-1過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染H9C2心肌細(xì)胞。轉(zhuǎn)染72 h后,采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）檢測目的基因Twf-1表達(dá)情況,采用CCK8檢測不同組別心肌細(xì)胞增殖情況,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果熒光顯微鏡下可見慢病毒轉(zhuǎn)染48 h后,陰性對照組和Twf-1沉默組80%以上細(xì)胞均有綠色熒光標(biāo)記。與空白對照組和陰性對照組相比,Twf-1沉默組、Twf-1沉默+空質(zhì)粒組心肌細(xì)胞中Twf-1基因的表達(dá)水平及細(xì)胞增殖率均明顯降低（P<0.05）,心肌細(xì)胞凋亡率均明顯增加（P<0.05... 

【文章來源】：中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2020,18(23)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

H9C2心肌細(xì)胞慢病毒感染情況(×100)

RT-PCR結(jié)果顯示,進(jìn)行慢病毒轉(zhuǎn)染后,與空白對照組和陰性對照組相比,Twf-1沉默組、Twf-1沉默+空質(zhì)粒組心肌細(xì)胞中Twf-1基因的表達(dá)水平均明顯降低(P<0.05),Twf-1沉默+過表達(dá)Twf-1組心肌細(xì)胞中Twf-1基因的表達(dá)水平則明顯增加,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見圖2。2.3 各組心肌細(xì)胞增殖情況比較

流式細(xì)胞凋亡實驗結(jié)果顯示,與空白對照組和陰性對照組相比,Twf-1沉默組、Twf-1沉默+空質(zhì)粒組心肌細(xì)胞凋亡率均明顯增加(P<0.05),Twf-1沉默+過表達(dá)Twf-1組心肌細(xì)胞凋亡率與空白對照組和陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,且與Twf-1沉默組、Twf-1沉默+空質(zhì)粒組相比則明顯降低,組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見圖4、圖5。圖4 各組心肌細(xì)胞凋亡率比較

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]COX-2基因通過Notch信號通路介導(dǎo)心肌細(xì)胞過度凋亡的機制研究[J]. 李曉鵑,胡鵬,張凱.  南昌大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(06)
[2]miR-92a對H9C2心肌細(xì)胞增殖、凋亡及Wnt信號通路的影響[J]. 厲菁,袁義強,張宇,張華,張傳西,宣學(xué)習(xí),王明杰.  中國老年學(xué)雜志. 2018(10)
[3]GLP-1對AGEs誘導(dǎo)H9C2心肌細(xì)胞凋亡的保護作用研究[J]. 張軍,谷翔,黃問銀,張普華,殷嫦嫦,于歡,張義平,王麗麗,李衛(wèi)東.  中國藥理學(xué)通報. 2017(01)
[4]Sirtuin3減少心肌細(xì)胞鈣超載時細(xì)胞色素C的釋放并抑制細(xì)胞凋亡[J]. 葉璐,楊雙強.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(08)

碩士論文
[1]肌動蛋白結(jié)合蛋白Twinfilin-1在血管平滑肌細(xì)胞遷移中的作用及軟脈靈對Twinfilin-1的影響[D]. 高若男.福建醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號：3403705