高溫、低溫、干旱和高鹽等非生物脅迫是影響草坪種植和觀賞性的重要因素,因而非生物脅迫抗性及其機(jī)制一直是草坪草研究的重要內(nèi)容。結(jié)縷草屬（Zoysia Willd.）是我國重點開發(fā)的暖季型草種之一,具有抗旱、耐熱、耐鹽堿、抗病等特點,其抗逆性的分子機(jī)制有待深入研究。植物轉(zhuǎn)錄因子DREB（Dehydration responsive element binding）與多種非生物脅迫響應(yīng)密切相關(guān),通過激活多個抗逆相關(guān)基因的表達(dá)使植物獲得抗逆能力。結(jié)縷草DREB轉(zhuǎn)錄因子的功能尚未有系統(tǒng)的研究報道。本研究以日本結(jié)縷草’Meyer’（Zoysia japonica Steud.）為材料對DREB類轉(zhuǎn)錄因子基因ZjDREB1.4開展研究,主要研究結(jié)果如下:（1）ZjDREB1.4基因編碼區(qū)長681 bp,無內(nèi)含子,推測編碼226個氨基酸,含有一個AP2結(jié)構(gòu)域,其上下游具有DREB轉(zhuǎn)錄因子A-1亞組的典型特征序列。在禾本科植物DREB1同源基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹中,ZjDREB1.4基因?qū)儆谠谂拘椭参镏械玫竭x擇性擴(kuò)張的Ⅲa分支。根據(jù)qRT-PCR分析結(jié)果,ZjDREB1.4基因的表達(dá)受高溫、低溫和干旱脅迫誘導(dǎo)... 

【文章來源】：中央民族大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１研究技術(shù)流程圖??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗｔｈａｒｔ?ｏｆ?ｒｅｓｅａｒｃｈ??

Ｍ：?ＤＬ２０００Ｍａｒｋｅｒ；ａ：基因擴(kuò)增結(jié)果，１：模板為ｃＤＮＡ；２：模板為基因組ＤＮＡ；?ｂ：菌液ＰＣＲ結(jié)果：??＼－４：?ＺｊＤＲＥＢＵ?基面??結(jié)縷草冷基因編碼區(qū)全長為６８１個堿基，推測編碼２２６個氨基酸（圖２－２），??其中含量最高的兩種氨基酸分別是甘氨酸（Ｇｌｙ?３５．４％）和半胱氨酸（Ｃｙｓ?３５．１％），蛋白??分子式為Ｃｉ９０ｇＨ３１２ｉＮ６８１〇７８〇Ｓ２３９，相對分子量大小為２４．６ｋＤａ，等電點為４．９，不穩(wěn)定指數(shù)為??５０．６８?（＞４０），總平均疏水指數(shù)為０．９０７，推測為不穩(wěn)定的疏水性蛋白。ＮＣＢＩ保守結(jié)構(gòu)域??在線預(yù)測結(jié)果表明，該基因編碼的蛋白有一個保守的ＡＰ２結(jié)構(gòu)域（Ｅ－ＶａｌｕｅｉＳＡＳｅ－１１），在??其上、下游含有ＤＲＥＢ１類基因的特征性序列ＰＫＫＰＡＧＲＴＫＦＲＥＴＲＨ和ＤＳＡＷ，因而屬于??中的Ａ－１亞組。??１７??

?１Ｇ０?１５０??圖２－３?ＺｊＤＲＥＢ１．４蛋白二級結(jié)構(gòu)預(yù)測??Ｆｉｇ．?２－３?Ｔｈｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＺｊＤＲＥＢ?１．４??橫坐標(biāo)代表氨基酸所在位置；長豎線為ａ－螺旋，中長豎線為０－折疊片，短豎線為無規(guī)則卷曲。??Ｃ?端Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?Ｖ???ｊ?Ｎ?端Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｉ??圖２－４?ＺｊＤＲＥＢ１．４蛋白三級結(jié)構(gòu)模型預(yù)測??Ｆｉｇ．?２－４?Ｔｈｅ?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｔｅｒｔｉａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＺｊＤＲＥＢ１．４??虛線框內(nèi)為ＡＰ２結(jié)構(gòu)域??３．２?ＺｊＤＲＥＢ１．４的系統(tǒng)進(jìn)化分析??為進(jìn)一步研究ＺｙＴ）狀５／．？／在ＤＲＥＢ１家族中的系統(tǒng)進(jìn)化地位，按照ＤＲＥＢ１組的分類特??征［９３】，篩選出來自于玉米、水稻、高梁、小米、小麥、大麥和短柄草等７種植物（表２－２）??的ＤＲＥＢ１同源基因的氨基酸序列，利用ＭＥＧＡ７．０軟件對包括基因在內(nèi)的９１??個基因的全長序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。如圖２－５所示，禾本科植物中的ＤＲＥＢ１同源物被分為??１１個單系分支，１０個分支與Ｂａｄａｗｉ文章中的分類一致，其中水稻的和??ＣＷＭ五５Ａ７基因與玉米ＺｍＤ狀５７．６、高粱劭Ｃ５Ｆ９基因共同組成第Ｈ個分支，名為ＣＢＦ??Ｖ。狀５／．＊／基因被分配到ＤＲＥＢ１家族的Ｉｌｉａ分支中


本文編號：3400939