日本三角渦蟲（Dugesia japonica）隸屬扁形動物門（Platyhelminthes）,渦蟲綱（Turbellaria）,在動物系統(tǒng)演化中占有重要地位,并且具有極強的損傷修復及再生能力。但到目前為止,其再生機制并不清楚。本實驗利用生物信息學、原位雜交、RNAi以及qPCR技術(shù),分析了DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3推導的蛋白結(jié)構(gòu)、表達模式和功能,結(jié)果如下:利用生物信息學分析了DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3推導的氨基酸的結(jié)構(gòu)和進化地位,結(jié)果顯示:DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3屬于SOXB亞家族且是不穩(wěn)定的親水性蛋白。DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3不僅含有SOX家族高度保守的HMG-box區(qū)域和標志性基序RPMNAFMVW,而且在HMG-box區(qū)域后面還包括8個SoxB亞家族的特征性序列標簽。其中,DjSoxB2的特征基序與高等脊椎動物同源性較高且包含了一部分SoxP結(jié)構(gòu)域。整體原位雜交及再生過程中qPCR結(jié)果顯示:DjSoxB1、DjSoxB2和DjSoxB3基因在整體渦蟲身體兩側(cè)的實質(zhì)組織和再生片段的再生芽基處有較... 

【文章來源】：河南師范大學河南省

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

渦蟲中樞神經(jīng)結(jié)構(gòu)模式圖（右側(cè)為眼點放大圖，引自Lapanetal，2012）

圖 1-2 渦蟲腦再生的前期過程Fig 1-2 The early process of brain regeneration in planarians蟲再生研究進展生現(xiàn)象雖然在自然界廣泛存在，但主要存在一些低等的無脊椎動物，如水螅被可以再生出完整的個體。脊椎動物包括人類在內(nèi)僅能實現(xiàn)在一定條件下某些器，如蠑源(newts)斷肢后具有再生能力，當人類肝臟被部分切除后依靠殘存的肝可以再生[11]。雖然發(fā)現(xiàn)許多動物也有或強或弱的再生能力，但到目前為止，沒一類動物能與渦蟲的再生能力相比[12]。渦蟲再生的主要原因是其體內(nèi)存在多能干細胞（neoblasts）[13]，并且均勻分布于除中樞神經(jīng)系統(tǒng)和咽以外的所有中。與整體渦蟲相比，再生渦蟲的傷口處產(chǎn)生傷口信號誘導 neoblasts 的增殖和一步遷移至損傷部位[14]。和其它細胞相比，neoblasts 的主要特征是：體積較形，細胞核很大，細胞質(zhì)少且有許多游離核糖體，而這些特征與脊椎動物干細

圖 2-1 實驗技術(shù)路線Figure 2-1 Technical route in this experimental角渦蟲總 RNA 的提取 條健康的日本三角渦蟲于 20℃的恒溫培養(yǎng)箱中，饑餓處理 2 渦蟲用于總 RNA 的提取。對總 RNA 進行電泳和 OD 值檢測條帶無降解，無拖帶；OD 值介于 1.8-2.2 之間）RNA 進行反轉(zhuǎn)錄 cDNA 質(zhì)量。瓊脂糖凝膠電泳后，能出現(xiàn)單一清晰、大小正確帶為可用模板。具體步驟見程方方博士論文[54]。NA 模板、3′-cDNA 模板以及一般反轉(zhuǎn)錄模板的制備方法參考程方方博士論文[54]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Sox基因家族特點及其功能[J]. 曹慧慧,王昌留.  魯東大學學報(自然科學版). 2011(01)

博士論文
[1]日本三角渦蟲Neurotrophin信號通路關(guān)鍵基因及flotillins基因的克隆及功能分析[D]. 程方方.河南師范大學 2016
[2]離子液體溴化1-辛基-3-甲基咪唑（[C8mim]Br]）對日本三角渦蟲的毒性作用研究[D]. 石長應(yīng).河南師范大學 2015

碩士論文
[1]日本三角渦蟲Spsb基因的克隆及表達分析[D]. 陳靜.河南師范大學 2016



本文編號：3399227