大白菜（Brassica rapa ssp.pekinensis）是中國種植面積最大的蔬菜作物。葉片是它的主要食用部分,而且葉片也是白菜進(jìn)行光合作用的場所,所以對大白菜尤其是葉片的多種性狀進(jìn)行研究就顯得尤為重要。隨著白菜基因組序列的測序完成,為白菜功能基因組學(xué)的研究提供了大量可靠信息（Wang et al.,2011）,葉色突變體越來越多的應(yīng)用于對基因功能的研究中,本文以通過EMS誘變所獲得了一個大白菜葉片黃化突變體lcm2,在確定其穩(wěn)定遺傳后,對突變體與野生型的生理特性進(jìn)行分析,利用改良的Mutmap技術(shù),確定了突變位點,并克隆了相應(yīng)的突變基因lcm2,利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),對突變位點進(jìn)行進(jìn)一步的驗證,找到可能參與葉片黃化的相關(guān)代謝通路,主要研究結(jié)果如下:1.大白菜黃化突變體lcm2在整個生長階段均表現(xiàn)出葉色黃化這一特征,對二者體內(nèi)的光合色素進(jìn)行測定,發(fā)現(xiàn)lcm2中葉綠素以及類胡蘿卜素含量顯著降低,但不同時期突變體植株的干重較同時期的野生型相比能稍微偏低一些,并沒有出現(xiàn)特別明顯的光合能力減弱,能正常生長發(fā)育。2.對lcm2和FT植株的葉綠體結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,lcm2葉綠體發(fā)育異常,形狀不規(guī)... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大白菜黃化突變體‘lcm1’和野生型‘FT’的外在形態(tài)觀察圖中a、b分別為黃化突變體‘lcm2’與野生型‘FT’

光適應(yīng)下的最小熒光Fo'105.31±6.97 72.67±4.87*光適應(yīng)下的最大熒光Fm'250.76±4.36 179.81±7.21*暗適應(yīng)下 PSII 最大光化學(xué)效率Fv/Fm0.84±0.03 0.84±0.10光適應(yīng)下 PSII 最大光化學(xué)效率Fv'/Fm'0.65±0.18 0.60±0.24光適應(yīng)下 PSII 實際光化學(xué)效率ФPSII0.49±0.02 0.49±0.14光化學(xué)淬滅系數(shù)QP0.70±0.01 0.63±0.02非光化學(xué)淬滅系數(shù)NPQ0.65±0.03 0.54±0.04*注：* 表示t檢驗顯著性水平＜0.05，**表示顯著性水平＜0.01。Note: * indicates t-test significance level <0.05, ** indicates significance level <0.01.2.2.5 黃化突變體 lcm2 與野生型 FT 葉綠體超微結(jié)構(gòu)如圖 2-3 所示，野生型和突變體的葉綠體超微結(jié)構(gòu)差異明顯。左邊野生型 FT 中葉綠體發(fā)育良好，類囊體堆積緊密，具有明顯的基粒結(jié)構(gòu)，但是突變體 lcm2 類囊體持為單個的原片層體（prolamellar body），無明顯基粒結(jié)構(gòu)存在。

章 大白菜葉片黃化突變基因的定位及候選基因中在該基因的 2801192 這一位點上發(fā)生單ATG,其編碼的氨基酸從 V<->M。cm2 克隆測序驗證周圍特異性引物，結(jié)合高保真 Taq 擴(kuò)增，位點（圖 3-1），發(fā)現(xiàn)其克隆產(chǎn)物與野生突變體之間真實存在，驗證了之前的pecific PCR）技術(shù)對定位群體單株進(jìn)行基因型均為 AA，進(jìn)一步驗證定位結(jié)果。

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本文編號：3387472