TCR-T和CAR-T細胞作為一種新型細胞藥物,當前已在腫瘤過繼免疫治療（adoptive cell therapy,ACT）臨床試驗中大量應(yīng)用。其在體外對患者T細胞進行基因修飾,使之成為具有新特性功能的自體細胞藥物,再回輸至患者體內(nèi),從而實現(xiàn)對腫瘤細胞的特異性殺傷。然而,這種治療方式在發(fā)揮作用的同時可能出現(xiàn)不良反應(yīng),目前臨床已經(jīng)觀察到TCR-T和CAR-T在治療過程中可能會出現(xiàn)細胞因子風暴、非腫瘤靶向的脫靶效應(yīng)等不良反應(yīng)。同時由于細胞藥物在體內(nèi)具有增殖能力,不像傳統(tǒng)治療藥物在體內(nèi)會被代謝降解,因此其在體內(nèi)發(fā)生不良反應(yīng)的程度不可預(yù)估。如果細胞藥物在人體內(nèi)具有人為可控的自殺基因安全開關(guān),則無疑加大了其在臨床使用中的安全性與可控性。HSV-TK是一種單純皰疹病毒型胸苷激酶,前藥更昔洛韋（ganciclovir,GCV）與之結(jié)合后產(chǎn)生的三磷酸產(chǎn)物可抑制細胞DNA復(fù)制,從而誘導(dǎo)細胞凋亡,可作為自殺基因。但HSV-TK完全發(fā)揮作用時間較長,需72 h,且藥物GCV使用存在局限性。同時,HSV-TK是一種胞內(nèi)蛋白,將其導(dǎo)入細胞后無法直接對陽性細胞進行篩選,因此需要共同連接一個胞外蛋白作為篩選標記。... 

【文章來源】：西南交通大學四川省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CAR-T治療的副反應(yīng)[12]

圖 1-1 CAR-T 治療的副反應(yīng)[12]1.2 自殺基因研究現(xiàn)狀自殺基因技術(shù)是通過基因工程技術(shù)使細胞攜帶自殺基因，通過口服或靜脈輸注的方式給予外源藥物，使基因修飾的細胞在藥物作用下進行自我清除的一種策略（圖 1-2）。將自殺基因預(yù)先導(dǎo)入過繼免疫療法使用的細胞藥物中，可使其在發(fā)生脫靶反應(yīng)等不良反應(yīng)時進行自我清除，防止正常細胞或組織受到損傷，從而保證過繼免疫治療的安全性[15]。自殺基因的作用機制主要分為三種：代謝型、二聚化結(jié)構(gòu)誘導(dǎo)型、單克隆抗體介導(dǎo)型[16]。研究中常用的自殺基因包括單純皰疹病毒型胸苷激酶（herpes simplex virusthymidine kinase，HSV-TK）基因、可誘導(dǎo)的 Caspase9（inducible Caspase9，iCasp9）[17,18]、CD20[19]、可誘導(dǎo)的 FAS（inducible FAS，iFas）[20]、 c-myc[21]， EGFR[22]等。

西南交通大學碩士研究生學位論文 -TK酶（thymidine kinase，TK）存在于哺乳動物細胞、皰疹病毒、病毒型胸苷激酶 HSV-TK 對特定核苷類似物的親和力是哺乳動4]，因此其基因可作為自殺基因應(yīng)用于哺乳動物細胞中。1986 年 HSV-TK 對前藥更昔洛韋（ganciclovir，GCV）敏感，并驗證了 H細胞的殺傷作用。HSV-TK 為胞內(nèi)蛋白，在加入脫氧鳥苷酸類似K 可使 GCV 磷酸化為有毒的三磷酸化產(chǎn)物，成為 dGTP 的競配，抑制 DNA 鏈延長，進而導(dǎo)致細胞死亡[15]（圖 1-3）。因此，期依賴性自殺基因，只有被轉(zhuǎn)染的細胞在增殖狀態(tài)下才對前藥除目的[26]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]嵌合抗原受體T細胞療法的不良反應(yīng)與治療[J]. 胡冠華,曾慧敏,張樂萍.  臨床兒科雜志. 2017(05)
[2]基于2A肽策略構(gòu)建多基因表達載體的研究進展[J]. 張歡,黃思超,蔡紹暉.  中國生物工程雜志. 2013(01)
[3]CD20分子與靶向治療[J]. 劉銀星,楊純正.  生命的化學. 2003(01)



本文編號：3386073