多重實(shí)時(shí)熒光PCR快速檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆
發(fā)布時(shí)間:2021-08-31 10:41
采用多重實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),對(duì)大豆篩選基因35S啟動(dòng)子(cauliflower mosaic virus,CaMV 35S)、NOS終止子(nopaline synthase,NOS)和內(nèi)源基因Lectin設(shè)計(jì)合成了多對(duì)檢測(cè)引物和探針,在篩選各基因合適的檢測(cè)引物和探針的基礎(chǔ)上,摸索引物組合和擴(kuò)增條件,最終確定合適的探針引物組合和試驗(yàn)條件,建立轉(zhuǎn)基因大豆快速初篩技術(shù)。該方法可在1 h內(nèi)同時(shí)完成對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆3個(gè)基因片段的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)。方法特異性強(qiáng),靈敏度高,可用于大豆轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測(cè),大大提高檢驗(yàn)效率,可為消費(fèi)者的食品安全及我國(guó)大豆的進(jìn)出口檢驗(yàn)提供有效的技術(shù)支持。
【文章來(lái)源】:江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(18)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料與試劑
1.2 儀器與設(shè)備
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 基因組DNA的提取
1.3.2 引物和探針的設(shè)計(jì)
1.3.3 引物及探針特異性測(cè)試試驗(yàn)
1.3.4 三重?zé)晒釶CR反應(yīng)體系及程序
1.3.5 三重?zé)晒釶CR檢測(cè)體系的靈敏度試驗(yàn)
2 結(jié)果與分析
2.1 引物探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.1 CaMV 35S基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.2 大豆內(nèi)源Lectin基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.3 NOS終止子基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.2 三重實(shí)時(shí)熒光PCR體系擴(kuò)增圖結(jié)果
2.3 多重PCR體系的靈敏度測(cè)定
3 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三種轉(zhuǎn)基因大豆品系的多重?zé)晒釶CR檢測(cè)體系建立[J]. 閆偉,龍麗坤,李蔥蔥,夏蔚,董立明,李飛武. 大豆科學(xué). 2019(05)
[2]野生大豆?fàn)I養(yǎng)成分及生物活性因子的研究進(jìn)展[J]. 荊常亮,周金輝,張成省,周三. 大豆科學(xué). 2019(04)
[3]可視化膜芯片檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆的研究[J]. 祖新,徐軼飛,李羽翡,段鵬,范鵬飛,楊陶麗薇. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2019(11)
[4]轉(zhuǎn)基因大豆RPA檢測(cè)技術(shù)的建立及應(yīng)用[J]. 竇雯,李尤,逯欣宇,錢雪梅,沈丹宇. 生物技術(shù)通報(bào). 2019(05)
[5]豆制品中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)的研究進(jìn)展[J]. 孟靜,孫瀟慧,鐘立霞,霍勝楠. 大豆科學(xué). 2019(01)
[6]中美轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管體系對(duì)比[J]. 康宇立,朱濤,麻曉春. 生命世界. 2018(09)
[7]多重串聯(lián)式PCR基因碟片技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆GTS 40-3-2[J]. 魏霜,周廣彪,劉津,付偉,張志強(qiáng),吳希陽(yáng). 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2018(02)
[8]國(guó)際轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)中國(guó)大豆產(chǎn)業(yè)及其期貨市場(chǎng)的影響[J]. 鄭金英,翁欣. 亞太經(jīng)濟(jì). 2015(05)
[9]大豆微量成分的特殊營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[J]. 郝景波. 黑龍江糧食. 2015(09)
博士論文
[1]我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品安全政府規(guī)制研究[D]. 王宇紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
碩士論文
[1]中國(guó)大豆進(jìn)口依存度影響因素及對(duì)策研究[D]. 王雪琴.武漢輕工大學(xué) 2018
本文編號(hào):3374752
【文章來(lái)源】:江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,48(18)
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料與試劑
1.2 儀器與設(shè)備
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 基因組DNA的提取
1.3.2 引物和探針的設(shè)計(jì)
1.3.3 引物及探針特異性測(cè)試試驗(yàn)
1.3.4 三重?zé)晒釶CR反應(yīng)體系及程序
1.3.5 三重?zé)晒釶CR檢測(cè)體系的靈敏度試驗(yàn)
2 結(jié)果與分析
2.1 引物探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.1 CaMV 35S基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.2 大豆內(nèi)源Lectin基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.1.3 NOS終止子基因擴(kuò)增用引物和探針特異性檢測(cè)結(jié)果
2.2 三重實(shí)時(shí)熒光PCR體系擴(kuò)增圖結(jié)果
2.3 多重PCR體系的靈敏度測(cè)定
3 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三種轉(zhuǎn)基因大豆品系的多重?zé)晒釶CR檢測(cè)體系建立[J]. 閆偉,龍麗坤,李蔥蔥,夏蔚,董立明,李飛武. 大豆科學(xué). 2019(05)
[2]野生大豆?fàn)I養(yǎng)成分及生物活性因子的研究進(jìn)展[J]. 荊常亮,周金輝,張成省,周三. 大豆科學(xué). 2019(04)
[3]可視化膜芯片檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆的研究[J]. 祖新,徐軼飛,李羽翡,段鵬,范鵬飛,楊陶麗薇. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2019(11)
[4]轉(zhuǎn)基因大豆RPA檢測(cè)技術(shù)的建立及應(yīng)用[J]. 竇雯,李尤,逯欣宇,錢雪梅,沈丹宇. 生物技術(shù)通報(bào). 2019(05)
[5]豆制品中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)的研究進(jìn)展[J]. 孟靜,孫瀟慧,鐘立霞,霍勝楠. 大豆科學(xué). 2019(01)
[6]中美轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管體系對(duì)比[J]. 康宇立,朱濤,麻曉春. 生命世界. 2018(09)
[7]多重串聯(lián)式PCR基因碟片技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆GTS 40-3-2[J]. 魏霜,周廣彪,劉津,付偉,張志強(qiáng),吳希陽(yáng). 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2018(02)
[8]國(guó)際轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)中國(guó)大豆產(chǎn)業(yè)及其期貨市場(chǎng)的影響[J]. 鄭金英,翁欣. 亞太經(jīng)濟(jì). 2015(05)
[9]大豆微量成分的特殊營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[J]. 郝景波. 黑龍江糧食. 2015(09)
博士論文
[1]我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品安全政府規(guī)制研究[D]. 王宇紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
碩士論文
[1]中國(guó)大豆進(jìn)口依存度影響因素及對(duì)策研究[D]. 王雪琴.武漢輕工大學(xué) 2018
本文編號(hào):3374752
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