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水稻白綠葉基因WGL2的克隆與功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-21 21:43
  質(zhì)體核糖體蛋白(PRPs)在葉綠體發(fā)育和光合作用關(guān)鍵蛋白的翻譯中起著重要作用。PRPs在許多植物中得到了廣泛的研究,但由于PRP在植物中的同源基因很多且涉及的領(lǐng)域廣泛,因此相關(guān)的分子機(jī)理仍不甚清楚。在本研究中,我們首次在甲烷磺酸乙酯(EMS)突變體庫(kù)中獲得了一個(gè)新的水稻突變體白綠葉2號(hào)(wgl2,white green leaf 2)。wgl2突變體從發(fā)芽到三葉期均表現(xiàn)為白化表型,隨后逐漸轉(zhuǎn)綠。與白化表型一致,wgl2突變體的Chl a,Chl b和Car含量顯著低于野生型(NPB)。此外,wgl2的總?cè)~綠素含量和Chl a/b的比例也遠(yuǎn)低于野生型。wgl2突變體中幾乎沒有完整結(jié)構(gòu)的葉綠體,葉綠體內(nèi)部也被嚴(yán)重破壞,很難找到完整的類囊體片層或垛疊良好的基粒,取而代之的是大量橢圓形囊泡結(jié)構(gòu)。遺傳分析表明,wgl2受單個(gè)隱性核基因控制;趫D位克隆和wgl2的DNA測(cè)序分析顯示,在LOCOs03g55930的第一個(gè)外顯子中發(fā)現(xiàn)一個(gè)單核苷酸替換(G到T),導(dǎo)致第92個(gè)甘氨酸被替換為纈氨酸,但沒有造成蛋白三維結(jié)構(gòu)的改變;パa(bǔ)和靶向缺失實(shí)驗(yàn)證實(shí),WGL2中的點(diǎn)突變是造成wgl... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

水稻白綠葉基因WGL2的克隆與功能研究


突變體wgl2和NPB的表型A-C:野生型(WT)和wgl2植株的在苗期(bar=2cm),分蘗期和抽穗期(bar=10cm)的形態(tài)

葉綠體,電子顯微鏡,野生型,微觀結(jié)構(gòu)


中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析143.2OsWGL2影響葉綠體發(fā)育突變體wgl2從萌發(fā)開始就出現(xiàn)了非常嚴(yán)重的白化,直到三葉期后才開始逐步復(fù)綠,葉綠素含量顯著降低,因此我們推測(cè)該突變可能對(duì)葉綠體的發(fā)育也造成了一定的影響,為了檢查wgl2中葉綠體的發(fā)育情況,我們用透射電子顯微鏡對(duì)三葉期野生型和wgl2幼苗的葉綠體超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察。野生型葉片中可觀察到很多正常的葉綠體,有密集且結(jié)構(gòu)良好的基粒和類囊體。相比之下,wgl2突變體中幾乎沒有完整結(jié)構(gòu)的葉綠體,葉綠體內(nèi)部也被嚴(yán)重破壞,很難找到完整的類囊體片層或垛疊良好的基粒,取而代之的是大量橢圓形囊泡結(jié)構(gòu)(圖3.2)。這些結(jié)果表明,wgl2葉綠體的發(fā)育出現(xiàn)了嚴(yán)重缺陷,從而造成突變體葉片白化的表型。圖3.2用透射電子顯微鏡觀察野生型(WT)和wgl2葉綠體的微觀結(jié)構(gòu)。Cp:葉綠體,G:基粒。Figure3.2Microstructuresofwildtype(WT)andwgl2chloroplastsviewedwithtransmissionelectronmicroscopy.Cp:chloroplast,G:grana.

基因,染色體,中國(guó)農(nóng)業(yè),科學(xué)院


中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第三章實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析16圖3.3OsWGL2基因的圖位克隆A:WGL2基因初定位到3號(hào)染色體(Chr.3)。B:使用所示標(biāo)記將WGL2基因座精細(xì)定位至99kb的物理區(qū)間。C:WGL2中基因組和蛋白質(zhì)水平的突變位點(diǎn)。Figure3.3Map-basedcloningandidentificationofthemutationsiteinwgl2A:TheWGL2locuswasinitiallymappedtoChromosome3(Chr.3).B:TheWGL2locuswasfine-mappedtoaphysicalintervalof99kbusingtheindicatedmarkers.C:MutationsiteinWGL2atthegenomeandproteinlevels.

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Plastid ribosomal protein LPE2 is involved in photosynthesis and the response to C/N balance in Arabidopsis thaliana[J]. Xiaoxiao Dong,Sujuan Duan,Hong-Bin Wang,Hong-Lei Jin.  Journal of Integrative Plant Biology. 2020(09)



本文編號(hào):3356386

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