棉花作為我國主要經(jīng)濟作物之一,受干旱、鹽堿化影響尤為嚴重,限制了棉花的產(chǎn)量。近年來隨著基因工程的迅速崛起,打破了常規(guī)雜交育種方式,顯著的縮短了新品種培育的周期,成為育種的重要手段。ERF（Ethylene responsive factor）類轉(zhuǎn)錄因子和棉籽糖家族寡糖（Raffinose familyoligosaccharides,RFOs）皆存在于植物體內(nèi),當植物受到非生物脅迫時會誘導ERF類轉(zhuǎn)錄因子的表達;而RFOs是一類低聚糖小分子,它可以調(diào)節(jié)植物滲透壓從而維持植物體內(nèi)滲透平衡。肌醇半乳糖苷合成酶（Gols）是RFOs合成的關鍵酶基因,在干旱、高鹽以及高溫脅迫下會誘導表達從而抵御非生物脅迫。從抗旱沙生植物胡楊和海水潮汐帶紅樹林植物秋茄中分別分離出Pe DREB2a和Kc ERF基因,進而構建出含有Kan抗性的雙價載體,繼而進行棉花轉(zhuǎn)化。除此之外還構建了Gh Gols基因,并將其連接到含有Bar抗性標記基因的表達載體并轉(zhuǎn)化到擬南芥中進行功能驗證。（1）從秋茄以及胡楊當中分別克隆出抗旱耐鹽轉(zhuǎn)錄因子Kc ERF和Pe DREB2a,并構建雙價表達載體。以國欣-3和晉棉-12為受體材料... 

【文章來源】：西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

耐寒耐鹽轉(zhuǎn)基因棉花新材料的創(chuàng)制路線

圖 1-1 耐寒耐鹽轉(zhuǎn)基因棉花新材料的創(chuàng)制路線Fig. 1-1 The creation route of new material for drouGht and salt resistance transgenic cotton.

圖 2-1 GhGosl2 基因結(jié)構域模塊分析Figure 2-1 Analysis of GhGosl2 gene domain module2.3.2Gols2 基因進化樹構建棉花 Gols 基因通過序列號從棉花基因組網(wǎng)站查找，總共獲得 12 條與擬南芥 G基因相似的序列，利用 DNAman5.0 進行序列之間同源性比較，構建進化樹。通過研表明，GhGols 基因存在于四條染色體上，總共含有 12 個 Gols 基因。根據(jù)對擬南芥相似性比較，可以將棉花中肌醇半乳糖苷合成酶基因分為 GhGols1 和 GhGols2 兩類其中 GhGols1131、GhGols1185、GhGols1285 和 GhGols0980 屬于 GhGols1 類GhGols1811、GhGols1898、GhGols1186、GhGols2171、GhGols0935、GhGols1561GhGols2130 和 GhGols2336 屬于 GhGols2 類。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn) Gols 基因在擬南芥中總含有 7 個同源基因，根據(jù)基因的功能又將擬南芥中 Gols 基因分為 AtGols1、AtGolsAtGols3 三類。AtGols1 和 AtGols2 可以分為一類，主要受干旱、鹽、高溫和 ABA 進


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