綠盲蝽八個普通氣味受體基因的克隆及功能鑒定
發(fā)布時間:2021-08-13 00:26
【目的】本研究旨在克隆綠盲蝽Apolygus lucorum的氣味受體基因,明確這些氣味受體基因在綠盲蝽成蟲不同組織中的表達(dá)水平及對主要寄主植物揮發(fā)物的電生理反應(yīng),為揭示綠盲蝽對寄主植物的識別機(jī)制提供理論基礎(chǔ)!痉椒ā吭诰G盲蝽成蟲觸角轉(zhuǎn)錄組測序與分析的基礎(chǔ)上,通過PCR技術(shù)克隆得到8個具有完整ORF的氣味受體基因序列。用qPCR研究這8個基因在雌雄成蟲不同組織(觸角、無觸角的頭、胸、腹、足和翅)中的表達(dá)水平。然后通過爪蟾卵母細(xì)胞體外表達(dá)結(jié)合雙電極電壓鉗技術(shù)測試這些氣味受體對56種氣味化合物的電生理反應(yīng)。【結(jié)果】克隆得到了綠盲蝽8個氣味受體基因AlucOR9,AlucOR16,AlucOR38,Aluc OR53,AlucOR55,AlucOR56,AlucOR57和AlucOR58的cDNA全長序列(GenBank登錄號:MN905538-MN905545)。這些氣味受體含有7個跨膜結(jié)構(gòu)域,且N末端位于胞內(nèi),C末端位于胞外,符合昆蟲氣味受體的典型特征。qPCR結(jié)果表明,這8個氣味受體基因均在綠盲蝽成蟲觸角中高表達(dá),而在其他組織中低表達(dá),其中除AlucOR38外的其他7個氣味受體基因在雌...
【文章來源】:昆蟲學(xué)報. 2020,63(09)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:11 頁
【部分圖文】:
綠盲蝽ORs氨基酸序列的比對和跨膜區(qū)域的預(yù)測
利用q PCR方法檢測8個氣味受體基因在綠盲蝽雌、雄成蟲不同組織的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果表明,這8個氣味受體基因均在成蟲觸角中高表達(dá);除Aluc OR38外,其他7個氣味受體基因在雌成蟲觸角中的表達(dá)量顯著高于在雄成蟲中的(P<0.05)(圖2)。2.3 8個綠盲蝽氣味受體的功能分析
在爪蟾卵母細(xì)胞中分別將8個AlucOR分別與AlucOrco進(jìn)行共表達(dá),用雙電極電壓鉗系統(tǒng)記錄AlucOR/AlucOrco對共計56種測試氣味化合物的電生理反應(yīng)。電壓鉗記錄結(jié)果顯示,AlucOR57/AlucOrco對其中15種氣味化合物(苯甲醛、氧化石竹烯、庚醛、反-2-己烯醛、乙酸苯甲酯、桃金娘烯醛、4-乙基苯甲醛、乙酸壬酯、四氫芳樟醇、十三烷、反-3-己烯醇、2-丙烯酸丁酯、丙酸丁酯、乙酸辛酯和乙酸戊酯)有反應(yīng)(圖3),對其余的氣味化合物無反應(yīng);其他7個綠盲蝽氣味受體對56種測試氣味化合物均無反應(yīng)。3 討論
本文編號:3339365
【文章來源】:昆蟲學(xué)報. 2020,63(09)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:11 頁
【部分圖文】:
綠盲蝽ORs氨基酸序列的比對和跨膜區(qū)域的預(yù)測
利用q PCR方法檢測8個氣味受體基因在綠盲蝽雌、雄成蟲不同組織的轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果表明,這8個氣味受體基因均在成蟲觸角中高表達(dá);除Aluc OR38外,其他7個氣味受體基因在雌成蟲觸角中的表達(dá)量顯著高于在雄成蟲中的(P<0.05)(圖2)。2.3 8個綠盲蝽氣味受體的功能分析
在爪蟾卵母細(xì)胞中分別將8個AlucOR分別與AlucOrco進(jìn)行共表達(dá),用雙電極電壓鉗系統(tǒng)記錄AlucOR/AlucOrco對共計56種測試氣味化合物的電生理反應(yīng)。電壓鉗記錄結(jié)果顯示,AlucOR57/AlucOrco對其中15種氣味化合物(苯甲醛、氧化石竹烯、庚醛、反-2-己烯醛、乙酸苯甲酯、桃金娘烯醛、4-乙基苯甲醛、乙酸壬酯、四氫芳樟醇、十三烷、反-3-己烯醇、2-丙烯酸丁酯、丙酸丁酯、乙酸辛酯和乙酸戊酯)有反應(yīng)(圖3),對其余的氣味化合物無反應(yīng);其他7個綠盲蝽氣味受體對56種測試氣味化合物均無反應(yīng)。3 討論
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