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啶氧菌酯降解菌的篩選鑒定及其降解基因克隆

發(fā)布時(shí)間:2021-08-12 03:15
  啶氧菌酯(Picoxystrobin)是一種人工合成的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑,具有高效廣譜和適用范圍廣等特點(diǎn)。隨著啶氧菌酯使用范圍的擴(kuò)大和使用量的增長,生態(tài)環(huán)境中啶氧菌酯的殘留量存在快速增加的風(fēng)險(xiǎn),其對生態(tài)環(huán)境的潛在威脅也成為關(guān)注的熱點(diǎn)。微生物降解具有安全和低成本等優(yōu)點(diǎn),是消除生態(tài)環(huán)境中甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑等農(nóng)藥殘留最具有應(yīng)用前景的技術(shù)之一。采用啶氧菌酯為唯一碳源的培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)方法,篩選獲得一株高效降解啶氧菌酯的降解菌PY3,生理生化鑒定結(jié)合16S rRNA系統(tǒng)發(fā)育分析表明,菌株P(guān)Y3屬沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustirs)。菌株P(guān)Y3的最佳降解條件均為35℃和pH 6.0。在最佳降解條件下培養(yǎng)11 d,菌株P(guān)Y3對50 mg/L啶氧菌酯的降解率達(dá)72.0%。采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測定降解菌降解啶氧菌酯的中間代謝產(chǎn)物,推導(dǎo)的菌株P(guān)Y3降解啶氧菌酯的途徑,包括苯環(huán)和N雜環(huán)之間氧橋鍵斷裂后酯化,以及苯環(huán)和N雜環(huán)開環(huán)反應(yīng)。采用酯酶活性染色,結(jié)合飛行時(shí)間質(zhì)譜,從菌株P(guān)Y3總蛋白獲得了5個(gè)具有酯酶活性的降解酶肽段,根據(jù)紅假單胞菌屬細(xì)菌的基因組,采用PCR技術(shù)... 

【文章來源】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

啶氧菌酯降解菌的篩選鑒定及其降解基因克隆


甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑的降解途徑(引用自Balba,Hamdy,2007)

吸收光譜,菌株,色素,吸收光譜


第二章降解的篩癬鑒定及其降解特性19處有明顯的吸收峰,表明菌株P(guān)Y3的細(xì)胞內(nèi)有類胡蘿卜素和菌綠素存在[45]。圖2-1菌株P(guān)Y3的菌體色素吸收光譜Figure2-1AbsorptionspectrumofpigmentsofstrainPY32.2.1.3菌株16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析菌株P(guān)Y3擴(kuò)增的16SrRNA基因序列長度為1374bp(GenBank登錄號:MH997434),與沼澤紅假單胞菌的同源性最高。進(jìn)一步的系統(tǒng)發(fā)育分析表明(圖2-2),菌株P(guān)Y3與Rhodopseudomonaspalustris(KF926677)親緣關(guān)系較近,聚為一個(gè)亞簇。圖2-2PY3的16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育樹Figure2-2PhylogenetictreeofstrainPY316SrRNAsequence2.2.2菌株的最佳生長條件菌株P(guān)Y3在不同培養(yǎng)溫度和不同初始pH值條件下的生長結(jié)果表明(圖2-3,圖2-4),菌株P(guān)Y3在25-35℃、pH6-8范圍內(nèi)生長良好,最佳生長條件為pH6.0、25℃。2.2.3菌株的降解特性將菌株在不同溫度條件下培養(yǎng),其降解啶氧菌酯的結(jié)果(圖2-3)表明,菌

序列,序列,菌株,條件


第二章降解的篩癬鑒定及其降解特性19處有明顯的吸收峰,表明菌株P(guān)Y3的細(xì)胞內(nèi)有類胡蘿卜素和菌綠素存在[45]。圖2-1菌株P(guān)Y3的菌體色素吸收光譜Figure2-1AbsorptionspectrumofpigmentsofstrainPY32.2.1.3菌株16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析菌株P(guān)Y3擴(kuò)增的16SrRNA基因序列長度為1374bp(GenBank登錄號:MH997434),與沼澤紅假單胞菌的同源性最高。進(jìn)一步的系統(tǒng)發(fā)育分析表明(圖2-2),菌株P(guān)Y3與Rhodopseudomonaspalustris(KF926677)親緣關(guān)系較近,聚為一個(gè)亞簇。圖2-2PY3的16SrRNA序列系統(tǒng)發(fā)育樹Figure2-2PhylogenetictreeofstrainPY316SrRNAsequence2.2.2菌株的最佳生長條件菌株P(guān)Y3在不同培養(yǎng)溫度和不同初始pH值條件下的生長結(jié)果表明(圖2-3,圖2-4),菌株P(guān)Y3在25-35℃、pH6-8范圍內(nèi)生長良好,最佳生長條件為pH6.0、25℃。2.2.3菌株的降解特性將菌株在不同溫度條件下培養(yǎng),其降解啶氧菌酯的結(jié)果(圖2-3)表明,菌


本文編號:3337469

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