目的:通過對長鏈酰基輔酶A合成酶（LACS2）、檸檬酸合酶（CIS1）和轉(zhuǎn)錄因子（DOF）的共調(diào)控,構建萊茵衣藻（Chlamydomonas Reinhardtii）的高油脂積累三基因藻株.方法:將雙基因沉默載體（LACS2-CIS1）轉(zhuǎn)入DOF工程藻中得到三基因藻株,分析了其生長狀況、淀粉、蛋白質(zhì)及脂肪酸含量.結(jié)果:與萊茵衣藻cc849相比,三基因藻株生長狀態(tài)相似,淀粉和蛋白無明顯改變,胞內(nèi)中性脂含量明顯增加,且脂肪酸含量上升了31%.在熱激啟動作用下,三基因藻株淀粉和蛋白下降了58%和26%,胞內(nèi)中性脂含量增加74%,脂肪酸含量上升了52%.結(jié)論:三基因共調(diào)控可促進萊茵衣藻胞內(nèi)油脂積累. 

【文章來源】：中南民族大學學報(自然科學版). 2020,39(05)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

pMaa7IR/LACS2-CIS1 IR載體的構建

微藻生物量在生物燃料、高價值營養(yǎng)品等產(chǎn)品的大規(guī)模生產(chǎn)起著很重要的因素.對比三基因藻株(DLC-4)與cc849(WT)的生長(圖3a),在8 d的培養(yǎng)期間,2種微藻生長趨勢相似,均可以達到較高細胞密度1.4×107 個/mL.DLC-4在接種后的第4 d進入平臺期,比WT提前1 d.胞內(nèi)中性脂隨著細胞的生長不斷積累,在對數(shù)期后期和平臺期積累的油脂最高(圖3b),DLC-4的中性脂在第5 d以后趨于平穩(wěn),而WT的中性脂在第5 d達到最大值.對比培養(yǎng)第6 d藻株的蛋白(圖3c),淀粉(圖3d)以及脂肪酸(圖3e)的含量,發(fā)現(xiàn)與WT相比,DLC-4的蛋白和淀粉含量略微下降,淀粉含量分別為73.64 mg/g和66.90 mg/g;蛋白含量分別為134.29 mg/g和122.99 mg/g;而胞內(nèi)脂肪酸含量上升了31%.這說明降低CIS1和LACS2活性引導更多的碳流量流向脂肪酸合成[2]和減少了脂肪酸的氧化[4].圖3 正常培養(yǎng)條件下衣藻的生理生化特性

正常培養(yǎng)條件下衣藻的生理生化特性

【參考文獻】：
期刊論文
[1]藻菌共生系統(tǒng)處理豬糞廢水的研究[J]. 王海英,梅毅強,范琪,安達,韋嘉璐,劉柑杏.  中南民族大學學報(自然科學版). 2019(03)



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