目的:肺癌是在世界范圍內(nèi)被普遍診斷的癌癥,肺癌相關(guān)的死亡率和發(fā)病率在中國(guó)每年都在上升[1]。盡管目前除了手術(shù)、放化療等常規(guī)的治療手段,對(duì)于肺腺癌已經(jīng)應(yīng)用分子診斷和靶向藥物等綜合治療手段,肺腺癌患者預(yù)后仍然很差,五年生存率僅約為15%[2]。目前雖有一些能夠預(yù)測(cè)肺腺癌預(yù)后的標(biāo)志物,然而由于生物的多樣性及個(gè)體的差異,相同病理分型的患者仍可能擁有不同的預(yù)后,影響肺腺癌預(yù)后的機(jī)制仍有很多空間亟待探索。影響肺腺癌預(yù)后的因素和生物標(biāo)志物一直是肺癌研究的主要方向之一。揭示影響肺腺癌預(yù)后的標(biāo)志物不僅能幫我們更好的預(yù)測(cè)患者的生存率,還能為肺腺癌的精準(zhǔn)治療及個(gè)體化治療提供新思路、新方向。放射治療在肺腺癌的治療中起著關(guān)鍵的作用,是肺腺癌標(biāo)準(zhǔn)治療的一部分,早期或寡轉(zhuǎn)移性病變可用立體定向放射治療,局部晚期III期肺腺癌將接受胸部局部放療和全身化療[3]。放射敏感性是影響肺腺癌放射治療療效的主要原因之一。腫瘤對(duì)放射治療的抵抗是一種常見(jiàn)現(xiàn)象,其機(jī)制尚不完全清楚。同時(shí)在治療中受限于對(duì)正常組織的保護(hù),不能過(guò)多的提高放射劑量。如何克服腫瘤的放射抗性,提高放射敏感性,最大限度的殺傷腫瘤細(xì)胞,是目前放射治療的一個(gè)主要研究方向... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

2.2.1分離膠配比

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文8圖2.6.2.2.2濃縮膠配比②上樣和電泳：確定SDS-PAGE凝膠固后將其置于電泳槽中，加電泳液，拔梳子，兩側(cè)泳道中各加入5μL蛋白marker標(biāo)記，其余泳道20μL左右蛋白樣品，采用恒壓電泳，80V跑濃縮膠，蛋白進(jìn)入分離膠后調(diào)整至120V恒壓電泳，待目的蛋白分離或蛋白跑至分離膠底部結(jié)束電泳。③轉(zhuǎn)�。号渲�500mL轉(zhuǎn)膜液，取下凝膠，去除濃縮膠及多余膠，根據(jù)分離膠的大小裁剪合適尺寸的PVDF膜，將濾紙、膠、PVDF膜（做好標(biāo)記，甲醇活化1min左右）、海綿夾浸泡于轉(zhuǎn)膜液中，按“（黑－）海綿－濾紙－凝膠－PVDF膜－濾紙－海綿（紅＋）”的順序進(jìn)行組裝。轉(zhuǎn)膜器排盡氣泡，放入轉(zhuǎn)移槽，倒入轉(zhuǎn)膜液浸沒(méi)轉(zhuǎn)移夾。恒流200mA，1.5h。轉(zhuǎn)膜裝置放于4℃冷庫(kù)，置于冰上。④免疫檢測(cè)：TBST配制5%脫脂牛奶封閉PVDF膜中1h，TBST搖晃洗膜3次，5min/次。于相應(yīng)一抗中4℃冰箱封閉過(guò)夜，次日將膜取出，TBST中搖洗3次，5min/次。按比例稀釋二抗，將膜室溫孵育于其中1h，TBST中搖洗3次，5min/次。ECL發(fā)光液1:1配制，均勻滴加于漂洗后的PVDF膜上，經(jīng)發(fā)光儀顯像后觀察并采集圖像。2.6.3免疫組化染色1)烤片：電熱恒溫培養(yǎng)箱中65℃，4-6小時(shí)2)脫蠟：依次將載玻片放入二甲苯（10min）-二甲苯（10min）-100%酒精（5min）-95%酒精（5min）-80%酒精（5min）-70%酒精（5min）3)抗原修復(fù)：脫蠟后在清水中沖洗一段時(shí)間，將載玻片放入煮沸的檸檬酸鹽修復(fù)液其中（完全沒(méi)入其中），煮20min，然后室溫晾干（載玻片不拿出，繼續(xù)放在

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文103結(jié)果3.1肺腺癌差異基因結(jié)果利用R軟件的edgeR包對(duì)535例肺腺癌組織及59例癌旁組織樣本測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，共篩選出癌與癌旁5589個(gè)差異基因，其中2463個(gè)上調(diào)差異基因，171個(gè)下調(diào)差異基因，通過(guò)gplots軟件包根據(jù)差異基因FDR值及l(fā)og2FC表達(dá)倍數(shù)繪制出火山圖（圖3.1.1）。TEDC2(即C16orf59)mRNA在肺腺癌組織中表達(dá)上調(diào)，按FDR值升序排列上調(diào)表達(dá)的基因top5具體結(jié)果見(jiàn)下表（表3.1.1）。圖3.1.1差異基因火山圖（log2FC>3倍，F(xiàn)DR<0.01，紅色為顯著上調(diào)，綠色為顯著下調(diào)）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)城市癌癥早診早治項(xiàng)目進(jìn)展[J]. 陳萬(wàn)青,李霓,石菊芳,任建松,陳宏達(dá),李江,代敏,赫捷.  中國(guó)腫瘤. 2019(01)
[2]CUL4A作用機(jī)制及其與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 文亦戈,易黎明,肖玲,周輝.  腫瘤藥學(xué). 2018(05)
[3]2014年中國(guó)分地區(qū)惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬(wàn)青,孫可欣,鄭榮壽,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),赫捷.  中國(guó)腫瘤. 2018(01)



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