瓜類細(xì)菌性果斑�。╞acterial fruit blotch,BFB）由革蘭氏陰性細(xì)菌——西瓜噬酸菌（Acidovorax citrulli）引起,該病害是威脅世界西甜瓜產(chǎn)業(yè)的一種毀滅性的種傳病害。它可以在西瓜和甜瓜上快速傳播并造成嚴(yán)重?fù)p失,同時(shí)也可以危害其它葫蘆科作物,如:黃瓜、南瓜等。Ⅲ型分泌系統(tǒng)（type Ⅲ secretion system,T3SS）和雙組分信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)（two-component signal transduction system,TCSTS）是革蘭氏陰性細(xì)菌的關(guān)鍵毒力因子,二者可以參與并調(diào)節(jié)多種反應(yīng),如:生理生化反應(yīng)和細(xì)胞的生命活動(dòng)等。為明確Ⅲ型分泌系統(tǒng)基因hrcQ、雙組分傳導(dǎo)系統(tǒng)基因abmK和abmR對(duì)西瓜噬酸菌的影響,本文分別構(gòu)建了三者的敲除載體,通過(guò)同源重組方法篩選得到ΔhrcQ、ΔabmK和ΔabmR突變菌株,將突變株與野生菌株和互補(bǔ)菌株一同進(jìn)行致病性及與致病能力相關(guān)的一系列表型測(cè)定,并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量對(duì)相關(guān)基因的表達(dá)量進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示:（1）hrcQ、abmK和abmR生物信息學(xué)分析HrcQ僅含有一個(gè)FliMN結(jié)構(gòu);Abmk中含有TM、P... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

果斑病在世界范圍內(nèi)的發(fā)生情況

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言1.1.2 瓜類細(xì)菌性果斑為害癥狀瓜類細(xì)菌性果斑病可以在寄主植物的整個(gè)生長(zhǎng)周期內(nèi)對(duì)植株產(chǎn)生影響，包括植株的子葉、真葉、果實(shí)等。染病初期會(huì)在子葉的背面形成水浸狀病斑，病斑最初呈離散分布，后沿葉脈逐漸擴(kuò)展，連接成片，通過(guò)莖部到達(dá)真葉的組織，造成整個(gè)幼苗的壞死。在染病后期，病斑逐漸變干，并形成狹長(zhǎng)，暗紅色的枯斑。果實(shí)染病的典型特點(diǎn)是在瓜類果實(shí)表皮上形成零星的病斑，隨后蔓延至整個(gè)果皮表面；同時(shí)，也可以向內(nèi)侵入果實(shí)，嚴(yán)重情況下造成果肉腐爛。在香瓜葉片上，病斑由棕褐色變成紅棕色，并從葉片邊緣擴(kuò)展呈 V 字形病斑。南瓜上除出現(xiàn)以上癥狀外，也可能出現(xiàn)大面積的黃萎。在果斑病的整個(gè)循環(huán)期中，最主要的初侵染源是帶菌種子。帶菌種子植入土壤，出苗后 6-10天可顯癥。此外，溫室和高溫高濕的環(huán)境條件，極易造成果斑病的流行。

圖 1.3 透射電子顯微鏡下及 KB 培養(yǎng)基中的西瓜噬酸菌Fig.1.3 A. citrulli in transmission electron microscopy and KB mediumA：透射電鏡下的鞭毛形態(tài)；B：KB 培養(yǎng)基中的菌落形態(tài)A: Flagellar morphology under transmission electron microscope; B: Colony morphology in KB medium.1.4 西瓜噬酸菌的檢測(cè)鑒定常見(jiàn)的西瓜噬酸菌的檢測(cè)鑒定技術(shù)包括表型分析法、血清學(xué)方法（酶聯(lián)免疫吸附、單克隆等）、分子生物學(xué)方法（常規(guī) PCR、Real-time PCR、BIO-PCR 等）等等。血清學(xué)方法通常會(huì)利用抗原抗體雜交從而實(shí)現(xiàn)對(duì)病原菌的快速檢測(cè)。Ha 等建立的改AS-Dot-ELISA 法可減少抗原抗體的非特異性結(jié)合，從而提高了西瓜噬酸菌的檢測(cè)效率（Ha et 009）。Zeng 等首次采用異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate, FITC）標(biāo)記的方法，制備流免疫層析試紙，該試紙減少了果斑病檢測(cè)的步驟，并有效地縮短了檢測(cè)時(shí)間。相較于傳統(tǒng)型分析，血清學(xué)等方法，這種熒光素標(biāo)記的方法優(yōu)點(diǎn)顯著，如：靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測(cè)短等，適用于海關(guān)檢疫及發(fā)病初期的快速檢測(cè)鑒定（Zeng et al., 2017）。分子生物學(xué)技術(shù)也廣泛應(yīng)用于該病害的檢測(cè)中，目前，鎖式探針（padlock probe, PLP）和交（dot-blot hybridization）技術(shù)可在病菌在基因組 DNA 濃度為 100 fg 閾值下被檢出（Tian et

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]西瓜噬酸菌趨化性及鞭毛素基因ΔcheAΔfliC雙突變體構(gòu)建及功能[J]. 張愛(ài)萍,張曉曉,吳林娜,于暢,喬培,楊玉文,關(guān)巍,趙廷昌.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2017(11)
[2]西瓜噬酸菌Aac-5AAA ATPases基因moxR和ruvB功能研究[J]. 李晶,楊玉文,趙廷昌.  植物病理學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]LuxR家族調(diào)控因子LuxR-2460對(duì)西瓜嗜酸菌致病力及生物膜形成的調(diào)控（英文）[J]. 王鐵霖,楊玉文,趙廷昌.  植物病理學(xué)報(bào). 2016(03)
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[9]hrpD6基因決定白葉枯病菌在煙草上的過(guò)敏反應(yīng)和在水稻上的致病性[J]. 郭曉霞,鄒華松,李玉蓉,鄒麗芳,陳功友.  微生物學(xué)報(bào). 2010(09)
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博士論文
[1]駱駝刺中慢生根瘤菌CCNWXJ12-2T鹽脅迫轉(zhuǎn)錄組分析及與耐鹽相關(guān)基因功能研究[D]. 柳曉東.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]西瓜噬酸菌越冬能力及兩菌群在同一寄主定殖動(dòng)態(tài)差異研究[D]. 孫柏欣.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]西瓜食酸菌（Acidovorax citrulli）Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑的高通量篩選[D]. 陳亮.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3323585