目的克隆表達細粒棘球絳蟲肌動蛋白（EgACT）基因,并獲得EgACT純化蛋白。方法將經(jīng)全序列合成、密碼子優(yōu)化合成的目的基因EgACT克隆入PET28a-SUMO表達載體中、轉(zhuǎn)化入Rosetta（DE3）中,誘導表達采用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）,經(jīng)鎳瓊脂糖凝膠親和層析法獲得純化蛋白。結(jié)果重組質(zhì)粒PET28a-SUMO-EgACT構(gòu)建成功。SDS-PAGE結(jié)果顯示,目的蛋白在Rosetta（DE3）中獲得高效表達,相對分子量約為60 kDa。結(jié)論完成細粒棘球絳蟲肌動蛋白基因的克隆及其在Rosetta（DE3）中的表達,并獲得純化蛋白。 

【文章來源】：中國高原醫(yī)學與生物學雜志. 2020,41(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒p ET28a-SUMO-Eg ACT酶切鑒定圖

誘導表達結(jié)果表明，EgA CT蛋白在20℃和37℃沉積物中具有可見帶(圖2)。利用鎳瓊脂凝膠親和色譜法進行蛋白質(zhì)純化，EgA CT蛋白在500 mM咪唑濃度時，被大量洗脫下來(圖3)。圖3 鎳瓊脂糖親和層析SDS-PAGE分析圖

鎳瓊脂糖親和層析SDS-PAGE分析圖

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3320310