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小麥K-TCMS育性恢復(fù)基因Rfk1-1B(CS)的分子作圖及育性恢復(fù)相關(guān)基因的鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-07-30 12:11
  基于兩系法研究的小麥KTM3315A是本課題組創(chuàng)制的一種K型細(xì)胞質(zhì)溫敏雄性不育(K-CMS)小麥,具有易恢復(fù)、易保持、無(wú)不良的細(xì)胞質(zhì)效應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),使其在雜交小麥育種中具有重要的價(jià)值。因此,選育其優(yōu)良、穩(wěn)定且恢復(fù)度高的恢復(fù)系十分關(guān)鍵,在小麥雜種優(yōu)勢(shì)利用研究中具有重要的意義。為了解決K-TCMS小麥恢復(fù)度高而穩(wěn)定的恢復(fù)系仍偏少的問(wèn)題,以及從農(nóng)業(yè)發(fā)展的角度出發(fā),研究K-TCMS育性恢復(fù)基因及育性恢復(fù)的分子機(jī)理就顯得尤為重要。本研究一方面以K型不育小麥KTM3315A和中國(guó)春為親本構(gòu)建的雜交組合BC1F1回交群體KTM3315A//中國(guó)春/TM3315B為試驗(yàn)材料,對(duì)其進(jìn)行育性鑒定及遺傳分析,此外,還利用SSR、EST-STS和KASP等分子標(biāo)記對(duì)育性恢復(fù)基因Rfk1-1B(CS)進(jìn)行了分子定位,旨在為K-TCMS小麥的遺傳機(jī)理和選育提供一定的理論基礎(chǔ);另一方面,以課題組多年組配的K型小麥近等基因系KTM3315A和KTM3315R的二核期花藥為測(cè)序材料,通過(guò)生物信息學(xué)分析差異表達(dá)基因,發(fā)掘和確定與育性恢復(fù)相關(guān)的重要候選基因和關(guān)鍵代謝通路,旨在為研究小... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 小麥雜種優(yōu)勢(shì)和雄性不育系的研究
    1.2 小麥K型雄性不育系的研究概況
        1.2.1 小麥K型雄性不育系的來(lái)源及特點(diǎn)
        1.2.2 小麥K型不育系育性恢復(fù)的配子傳遞研究
        1.2.3 小麥K型不育系育性恢復(fù)機(jī)理的研究
        1.2.4 小麥光溫敏不育系的研究與K型小麥溫敏不育系KTM3315A
    1.3 分子標(biāo)記在小麥育性恢復(fù)基因上的應(yīng)用
    1.4 高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與花藥發(fā)育研究
    1.5 研究的目的意義及技術(shù)路線
        1.5.1 研究的目的意義
        1.5.2 技術(shù)路線
第二章 K-TCMS小麥KTM3315A育性恢復(fù)基因Rfk1-1B(CS)的分子作圖
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試驗(yàn)材料
        2.1.2 材料種植與創(chuàng)建雜交組合
        2.1.3 掛牌、套袋與取材
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 KTM3315A、中國(guó)春和(KTM3315A/中國(guó)春)F1育性的生物學(xué)觀察
        2.2.2 KTM3315A//中國(guó)春/TM3315B的花粉粒I2-KI染色鑒定
        2.2.3 BC1F1群體的結(jié)實(shí)率育性調(diào)查
        2.2.4 親本及其BC1F1群體基因組DNA的提取、檢測(cè)及混池構(gòu)建
        2.2.5 育性恢復(fù)基因Rfk1-1B(CS)的分子作圖
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 花藥及小孢子的形態(tài)學(xué)及掃描電鏡觀察結(jié)果
        2.3.2 BC1F1群體的遺傳分析
        2.3.3 育性恢復(fù)基因Rfk1-1B(CS)的遺傳圖譜構(gòu)建
    2.4 討論
        2.4.1 KTM3315A發(fā)生敗育的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)
        2.4.2 K型不育系育性恢復(fù)的遺傳機(jī)制
        2.4.3 對(duì)K型不育系恢復(fù)基因的定位
第三章 K-TCMS小麥育性恢復(fù)相關(guān)代謝通路及候選基因的轉(zhuǎn)錄組分析
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 表型特征和顯微觀察
        3.2.2 RNA提取、cDNA文庫(kù)構(gòu)建及轉(zhuǎn)錄組深層測(cè)序
        3.2.3 基因組比對(duì)和序列組裝
        3.2.4 差異表達(dá)基因的生物信息學(xué)分析
        3.2.5 總糖含量測(cè)定
        3.2.6 類黃酮含量測(cè)定
        3.2.7 差異表達(dá)基因的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)(qRT-PCR)
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 表型特征的顯微觀察
        3.3.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序和基因組比對(duì)
        3.3.3 差異表達(dá)基因的鑒定
        3.3.4 差異表達(dá)基因的功能分類
        3.3.5 鑒定與育性恢復(fù)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子
        3.3.6 碳水化合物代謝和苯丙烷類生物合成途徑參與了Aegilops kotschyi細(xì)胞質(zhì)下花粉發(fā)育的調(diào)控
        3.3.7 可溶性糖和類黃酮的測(cè)定
        3.3.8 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果的qRT-PCR驗(yàn)證
    3.4 討論
        3.4.1 碳水化合物代謝影響細(xì)胞壁發(fā)育、花藥生長(zhǎng)和育性
        3.4.2 黃酮類化合物對(duì)可育花藥的發(fā)育至關(guān)重要
        3.4.3 參與調(diào)控花粉發(fā)育和雄性育性的轉(zhuǎn)錄因子
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]小麥K型溫敏雄性不育系KTP116A的溫敏特性研究及隱性恢復(fù)基因定位[D]. 錢煥煥.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013



本文編號(hào):3311381

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