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miR-200c通過下調(diào)TUBB3基因表達(dá)逆轉(zhuǎn)老年肺癌患者順鉑耐藥性的機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2021-07-27 11:54
  目的探討miR-200c逆轉(zhuǎn)肺癌細(xì)胞順鉑耐藥性的作用機(jī)制。方法 miR-200c模擬物轉(zhuǎn)染肺癌A549細(xì)胞后,采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測miR-200c的表達(dá);采用細(xì)胞活力測定(MTS)法檢測miR-200c對肺癌A549細(xì)胞順鉑耐受性的影響。采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測腫瘤細(xì)胞凋亡率的變化。采用Western blotting檢測腫瘤細(xì)胞耐藥蛋白survivin和Bcl-2蛋白的表達(dá)。通過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)miR-200c下游靶分子TUBB3表達(dá)存在差異后,構(gòu)建TUBB3 3′UTR的野生型和突變型熒光素酶報(bào)告載體,然后利用雙熒光素酶活性分析miR-200c對TUBB3基因表達(dá)的結(jié)合位點(diǎn)和調(diào)控作用。通過Western blotting檢測miR-200c對TUBB3蛋白表達(dá)的調(diào)控作用以及Bcl-2蛋白和腫瘤細(xì)胞耐藥蛋白survivin的表達(dá)。采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。結(jié)果與對照組相比,miR-200c轉(zhuǎn)染肺癌細(xì)胞株后,肺癌細(xì)胞對順鉑的敏感性呈明顯增加趨勢[IC50分別為(37.3±3.1)和(15.3±3.3)μmol/L,P<0.01]。... 

【文章來源】:中華老年多器官疾病雜志. 2020,19(06)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

miR-200c通過下調(diào)TUBB3基因表達(dá)逆轉(zhuǎn)老年肺癌患者順鉑耐藥性的機(jī)制


各組細(xì)胞凋亡率結(jié)果

細(xì)胞凋亡,蛋白,分子,情況


各組survivin和Bcl-2蛋白的表達(dá)情況

分子,蛋白,情況


miR-200c通過調(diào)控其下游靶分子TUBB3而影響survivin和Bcl2的表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3305732

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