中國黃連木（Pistacia chinensis Bunge.）是我國特有的重要生物能源樹種,其結(jié)果壽命長,但結(jié)實率低且果實單產(chǎn)量低,雌雄異株被認為是其低產(chǎn)的主因。項目組在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)雌雄同株黃連木資源,雌雄同株黃連木可進行自花授粉,打破了雌雄異株低產(chǎn)的瓶頸。為了探明黃連木性別決定機制并將雌雄同株資源投入實際生產(chǎn)中,項目組選取各性別表型分化關(guān)鍵期進行轉(zhuǎn)錄組、small RNA和蛋白的關(guān)聯(lián)分析,篩選到部分影響性別決定的基因和蛋白,其中與抗逆相關(guān)的HSF和HSP家族與中國黃連木花發(fā)育關(guān)系密切。本研究為了進一步探究黃連木PcHsf和PcHsp70-90基因的功能,以期揭示黃連木花發(fā)育過程中對逆境的響應(yīng)機制。主要結(jié)果有:1. 成功克隆了PcHsf和PcHsp70-90基因,并對基因全長序列進行了生物信息學分析,對PcHsf和PcHsp70-90蛋白進行氨基酸多重序列比對和系統(tǒng)進化樹分析得出,PcHsf蛋白與柑橘（Gossypium arboreum）親緣關(guān)系最近,PcHsp70-90蛋白與中華柑桔（Citrus sinensis）親緣性性較高。2. 構(gòu)建了35S::PcHsf、35S::PcHs... 

【文章來源】：北京林業(yè)大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PcHsf和PcHsp70-90的PCR擴增Figure3.1PCRamplificationofPcHsfandPcHsp70-90

結(jié)果和分析21A：markerDL2000及PcHsf；B：markerDL10000及PcHsp70-90A：markerDL2000andPcHsf；B：markerDL10000andPcHsp70-903.2PcHsf和PcHsp70-90基因的生物信息學分析3.2.1基因全長cDNA序列分析利用NACI在線程序ORFFinder進行開放閱讀框分析，PcHsf的核苷酸序列全長為859bp，其最大ORF長度為819bp，預(yù)測編碼273個氨基酸的蛋白質(zhì)。圖3.2中紅色圓圈代表起始密碼子，氨基酸序列起始位置為41，終止位置為859。利用在線軟件Protparam推測分子質(zhì)量為30.37kD，包含氨基酸種類20種，稍微豐富的有賴氨酸Lys（K：9.9%）、絲氨酸Ser（S：9.5%）、天冬氨酸Asp（D：8.8%），理論等電點(pI)為7.55，帶正電氨基酸殘基總數(shù)(Arg+Lys)為41總平均親疏水系數(shù)為-0.708。紅色圓圈代表起始密碼子；綠色圓圈代表終止密碼子。圖3.2PcHsf基因cDNA全長ORF分析Figure3.2ORFanalysisoffull-lengthcDNAofPcHsfgene同上述方法對PcHsp70-90進行序列分析，該基因的核苷酸序列全長為1734bp，其最大ORF長度為1605bp，預(yù)測編碼534個氨基酸的蛋白質(zhì)。圖3.3中紅色圓圈代表起始密碼子，氨基酸序列起始位置為1，綠色圓圈代表終止密碼子，終止位置為1605。利用Protparam在線軟件推測分子質(zhì)量為60.49kD，包含氨基酸種類20種，稍微豐

黃連木花發(fā)育相關(guān)基因PcHsf及PcHsp70-90的功能探究22富的有Ala（A：12.4%），Glu（E：11.4%），Lys（K：11.4%），理論等電點(pI)為6.54，帶正電氨基酸殘基總數(shù)(Arg+Lys)為90總平均親疏水系數(shù)為-0.888。紅色圓圈代表起始密碼子；綠色圓圈代表終止密碼子。圖3.3PcHsp70-90基因cDNA全長ORF分析Figure3.3Full-lengthORFanalysisofPcHsp70-90genecDNA3.2.2蛋白的親/疏水性預(yù)測分析根據(jù)PcHsf和PcHsp70-90蛋白進行親/疏水性分析（圖3.4）：PcHsf蛋白多肽鏈第184位具有最高分值1.933，疏水性最強，第238位具有最低分值-3.233，親水性最


本文編號：3305403