發(fā)布時(shí)間：2021-07-25 19:15

　　小麥（Triticum aestivum L.）是全世界種植面積最大的糧食作物。非生物脅迫是制約小麥生產(chǎn)的主要因素,嚴(yán)重影響小麥的生長發(fā)育,生物產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量的形成。隨著全球氣候變化,極端天氣事件頻發(fā),非生物脅迫對(duì)小麥生產(chǎn)的影響將進(jìn)一步加劇。了解小麥的抗逆機(jī)理是培育抗逆高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)新品種的前提和基礎(chǔ)。植物在長期進(jìn)化過程中形成了非常復(fù)雜的機(jī)制以適應(yīng)各種各樣的環(huán)境脅迫,其中蛋白質(zhì)泛素化是應(yīng)對(duì)環(huán)境變化快速、有效的方式之一。U-box型E3泛素連接酶（PUB）是植物特有的一類E3連接酶,參與對(duì)多種逆境脅迫的應(yīng)答。本研究以極抗旱小麥品種旱選10號(hào)為材料,克隆了泛素連接酶基因TaPUB57-2A,基因表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)TaPUB57-2A參與對(duì)多種逆境脅迫的應(yīng)答,為進(jìn)一步明確其與小麥抗逆性的關(guān)系,揭示其參與抗逆應(yīng)答的分子機(jī)制,開展了一系列研究,通過啟動(dòng)子區(qū)順式作用元件分析、基因表達(dá)模式分析、體外泛素化、蛋白互作和轉(zhuǎn)基因水稻功能分析等,明確了TaPUB57-2A在不同逆境脅迫下的表達(dá)模式,初步揭示了其在逆境脅迫應(yīng)答中的功能。主要研究結(jié)果如下:（1）克隆了小麥TaPUB57-2A的基因組序列,發(fā)現(xiàn)它有12個(gè)外顯... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

泛素-蛋白酶體途徑（RahimiN,2012）

U-box型泛素連接酶的分類（RYUetal.,2019）

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章緒論11論依據(jù)。1.5.2技術(shù)路線本研究以優(yōu)異抗旱小麥品種旱選10號(hào)為材料，克隆泛素連接酶基因TaPUB57-2A。在苗期分別進(jìn)行干旱（PEG-6000）、高鹽、低溫及ABA處理，采用qRT-PCR方法分析TaPUB57-2A在不同逆境處理下的表達(dá)模式。轉(zhuǎn)化水稻，在獲得轉(zhuǎn)基因純系后在苗期進(jìn)行鹽處理，通過形態(tài)學(xué)觀察和生理生化指標(biāo)測定，解析目標(biāo)基因的生物學(xué)功能。通過體外泛素化實(shí)驗(yàn)，明確TaPUB57-2A是否具有E3連接酶活性。篩選酵母文庫，發(fā)現(xiàn)候選互作蛋白，并通過酵母雙雜交、螢火蟲熒光素酶互補(bǔ)、Pull-down等試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。通過泛素化分析，進(jìn)一步明確互作蛋白是否為TaPUB57-2A的靶蛋白。綜合以上研究結(jié)果，以期明確TaPUB57-2A的生物學(xué)功能，揭示其參與逆境脅迫應(yīng)答的生理和分子機(jī)制。具體技術(shù)路線見圖1-3。圖1-3技術(shù)路線Fig.1-3Technicalstrategy


本文編號(hào)：3302613